Proteins were isolated from four species of edible insects, Bombyx mori, B; Tenebrio molitor, T; Protaetia brevitarsis, P; and Gryllus bimaculatus, G, and their properties were analyzed and compared with those of whey proteins. The yield of the protein isolated from raw materials was 65.0-75.0%. Among three branched chain amino acids (BCAA), the amounts of valine in all the insects were similar to that of the whey protein. The BCAA content was 16.8 and 16.4% in G and T, respectively. The total polyphenolic content and the antioxidant activity of the insect proteins were significantly higher than those of the whey proteins. Based on the sensory test of the protein powder, the whey protein could be replaced by 25% of the isolated protein from the insects, but the taste and flavor needs to be improved. Although the BCAA content of insect proteins was lower than that of the whey protein (by 73-76%), their application could be useful because of high polyphenolic content and the anti-oxidative activity.
Kim, Min A;Shim, Kil Bo;Park, Jae Sung;Oh, Eun Gyoung;Shin, Soon Bum;Park, Kunbawui;Lim, Chi Won
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.47
no.6
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pp.713-718
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2014
The seasonal variation in the proximate composition, pH, and glycogen contents of oysters Crassostrea gigas collected in Geoje and Jaran Bays on the southern coast of Korea was studied between March 2012 and February 2013. In the Geoje Bay oysters, the moisture content was 77.49-81.50 g/100 g, lipids ranged between 1.22 and 2.47 g/100 g, proteins between 9.46 and 13.11 g/100 g, and ash between 1.88 and 2.58 g/100 g. In the Jaran Bay oysters, the moisture content was 74.22-82.05 g/100 g, lipids comprised 1.32-2.37 g/100 g, proteins 9.19-13.35 g/100 g, and ash 1.96-2.45 g/100 g. The moisture content was highest in October and January in Geoje and Jaran Bay, respectively, and tended to increase from July until September. The highest protein levels occurred in August in both bays, which coincided with the timing of oocyte maturation, and then decreased at the beginning of total spawning. The highest lipid levels occurred in April in Geoje Bay, and February in Jaran Bay. The glycogen content was 0.40-2.28 g/100 g in Geoje Bay, and 0.61-3.53 g/100 g in Jaran Bay, and was highest in February and decreased from March onwards. The lowest glycogen content occurred in September and then increased from October onwards. The pH ranged between 6.29 and 6.48, and 6.32 and 6.59, for Geoje and Jaran Bay, respectively, and was highest in February.
Kim, Goo-Young;Kim, Sang-Soo;Park, Hyo-Jin;Rhim, Hyang-Shuk
Journal of Life Science
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v.16
no.5
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pp.716-722
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2006
Superoxide dismutase (SOD) is physiologically important in regulating cellular homeostasis and apoptotic cell death, and its mutations are the cause of familial amyotrophic lateral sclerosis (FALS). Mitochondrial serine protease HtrA2 has a pro-apoptotic function and has known to be associated with neurodegenerative disorders. To investigate the relationship between genes associated with apoptotic cell death, such as HtrA2 and SOD1, we utilized the pGEX expression system to develop a simple and rapid method for purifying wild-type and ALS-associated mutant SOD1 proteins in a suitable form for biochemical studies. We purified SOD1 and SOD1 (G93A) proteins to approximately 90% purity with relatively high yields (3 mg per liter of culture). Consistent with the result in mammalian cells, SOD1 (G93A) was more insoluble than wild-type SOD1 in E. coli, indicating that research on the aggregate formation of SOD1 may be possible using this pGEX expression system in E. coli. We investigated the HtrA2 serine protease activity on SOD1 to assess the relationship between two proteins. Not only wild-type SOD1 but also ALS-associated mutant SOD1 (G93A) were cleaved by HtrA2, resulting in the production of the 19 kDa and 21 kDa fragments that were specific for anti-SOD1 antibody. Using protein gel electrophoresis and immunoblot assay, we compared the relative molecular masses of thrombin-cleaved GST-SOD1 and HtrA2-cleaved SOD1 fragments and can predict that the HtrA2-cleavage sites within SOD1 are the peptide bonds between leucine 9-lysine 10 (L9-K10) and glutamine 23-lysine 24 (Q23-K24). Our study indicates that SOD1 is one of the substrate for HtrA2, suggesting that both HtrA2 and SOD1 may be important for modulating the HtrA2-SOD1-mediated apopotic cell death that is associated with the pathogenesis of neurodegenerative disorder.
Non-biting midges fchironomidae, Dipteral are one of the largest insect families, which are distributed worldwidely and are found in nearly all types of inland waters. They are known to be aggressive inhalant allergens which cause allergenic diseases. In this study, the crude antigens of Chironomus SavipLumn adults which are most widely distributed in Korea were extracted. and their allergens were analysed with the sera from experimentally sensitized mice. The mice were immunized with $1{\;}\mu\textrm{g}{\;}or{\;}10{\;}\mu\textrm{g}$ of the crude antigens, respectively, and the specific serum IgE levels were measured by both ELISA and passive cutaneous anaphylaxis (PCA) techniques. The highest levels of both total IgE and chironomid-specific IgE were found in the mouse sera obtained after 9 weeks of the first infection with $1{\;}\mu\textrm{g}$ crude antigen. The crude antigen was separated into 16-18 protein bands on gel by SDS-PAGE. The crude extract was assessed by SDS-PAGE/immunoblot analysis. One IgE-binding band (65 kDa) was detected by developing with colorimetric substrate, and 4 IgE-binding bands (65, 52, 35 and 25 kDa) by developing with CSPD chemiluminescent substrate. The SDS-PAGE gel of the crude extract of chironomid adults was equally cut into 30 pieces and each of them was eluted to isolate proteins by molecular weight, and the allergenicity of each eluate was assessed by applying P-K test on rats. Proteins of 65, 35 and 15 KDa showed the highest P-K titer (${\times}512$) which was 16 times higher than that of the crude extract (${\times32}$). The P-K titer of 52 kDa protein was also 4 times higher ($128{\times}$) than that of the crude extract, whereas the 25 kDa protein poorly responded, which seemed not antigenic. In conclusion, the present result in mice demonstrated that adults of Chironomus fcuiplumus, a predominent species in Korea, cause allergenic diseases and the main allergens are 65, 52, 35 and 15 kDa proteins, of which 65 kDa protein seems to be a main allergen.
Human chorionic gonadotropin hormone(H.C.G.) is secreted from the villus tissues of the placenta and excreted in lange amount into the urine. Its isolation is chiefly made from the urine of a pregnant woman. Recently, Matsushima attempted isolation of H.C.G. directly from the placenta itself. In order to prepare H.C.G. from human placenta, general method of extractiag and purifying proteins was applied. Its way was as follow: Crude H.C.G. was extracted from placenta with pH 9.0 and pH 5.0 aqua ammonia, and purified with pH 8.0 ammonia and 50% ethanol at pH 4.8. The purified H.C.G. showed two moving bands on the anode by paper electrophoresis. On the other hand, the H.C.G. from pregnancy urine (Standard. Pharm. Co.) showed same two bands but their moving ratio were different. The purified H.C.G. showed gonadotropin effect when it was injected young fomale rats 40r/cc per day for 5 days and weighted the increased ovary weight.
Germanium (Ge) content in Zingiberis Rhizoma was determined by flameless atomic absorption spectrometry with a graphite tube atomizer. The Ge content of the cortical layer was 65.mu.g/g, the central cylinder, $98\mu$g/g and the total, $87\mu$g/g. In the effect of the extraction of Ge by various solvents, polar solvent was more effective than the nonpolar one, Especially, water was the most effective solvent. The water extract of Zingiberis Rhizoma, separated by sephadex G-25 gel filtration, was fractionated into 2 peaks at 254nm. Both the peaks showed atomic absorptions of Ge. It may be concluded that the Ge components of Zingiberis Rbizoma exist as the form of an aqueous organic compounds or associated forms with proteins.
A varient strain of budding yeast, Hansenula anomala B-7 which had been identified to be highly resistant to cadmium ions, were observed by transmission electron microscopy. It was shown that the cells accumulated excess amounts of cadmium ions throughout inside the cell rather than on the cell surface. The cell growth in response to cadmium or heat shock stress has also been investigated. It was observed that the cells precultured in the presence of 500 $\mu$ g/ml of Cd ions grew slower than those precultured at 1, 000 $\mu$ g/ml of the metal ions, when they were cultivated in the media containing 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions. Heat shock, however, stimulated the cell growth transiently, when the cells were allowed to grow in the presence of 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions. But the cells given heat shock for more than 100 min received permanent damage to growth. Effects of both stresses on budding rate was also examined. It revealed that the stresses did not change the budding ratio much, which was contradictory to that observed from the same budding yeast, Saccharomyces cerevisiae. Furthermore, the cells treated with 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions not only induced, but also switched off the expression of several new proteins. Some of the cadmium stress-inducible proteins were estimated to be also induced by heat shock stress.
Baek Eun Ki;Moon Goo;Won Jin Hee;Kim Dong Ung;Baek Dong Gi;Yoon Jun Chul;Song Bong Gil;Lee Byung Ho;Park Sang Gu
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.5
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pp.1243-1250
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2003
This study was designed to elucidate the synergistic cytotoxic mechanisms of the co-treatment of adriamycin and Paljinhangahm-dan in human hepatoma malignant cancer cell line, HepG2. The combination of adriamycin and the ethanol extract of Paljinhangahm-dan synergistically augmented the cytotoxicity of Adriamycin and Paljinhangahm-dan in HepG2 cells. The cytotoxicity of two drugs was revealed as apoptosis characterized by DNA fragmentaton in agarose gel electrophoresis. The apoptotic cytotoxicity of adriamycin and Paljinhangahm-dan was accompanied by the cleavage of procaspase -3 protease and PARP. Of note, anti apoptotic Bcl2 protein was obviously decreased, but Fas was dramatically increased in HepG2 cells co-treated with Adriamycin and Paljinhangahm -dan. In addition, through 2-D gel electorphoresis, we observed that the expression levels of a lot of proteins were obviously changed by the status of drug treatments. This results suggest that the synergistic cytotoxicity of the co-treatment of adriamycin and Paljinhangahm-dan might be caused by the changes of the expression levels of a lot of proteins which play pivotal roles in cell survival or death.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.6
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pp.931-936
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2003
We investigated inhibitory effects of Hericium erinaceus on the growth of cancer cells and the expression of cell cycle regulators, cyclins. Anticancer effects of Hericium erinaceus extract and fractions against cancer cell lines including HepG2 and HT29 were investigated. The methanol extract, the hexane fraction, the chloroform fraction and the ethylacetate fraction of Hericiu erinacew inhibited growth of cancer cells but they had no effect on the cytotoxicity of normal human liver cells under the same conditions. As shown by western blot analysis, the expression of cyclin B1 known as cell cycle regulator was markedly decreased after treatment with Hericium erinaceus extract in HepG2 cells. These results suggest that antiproliferative effect of Hericaum erinaceus extract is associated with markedly decreased expression of cyclin B1.
Korean red pine (Pinus densiflora) bark extract, PineXol (PX), was investigated for its potential antioxidant and anti-inflammation effects in vitro. It was hypothesized that PX treatment ($25-150{\mu}g/ml$) would reduce the lipid synthesis in HepG2 hepatocytes as well as lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes. Hepatocytes' intracellular triglycerides and cholesterol were decreased in the PX $150{\mu}g/ml$ treatment group compared with the control (p < 0.05). Consequently, de novo lipogenic proteins (acetyl-CoA carboxylase 1, stearoyl-CoA desaturase 1, elongase of very long chain fatty acids 6, glycerol-3-phosphate acyltransferase 1, and sterol regulatory element-binding protein 1) were significantly decreased in hepatocytes by PX $150{\mu}g/ml$ treatment compared with the control (p < 0.05). In differentiated 3T3-L1 adipocytes, the lipid accumulation was significantly attenuated by all PX treatments (p < 0.01). Regulators of adipogenesis, including CCAAT-enhancer-binding proteins alpha, peroxisome proliferatoractivated receptor gamma, and perilipin, were decreased in PX $100{\mu}g/ml$ treatment compared with the control (p < 0.05). In conclusion, PX might have anti-obesity effects by blocking hepatic lipogenesis and by inhibiting adipogenesis in adipocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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