To determine the biological effects of low-dose-rate radiation ($^{137}Cs$, 2.95 mGy/h) on EL4 lymphoma cells during 24 h, we investigated the expression of genes related to apoptosis, cell cycle arrest, DNA repair, iron transport, and ribonucleotide reductase. EL4 cells were continuously exposed to low-dose-rate radiation (total dose: 70.8 mGy) for 24 h. We analyzed cell proliferation and apoptosis by trypan blue exclusion and flow cytometry, gene expression by real-time PCR, and protein levels with the apoptosis ELISA kit. Apoptosis increased in the Low-dose-rate irradiated cells, but cell number did not differ between non- (Non-IR) and Low-dose-rate irradiated (LDR-IR) cells. In concordance with apoptotic rate, the transcriptional activity of ATM, p53, p21, and Parp was upregulated in the LDR-IR cells. Similarly, Phospho-p53 (Ser15), cleaved caspase 3 (Asp175), and cleaved Parp (Asp214) expression was upregulated in the LDR-IR cells. No difference was observed in the mRNA expression of DNA repair-related genes (Msh2, Msh3, Wrn, Lig4, Neil3, ERCC8, and ERCC6) between Non-IR and LDR-IR cells. Interestingly, the mRNA of Trfc was upregulated in the LDR-IR cells. Therefore, we suggest that short-term Low-dose-rate radiation activates apoptosis in EL4 lymphoma cells.
The genetic diversity and population structure of Potentilla freyniana in Korea were determined using genetic variations at 19 allozyme loci. Thirteen of the 19 loci (68.4%) showed detectable polymorphism. Genetic diversity at the population level was high ($H_{EP}$ = 0.270). Total genetic diversity values ($H_T$) varied between 0.190 and 0.584, giving an average overall polymorphic loci of 0.371. The interlocus variation of genetic diversity within populations ($H_S$) was high (0.354). On a per locus basis, the proportion of total genetic variation due to differences among populations ($G_{ST}$) ranged from 0.008 for Fe-2 to 0.310 for Gpi with a mean of 0.065, indicating that about 6.5% of the total allozyme variation was among populations. Wide geographic ranges, perennial herbaceous nature and the persistence of multiple generations are associated with the high level of genetic variation in P. freyniana. The estimate of gene flow based on $G_{ST}$, was high among Korean populations of P. freyniana (Nm =3.57). Although P. freyniana usually propagated by asexually-produced ramets, I could not rule out the possibility that sexual reproduction occurred at a low rate because each ramet may produce terminal flowers.
Cao, Rui;Wu, Wang Jun;Zhou, Xiao Long;Xiao, Peng;Wang, Yi;Liu, Hong Lin
Molecules and Cells
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v.38
no.4
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pp.304-311
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2015
Most follicles in the mammalian ovary undergo atresia. Granulosa cell apoptosis is a hallmark of follicle atresia. Our previous study using a microRNA (miRNA) microarray showed that the let-7 microRNA family was differentially expressed during follicular atresia. However, whether the let-7 miRNA family members are related to porcine (Sus scrofa) ovary follicular apoptosis is unclear. In the current study, real-time quantitative polymerase chain reaction showed that the expression levels of let-7 family members in follicles and granulosa cells were similar to our microarray data, in which miRNAs let-7a, let-7b, let-7c, and let-7i were significantly decreased in early atretic and progressively atretic porcine ovary follicles compared with healthy follicles, while let-7g was highly expressed during follicle atresia. Furthermore, flow cytometric analysis and Hoechst33342 staining demonstrated that let-7g increased the apoptotic rate of cultured granulosa cells. In addition, let-7 target genes were predicted and annotated by TargetScan, PicTar, gene ontology and Kyoto encyclopedia of genes and genomes pathways. Our data provide new insight into the association between the let-7 miRNA family in granulosa cell programmed death.
The study of genetic diversity was carried out in Atractylodes japonica $K_{OIDZ}$. Although this species has been regarded as medically important one, there is no report on population structure in Korea. Starch gel electrophoresis was used to investigate the allozyme variation and genetic structure of eight Korean populations of this species. Of the 15 genetic loci surveyed, nine (60.0%) was polymorphic in at least one population. Genetic diversity was high at the species level $(H_{es}=0.144)$, whereas, that of the population level was relatively low $(H_{ep}=0.128)$. Nearly 87% of the total genetic diversity in A. japonica was apportioned within populations. The sexual reproduction, high fecundity, and perennials are proposed as possible factors contributing to high genetic diversity. The indirect estimated of gene flow based on Gst was 1.69.
Aldose reductase (AR) is known to play a crucial role in the mediation of diabetic and cardiovascular complications. Recently, several studies have demonstrated that allergen-induced airway remodeling and ovalbumin-induced asthma is mediated by AR. Epalrestat is an aldose reductase inhibitor that is currently available for the treatment of diabetic neuropathy. Whether AR is involved in pathogenesis of pulmonary fibrosis and whether epalrestat attenuates pulmonary fibrosis remains unknown. Pulmonary fibrosis was induced by intratracheal instillation of bleomycin (5 mg/kg) in rats. Primary pulmonary fibroblasts were cultured to investigate the proliferation by BrdU incorporation method and flow cytometry. The expression of AR, TGF-${\beta}_1$, ${\alpha}$-SMA and collagen I was analyzed by immunohistochemisty, real-time PCR or western blot. In vivo, epalrestat treatment significantly ameliorated the bleomycin-mediated histological fibrosis alterations and blocked collagen deposition concomitantly with reversing bleomycin-induced expression up-regulation of TGF-${\beta}_1$, AR, ${\alpha}$-SMA and collagen I (both mRNA and protein). In vitro, epalrestat remarkably attenuated proliferation of pulmonary fibroblasts and expression of ${\alpha}$-SMA and collagen I induced by TGF-${\beta}_1$, and this inhibitory effect of epalrestat was accompanied by inhibiting AR expression. Knockdown of AR gene expression reversed TGF-${\beta}_1$-induced proliferation of fibroblasts, up-regulation of ${\alpha}$-SMA and collagen I expression. These findings suggest that AR plays an important role in bleomycin-induced pulmonary fibrosis, and epalrestat inhibited the progression of bleomycin-induced pulmonary fibrosis is mediated via inhibiting of AR expression.
Kim, Dae-In;Park, Il-Kook;Ota, Hidetoshi;Fong, Jonathan J.;Kim, Jong-Sun;Zhang, Yong-Pu;Li, Shu-Ran;Choi, Woo-Jin;Park, Daesik
Journal of Ecology and Environment
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v.43
no.4
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pp.332-340
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2019
Background: Studies of morphological variation within and among populations provide an opportunity to understand local adaptation and potential patterns of gene flow. To study the evolutionary divergence patterns of Schlegel's Japanese gecko (Gekko japonicus) across its distribution, we analyzed data for 15 morphological characters of 324 individuals across 11 populations (2 in China, 4 in Japan, and 5 in Korea). Results: Among-population morphological variation was smaller than within-population variation, which was primarily explained by variation in axilla-groin length, number of infralabials, number of scansors on toe IV, and head-related variables such as head height and width. The population discrimination power was 32.4% and in cluster analysis, populations from the three countries tended to intermix in two major groups. Conclusion: Our results indicate that morphological differentiation among the studied populations is scarce, suggesting short history for some populations after their establishment, frequent migration of individuals among the populations, and/or local morphological differentiation in similar urban habitats. Nevertheless, we detected interesting phenetic patterns that may predict consistent linkage of particular populations that are independent of national borders. Additional sampling across the range and inclusion of genetic data could give further clue for the historical relationship among Chinese, Japanese, and Korean populations of G. japonicus.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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v.34
no.3
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pp.375-382
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2010
In this study, we developed a method to predict the residual stress distribution and thermal deformation caused by in-mold labeling (IML) processes. IML is one of the injection molding processes for injecting a material into a cavity and subsequently inserting a decorated film. The IML process can yield products with decorations of outstanding excellent quality in only one working step. Although the IML process has various advantages, it causes defects such as film delamination, wash-out, and flow marks. In particular, deformation is considered to be a major concern in terms of delamination. To validate the model, the deformation predicted by using a numerical model was compared with experimental results, and both results showed good agreement. We verified that the developed method can be used to obtain the design guidelines for preventing delamination in the initial design stage of the IML process.
Background: Anti-IgE mAb which binds circulating but not receptor-bound IgE has been shown to be effective in treatment for asthma and other allergic diseases. However, the mechanisms by which anti-IgE mAb influences the pathophysiological responses are remained to be illustrated. This study was undertaken to examine the therapeutic efficacy of non-anaphylactogenic anti-mouse IgE mAb using murine models of IgE-induced systemic fatal anaphylaxis. Methods: Active systemic anaphylaxis was induced by either penicillin V(Pen V) or OVA and passive systemic anaphylaxis was induced by either anaphylactogenic anti-mouse IgE or a mixture of anti-chicken gamma globulin (CGG) IgG1 mAb and CGG. The binding of the Fc portion of anti-IgE to CHO-stable cell line expressing mouse Fc ${\gamma}$ RIIb was examined using flow cytometry. Fc fragments of anti-IgE mAb were prepared using papain digestion. The expression of phosphatases in lungs were assessed by Western blotting and immunohistochemistry. Results: Anti-IgE mAb prevented IgE- and IgG-induced active and passive systemic fatal reactions. In both types of anaphylaxis, anti-IgE mAb suppressed antigen-specific IgE responses, but not those of IgG. Anti-IgE mAb neither prevented anaphylaxis nor suppressed the IgE response in Fc ${\gamma}$ RIIb-deficient mice. The Fc portion of anti-IgE mAb was bound to murine Fc ${\gamma}$ RIIb gene-transfected CHO cells and inhibited systemic anaphylaxis. Anti-IgE mAb blocked the anaphylaxis-induced downregulation of Fc ${\gamma}$ RIIb-associated phosphatases such as src homology 2 domain-containing inositol 5-phosphatase (SHIP) and phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten (PTEN). Conclusion: Anti-IgE mAb prevented anaphylaxis by delivering nonspecific inhibitory signals through the inhibitory IgG receptor, Fc ${\gamma}$ RIIb, rather than targeting IgE.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.33
no.5
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pp.445-454
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2007
Background: Phosphatidic acid(PA), an important second messenger, is involved in inflammation. Notably, cell-cell interactions via adhesion molecules playa central role in inflammation. This thesis show that PA induces expression of intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1) on macrophages and describe the signaling pathways. Materials and methods: Macrophages were cultured in the presence of 10% FBS and assayed cell to cell adhesion using HUVEC. For the gene and protein analysis, RT-PCR, Western blot and flow cytometry were performed. In addition, overexpressed cell lines for dominant negative PKC-${\delta}$ mutant established and tested their effect on the promoter activity and expression of ICAM-1 protein by PA. Results: PA-activated macrophages significantly increased adhering to human umbilical vein endothelial cell and this adhesion was mediated by ICAM-1. Pretreatment with rottlerin(PKC-${\delta}$ inhibitor) or expression of a dominant negative PKC-${\delta}$ mutant, but not Go6976(classical PKC-${\alpha}$ inhibitor) and myristoylated PKC-${\xi}$ inhibitor, attenuated PA-induced ICAM-1 expression. The p38 mitogen-activated protein kinase(MAPK) inhibitor blocked PA-induced ICAM-1 expression in contrast, ERK upstream inhibitor didn't block ICAM-1. Conclusion: These data suggest that PA-induced ICAM-1 expression and cell-cell adhesion in macrophages requires PKC-${\delta}$ activation and that PKC-${\delta}$ activation is triggers to sequential activation of p38 MAPK.
The Korean freshwater crayfish, Cambaroides similis, has recently suffered from range reduction and habitat degradation caused by environmental changes and water pollution. For the conservation and restoration of this species, it is necessary to understand the current population structures of Korean C. similis using estimation of their genetic variation. In this study, eight micro satellite loci were developed and characterized from 49 individuals collected from four locations: one population from Mt. Bukhan (BH) and three populations from Mt. Gwanak (GA) in Seoul, Korea. As a result, the number of alleles per locus ranged from 2 to 12. The observed heterozygosities and expected heterozygosities ranged from 0.000 to 0.833 and from 0.125 to 0.943, respectively, and the former values were significantly lower than the latter ones expected under the Hardy-Weinberg equilibrium. No significant linkage disequilibrium was revealed between any of the locus pairs after Bonferroni correction. From the pairwise Fst results over all samples, higher differentiation between GA-BH population pairs (mean 0.1789) was observed than between GA population pairs (mean 0.0454). This was also supported by Mantel's test showing that the genetic distances of these crayfish populations were significantly correlated with geographic distances. This result may show the regional differentiation caused by restricted gene flow between northern (BH) and southern (GA) populations within Seoul. These micro satellite markers have the potential for use in analyses of the genetic diversity and population structure of C. similis species, with implications for its conservation and management plans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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