Kim, Jin-Yeon;Kim, Bu-yeon;Moon, Kyung-Ho;Lee, Jin-Ho
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.1
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pp.78-86
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2019
Recombinant Corynebacterium glutamicum producing N-acetylglucosamine (GlcNAc) was constructed by metabolic engineering. To construct a basal strain producing GlcNAc, the genes nagA, nagB, and nanE encoding N-acetylglucosamine-6-phosphate deacetylase, glucosamine-6-phosphate deaminase, and N-acetylmannosamine-6-phosphate epimerase, respectively, were sequentially deleted from C. glutamicum ATCC 13032, yielding strain KG208. In addition, the genes glmS and gna1 encoding glucosamine-6-phosphate synthase and glucosamine-6-phosphate N-acetyltransferase, which originated from C. glutamicum and Saccharomyces cerevisiae, respectively, were expressed in several expression vectors. Among several combinations of glmS and gna1 expression, recombinant cells expressing glmS and gna1 under control of the ilvC promoter produced 1.77 g/l of GlcNAc and 0.63 g/l of glucosamine in flask cultures.
The bioactive functions of oligosaccharides from human milk have been reported by many studies. Many of oligosaccharides isolated from colostrum and/or milk of dairy animals have been reported to have similar chemical structures with those in human colostrum and/or milk. It has been proved by several studies that the oligosaccharides with similar chemical structure shared common bioactivities. Among domesticated dairy animals, bovine/cattle, caprine/goat, and ovine/sheep are the most commonly used species to isolate oligosaccharides from their colostrum and/or milk. Several studies on the oligosaccharides from goat colostrum and milk have revealed similar properties to that of human milk and possess the highest content of sialyl oligosaccharides (SOS) as compared to other ruminants. Indonesia ranks first in Association of Southeast Asian Nations (ASEAN) for goat milk production. Therefore, goat milk is the second most consumed milk in the country. The most reared dairy goat breed in Indonesia is Etawah Grade. However, oligosaccharides from Indonesia dairy animals including goat, have not been characterized. This is the first study to characterize oligosaccharides from Indonesia dairy animals. The present study was aimed to isolate and characterize oligosaccharides, specifically SOS from the colostrum of Etawah Grade goats by using proton/1H-nuclear magnetic resonance. The SOS successfully characterized in this study were: Neu5Ac(α2-3)Gal(β1-4)Glc (3'-N-acetylneuraminyllactose), Neu5Ac(α2-6)Gal(β1-4)Glc (6'-N-acetylneuraminyllactose), Neu5Gc(α2-3)Gal(β1-4)Glc (3'-N-glycolylneuraminyllactose), Neu5Gc(α2-6)Gal(β1-4)Glc (6'-N-glycolylneuraminyllactose), Neu5Ac(α2-6)Gal(β1-4) GlcNAc (6'-N-acetylneuraminyllactosamine) and Neu5Gc(α2-6)Gal(β1-4)GlcNAc (6'-N-glycolylneuraminyllactosamine). This finding shows that Etawah Grade, as a local dairy goat breed in Indonesia, is having significant potential to be natural source of oligosaccharides that can be utilized in the future food and pharmaceutical industries.
Kim, Soo-Jin;Nahm, Heun-Woo;Lee, Joon-Sang;Joo, Kyung-Whan
Applied Microscopy
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v.30
no.1
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pp.101-111
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2000
In this study, the distribution of lectin receptors in Paragonimus westermani tissue was explored using colloidal gold label complexed with lectin WGA purified from wheat germ (Triticum vulgare). The lectin WGA gold complex, shown to recognize GlcNAc (N-acetylgalactosamine) and NeuNAc (N-acetylneuraminic acid) regions, was applied to detect binding sites in Lowicryl HM 20 sections viewed under electron microscope. Labeled sections of the metacercaria revealed gold particles specifically distributed on the tegumental syncytium and lamella of the excretory canal. Labeling of young adult tissue was then quantified and compared to that of adult worm tissue. Adult worm tissue sections resulted in specific gold particle distribution on the lamella of caecal epithelium and excretory canal. These results indicate that lectin WGA receptors are located in the tegumental syncytium and lamella of the excretory canal of the metacercariae, and in the lamella of the caecum and excretory canal of the young adult and adult. Therefore, the GlcNAc and NeuNAc regions in the tegumental syncytium appear to be functionally associated with cell-recognition and protection from the immune system of the host, and linked with membrane transport and absorption of nutrients in the lamella of the excretaory canal and caecal epithelia.
Alloisoleucine from the plasma of maple syrup disease affected patients was separated from isolecine and identified by gas liquid chromatography and mass spectrometry.
Diosgenin in an Indonesian Costus speciosus was determined by capillary gas-liquid chromatography (GLC). The experimental conditions for the hydrolysis, extraction and acetylation of the diosgenin, and the determination by GLC were investigated. 0.20g of dried sample powder was refluxed in the solution of 3N HCI and xylene at 95∼100${\circ}C$ for 4 hours and the xylene layer was separated. The residue evaporated the xylene was refluxed in 20 : 80 acetic anhydride-pyridine for 30 minutes and the diosgenin acetate was extracted with diethyl ether. Dehydrated with anhydrous $Na_2SO_4$ and evaporated the ether, the residue was dissolved in 5.00ml of n-hexane and injected into GLC. Capillary column of SE-30 25m ${\times}$ 0. 33mm was installed in GLC and the column temperature was increased from 180${\circ}$ to 270${\circ}C$ at rate of 10${\circ}C$/min. The flow rate of carrier gas $N_2$ was 2ml/min and FID was used to detect. The analytical result of the diosgenin was 0.281% and relative standard deviation of 5 measures was 1.8%.
Kim, Sang Tae;Yoo, Sung-Je;Song, Jaekyeong;Weon, Hang-Yeon;Sang, Mee Kyung
Research in Plant Disease
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v.25
no.3
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pp.136-142
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2019
Drought stress is considered as one of major abiotic stresses; it leads to reduce plant growth and crop productivity. In this study, we selected bacterial strains for alleviating drought stress in chili pepper plants. As drought-tolerant bacteria, 28 among 447 strains were pre-selected by in vitro assays including growth in drought condition with polyethylene glycol and plant growth-promoting traits including production of 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase, indole-3-acetic acid and exopolysaccharide. Sequentially, 7 among pre-selected 28 strains were screened based on relative water content (RWC); GLC02 and KJ40, among seven strains were finally selected by RWC and malondialdehyde (MDA) in planta trials under an artificial drought condition by polyethylene glycol solution. Two strains GLC02 and KJ40 reduced drought stress in a natural drought condition as well as an artificial condition. Strains GLC02 or KJ40 increased shoot fresh weight, chlorophyll and stomatal conductance while they decreased MDA in chili pepper plants under a natural drought condition. However, two strains did not show biocontrol activity against diseases caused by Phytophthora capsici and Xanthomonas campestris pv. vesicatoria in chili pepper plants. Taken together, strains GLC02 or KJ40 can be used as bio-fertilizer for alleviation of drought stress in chili pepper plants.
Abstract Extracellular chitinase was purified from the culture liquid of the marine bacterium, Bacillus sp. LJ-25 , and its enzymatic properties were examined. The purified chitinase exhibited a single band on SDS-PAGE and the molecular weight was estimated to be approximately 50 kDa. The optimum pH and temperature for the enzymatic activity were 7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. The activity of the chitinase was strongly inhibited by $Zn^{2+}$ and slightly inhibited by $Ba^{2+},{\;}Co^{2+},{\;}Mn^{2+},{\;}and{\;}Cu^{2+}$. The purified chitinase did not hydrolyze $p-nitrophenolN-acetyl-{\bata}-D-glucosaminide{\;}(GlcNAc)_2$ and Micrococcus lysodeikticus cells, which are known to be the substrates for exo-type chitinase. Among the hydrolyzates of colloidal chitin, $(GlcNAc)_2$ was in the highest concentration with small amounts of GlcNAc and $(GlcNAc)_3$..
D-(+)-glucose (Glc) was added to the original Fricke polyvinyl alcohol-glutaraldehyde-xylenol orange (FPGX) hydrogel dosimeter system to make a more stable FPGX hydrogel three-dimensional dosimeter in this paper. Polyvinyl alcohol was used as a substrate, which was combined with Fricke solution. Various concentrations of Glc were tested with linear relevant fitting for optimal hydrogel production conditions. The effects of various formulations on the stability and sensitivity of dosimeters were evaluated. The results indicated that D-(+)-Glc, as a free radical scavenger, had a great effect on stabilizing the dose response related to absorbency and reducing the auto-oxidization of ferrous ions. A careful doping with Glc could slow down the color change of the dosimeter before and after radiation without any effect on the sensitivity of the dosimeter.
Park, Bo-Hyun;Oh, Seung-chan;Oh, Hyung-Jin;Lee, Byong-Jun
Proceedings of the KIEE Conference
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2015.07a
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pp.268-269
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2015
복잡화된 국내 전력계통의 부하는 지속적으로 증가하는 반면 새로운 설비의 건설이 어렵고, 지역 편중화된 발전설비 때문에 선로 과부하, 고장전류, 전압안정도 문제가 발생하고 있다. 초고압 선로의 고장은 계통을 크게 불안정하게 하기 때문에 고장에 의해 영향을 받는 지역과 고장 후 계통의 조류변화를 분석하는 것은 중요하다. 현재 고장의 영향을 분석하기 위하여 조류계산을 통한 정적해석과 시모의를 통한 동적해석을 사용하다. 그리고 좀 더 큰 그림을 그리기 위하여 각종 전압안정도 지수를 사용한다. 하지만 일반적으로는 고장이후 계통에서 유효전력 흐름에 변화가 있는 지역을 분석하기 위해서는 번거로운 작업이 필요한 단점이 있다. Generation loass coefficient(GLC)는 transmmision loss factor(TLF)에서 발생한 문제를 분석하기 위해 제안되었고, load loss coefficient(LLC)는 각 부하에 전력을 공급하기 위해 발생하는 손실을 발전기별로 분석하기 위해 제안되었다. 위의 두 지수는 계통해석을 위해서 제안된 것은 아니었으나 전력조류추적기법을 기반으로하여 개발되었기 때문에 계통의 전력조류 흐름 변화에 대한 정보를 담고 있다는 특징이 있다. 본 논문에서는 GLC와 LLC의 개념에 대하여 설명하고 계통에서 발생하는 고장의 영향을 해석하는 관점에서 GLC와 LLC를 활용한다. 시뮬레이션 결과를 통해 GLC와 LLC지수로 계통에 대한 이해를 높이는 방안에 대하여 제안한다.
Journal of mucopolysaccharidosis and rare diseases
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v.2
no.1
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pp.13-16
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2016
Mucolipidosis (ML) II/III are autosomal recessive diseases caused by deficiency of post-translational modification of lysosomal enzymes. The mannose-6-phosphate (M6P) residue in lysosomal enzymes synthesized by N-acetylglucosamine 1-phosphotransferase (GlcNAc-phosphotransferase) serves as recognition marker for trafficking in lysosomes. GlcNAc-phosphotransferase is encoded by GNPTAB and GNPTG. Mutations in GNPTAB cause severe ML II alpha/beta and the attenuated ML III alpha/beta. Whereas mutations in GNPTG cause the ML III gamma, the attenuated type of ML III variant. For the diagnostic approaches, increased urinary oligosaccharides excretion could be a screening test in clinically suspicious patients. To confirm the diagnosis, instead of measuring the activity of GlcNAc phosphotransferase, measuring the enzymatic activities of different lysosomal hydrolases are useful for diagnosis. The activities of several lysosomal hydrolases are decreased in fibroblasts but increased in serum of the patients. In addition, the sequence analysis of causative gene is warranted. Therefore, the confirmatory diagnosis requires a combination of clinical evaluation, biochemical and molecular genetic testing. ML II/III show complex disease manifestations with lysosomal storage as the prime cellular defect that initiates consequential organic dysfunctions. As there are no specific therapy for ML to date, understanding the molecular pathogenesis can contribute to develop new therapeutic approaches ultimately.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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