• 대한바이러스학회지
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• 제26권2호
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• pp.141-150
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• 1996

본 연구에서는 $CD4^+$ T 세포를 일회성으로 감염시킬 수 있고 $CD4^+$ T 세포에 HIV-1 envelope 유전자를 전달할 수 있는 바이러스 입자를 생산하는 HIV-1 complementation system을 개발하였고 이 system을 이용하여 $CD4^+$ T 세포에 선택적으로 HIV-1 envelope 당단백질을 발현시켰다. 이 system은 Gag/Gag-Pol expressor와 Env expressor로 구성되어있다. Gag/Gag-Pol expressor는 바이러스 입자 생산에 필요한 구조단백질과 기능단백질을 발현시키지만 packaging signal이 결핍되어 바이러스 입자로 유전자가 들어가지 못하도록 제조되었다. Env expressor는 Tat, Rev와 envelope 당단백질을 발현시키고 packaging signal을 갖고 있어 바이러스 입자로 envelope 유전자가 들어가도록 제조되었다. Gag/Gag-Pol expressor로부터 Gag와 Gag-Pol의 발현은 Rev 단백질을 요구하였고 Env expressor로부터 Rev 단백질 이 제공될 때 Gag와 Gag-Pol 단백질은 효율적으로 발현되었다. Gag/Gag-Pol과 Env expressor로 cotransfection된 COS-1 세포에서 $CD4^+$ T 세포를 일회성으로 감염시킬 수 있는 바이러스 입자가 생산되었다. 생산된 바이러스 입자는 $CD4^+$ T 세포에 HIV-1 envelope 유전자를 전달하여 envelope 당단백질을 발현시켰고 복제 가능한 자손 바이러스의 생성을 유도하지 못하였다. 본 연구에서 개발된 방법은 $CD4^+$ T 세포에서 envelope 당단백질의 기능을 분석하고 관심 있는 유전자를 $CD4^+$ T 세포에 전달하는 바이러스 입자의 생산에 이용할 수 있다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제25권5호
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• pp.669-674
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• 2002

Glycosaminoglycans (GAGs) were isolated from the porcine testis, and their immuno-modulating and anticoagulant activity was investigated. From anion exchange chromatography (Dowex Macropolous Resin) used for further isolation of porcine testis GAGs (PT-GAGs), two fractions (PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16) eluted by different salt concentration were obtained. In immunomodulating activity test, PT-GAG-1.5, but not PT-GAG-16, significantly enhanced the growth of murine peritoneal macrophages. In addition, treatment with PT-GAG-1.5 induced the production of cytokines, interleukin-1$\beta$ (IL-1$\beta$), interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), from murine microphages. Unexpectedly, both of PT-GAGs had no effect on the growth of murine splenocytes. The anticoagulant activity of PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16 was examined by activated partial thromboplastin time (aPTT) assay and thrombin time (TT) assay. Both of PT-kGAGs significantly increased the clotting times of aPTT and TT in a dose-dependent manner. The anticoagulant activity of PT-GAG-16 was found to be higher than that of PT-GAG-1.5. These results suggest that PT-GAGs possess biological activities such as immunomodulating activity and anticoagulant activity.

• Journal of Microbiology
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• 제34권4호
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• pp.311-315
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• 1996

The retroviral Gag polyprotein directs the assembly of virion particles and plays an important role in some events after entry into a host cell. The Gag polyprotein of a virus mixture is responsible for inducing murine acquired immunodeficiency syndrome (MAIDS) when injected into susceptible strains of mice. In order to identify the host cellular proteins which interact with the MAIDS virus Gag proteins and possibly mediate the function of the Gag proteins, mouse T-cell leukemic cDNA expression library was screened using the yeast GAL4 two hybrid system. Of 11 individual positive clones, the clone Y1 was selected for the study of protein-protein interaction. Its DNA sequence revealed that it was an exact match to the murine SH3 domain-containing protein SH3P8. It is expressed as 2.4 kbp transcripts in testis at higher levels and in various tissues tested at lower levels. Glutathione S-transferase-Y1 fusion protein binds tightly to $Pr60^{def-gag}$ as well as $Pr65^{eco-gag}$.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.327.1-327.1
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• 2002

Glycosaminoglycans(PT -Gag) were isolated from the porcine testis. From the PT -Gag, we obtained two different types of Gag fractions using Dowex macro porous Resin MSA-1 column, PT -Gag-1.5% NaCl and PT -Gag-16% NaCl. Various biological activities of the GAGs were examined in aspect of anticoagulant and immunomodulating activity. The anticoagulant activity of the GAGs was evaluated by activated partial thromboplastin time (aPTT ) assay and thrombin time (TT) assay. The GAGs of porcine testis markedly incresed the clotting times of both of aPTT and TT. showing that PT-Gag-16% NaCl was more effective than PT-Gag-1.5% NaCl. The immunomodulating activityof the GAGs was examined in relation to regulation of xytoxine prodution of murine peritoeal maerophages. Taken together. GAGs isolated from porcine testis possess bilolgical functions such as anticoagulant and immunomodulating activity.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.276.2-276.2
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• 2002

Glycosaminoglycans(PT -Gag) were isolated from the porcine testis. From the PT -Gag. we obtained two different types of Gag fractions using Dowex macroporous Resin MSA-1 column. PT-Gag-1.5% NaCl and PT -Gag-16% NaCl. Various biological activities of the GAGs were examined in aspect of anticoagulant and immunomodulating activity. The anticoagulant activity of the GAGs was evaluated by activated partial thromboplastin time (aPTT ) assay and thrombin time (TT) assay. The GAGs of porcine testis markedly increased the clotting times of both of aPTT and TT. showing that PT-Gag-16% NaCl was more effective than PT-Gag-1.5% NaCl. The immunomodulating activity of the GAGs was examined in relation to regulation of cytokine production of mutine peritoneal macrophages. Treatment with the GAGs promonently enhanced the prodution of cytokines. IFN-${\gamma}$, from macrophages. Taken together. GAGs isolated from porcine testis possess biological functions such as anticoagulant and immunomodulating activity.

• 미생물학회지
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• 제30권6호
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• pp.466-471
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• 1992

HTLV-I 의 gag-pro 유전자 중첩영역내에서 -1 ribosomal frameshifting 이 일어나는 자리를 결정하기 위하여 gag-pro 중첩영역의 일부를 SP6 promoter 를 가진 백터내에 클로닝하였다. 그 결과 닭의 prelysozyme 에서 유래한 5개의 아미노산을 코드하는 합성유전자와 141 bp 로된 gag-pro 중첩영역의 뒤에 Straphylococcus aureus 의 protein A 유전자단편이 연결된 hybrid 유전자를 보유한 플라스미드를 제작하였다. 이 DNA 클론을 주형으로 SP6 RNA polymerase 의 작용에 의해 한종류의 mRNA 를 다량으로 합성하였다. Invitro 에서 합성된 mRNA 로 무세포계에서 단백질을 합성한 결과 21 kDal 의 단백질이 생성되었고 IgG-Sepharose 를 사용한 affinity chromatography 로 합성된 단백질을 순수하게 정제할 수 있었다. 본연구에서 설명한 in vitro 실험계는 Gag-Pro transframe 단백질의 신속한 정제 및 일차구조의 결정에 유익하게 사용될 것으로 보이며 이와 같은 실험의 결과 mRNA 에서 ribosomal frameshifting 이 일어나는 정확한 site 를 결정할 수 있을 뿐 같은 실험의 결과 mRNA 에서 ribosomal frameshifting 이 일어나는 정확한 site 를 결정할 수 있을 뿐 아니가 pro 유전자의 발현에 필요한 frameshift 를 유도하는 tRNA 의 동정도 가능하게 될 것이다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제35권4호
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• pp.413-420
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• 2011

We investigated whether Korean red ginseng (KRG) and highly active antiretroviral therapy (HAART) affect the frequency of gross deletion in 5'LTR/gag in 20 hemophiliacs. This study is a prospective study in 20 hemophiliacs who were infected with Korean subclade B of HIV-1 from two cash-paid plasma donors in 1990. Over a 13-year period, we obtained 436 amplicons of 5'LTR/gag genes by nested polymerase chain reaction using 147 peripheral blood mononuclear cells. Of the 436 amplicons, 92 (21.1%) showed gross deletion in 5'LTR/gag. Despite of a 2.3-fold higher monthly dose of KRG intake, the frequency of gross deletion in 5'LTR/gag (16.4%) was significantly decreased during HAART compared with 28.1% prior to HAART (p<0.01). Gross deletion in 5'LTR/gag was 10% more detected on KRG-therapy than prior to KRG-therapy (p<0.05). In addition, we also obtained 28 amplicons containing premature stop codon or isoleucine at initiation codon of 254 amplicons sequenced on KRG intake (7.5%) or HAART (13.6%) compared with 0% before KRG intake. These findings indicate that high frequency of gross deletion in 5'LTR/gag and genetic defects prior to HAART are significantly associated with KRG intake and the detection of gross deletion in 5'LTR/gag is decreased by HAART.

• 한국식품영양과학회지
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• 제39권11호
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• pp.1647-1653
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• 2010

군소에서 추출한 다당류로부터 DEAE-Sepharose 상에서 glycosaminoglycan(GAG)을 정제하여 기능기의 분포, 구성당의 분포, 이당류의 조성과 당 구조를 조사하였다. 정제한 GAG는 기본 형태를 구성하는 이당류 단위가 전체 구성물 중 55% 이상을 차지하고 있는 다당 복합체였다. 정제한 GAG는 1648 $cm^{-1}$에서 amide I의 특징적인 띠와 1457 $cm^{-1}$에서 C-O stretch, 탄수화물 및 아미노산의 특징, 866 $cm^{-1}$에서 단당류의 특징을 보이는 것으로 나타났다. 정제한 GAG는 fucose, N-acetylgalactosamine, N-acetylglucosamine, glucose, galactose, 미량의 mannose와 xylose로 구성되어 있는 것으로 나타났고, 이중에서 N-acetylgalactosamine, N-acetylglucosamine이 70% 이상을 차지하는 다당 복합체인 heparan sulfate인 것으로 추정되었다. 군소 GAG는 단백질핵의 threonine 잔기에 O-연결된 GlyUA(2S)-GlcNS와 GlyUA-GlcNS(6S) 구조를 가지고 있는 것으로 나타났다.

• 대한치과마취과학회지
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• 제10권1호
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• pp.27-33
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• 2010

The gag reflex is a physiologic reaction which safeguards the airway from foreign bodies. But, an exaggerated gag reflex can be a severe limitation to a patient's ability to accept dental care and for a clinician's ability to provide it. The overactive gag reflex can be due to psychological factors or physiological factors, or both. Psychological factors can include fear of loss of control and past traumatic experiences. A 58-year-old man, scheduled for extraction of left upper second molar, left lower second and third molar and implantation of left upper second molar, and left lower second molar had no specific underlying medical problems. He had exaggerated gag reflex. Dental treatment was successfully performed using intravenous sedation. Intravenous sedation with midazolam and propofol was a useful management technique for reflex control during dental treatment extended to the posterior regions in the oral cavity.

• 한국식품영양과학회지
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• 제39권11호
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• pp.1640-1646
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• 2010

남해안에서 주로 여름철에 어획하여 부산 및 경남 지역을 위주로 소비하고 있는 군소에서 다당류 추출을 위한 최적 조건을 검토하였다. 군소 다당류 추출을 위한 단백질 가수분해 효소로는 Flavourzyme 500 MG가 가장 효과적이었고, 추출한 다당류의 회수를 위한 가장 효율적인 추출물의 농도와 ethanol 첨가량은 각각 Brix 60과 5배량이었다. DEAE-Sepharose 칼럼 크로마토그래피로 얻은 크로마토그램상의 전기전도도와 전기영동 이동도에 근거하여 0.5~0.75 M NaCl 상에서 용출되는 물질이 GAG임을 확인하였으며, heparan sulfate인 것으로 추정하였다. 다당추출물과 정제 GAG의 uronic acid 함량은 각각 1.0 g/100 g과 6.0 g/100 g이었고, GAG를 구성하는 성분으로 지표물질인 hexosamine의 함량은 당 추출물과 정제물에서 각각 5.6 g/100 g과 25.7 g/100g이었다. 정제물은 agarose 겔 전기영동 상에서 heparan sulfate로 추정되었으며, 분자량은 겔 크로마토그래피에서 29.6 kDa으로 나타났다.