• 생명과학회지
• /
• 제20권11호
• /
• pp.1577-1581
• /
• 2010

조혈촉진 cytokine인 Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF)는 골수세포를 자극하여 granulocyte로 증식, 분화시키는 기능을 가지며, 현재 아주 고가의 치료제로 사용되고 있다. 인간 G-CSF (hG-CSF)를 아직 시도되지 않은 누에 유래 세포주인 BM5 세포에서 발현시키고 생산 효율을 높이기 위해 hG-CSF cDNA를 변형하였다. hG-CSF의 cDNA의 endoplasmic reticulum (ER) signal sequence 부분을 누에의 소포체에서 분비되는 단백질인 prophenoloxidase (PPAE), protein disulfide isomerase (PDI)와 bombyxin (BX)에서 유래한 누에특이 ER signal sequence로 대체한 hG-CSF의 cDNA 함유 벡터를 구축하였다. 이들 벡터를 사용하여 형질전환한 BM5 세포의 배양액에 분비된 G-CSF 단백질을 western blot으로 분석하여 발현을 확인하였다. 누에특이 ER signal sequence들로 대체된 hG-CSF cDNA를 포함하는 벡터에 의한 hG-CSF 단백질 생산이 인간 G-CSF cDNA가 든 벡터에 의한 hG-CSF의 생산보다 월등히 효율적이었다. 또한, PPAE-signal sequence를 포함하는 hG-CSF 단백질은 배양배지에서 형질전환 4일 후에 최고에 달하였고, 7 일째까지 비슷한 양이 배지 내에서 검출되었다. 이상의 결과는 인간유래 유전자가 곤충세포 내에서 발현 될 때 인간유래 유전자 보다는 곤충 유전자발현 시스템에 맞게 변형했을 경우 더 효율적인 단백질 발현을 얻을 수 있음을 보여 준다.

• 대한약리학회지
• /
• 제29권2호
• /
• pp.245-252
• /
• 1993

Amiloride는 $Na{^+}$ channels를 선택적으로 억제하는 potassium sparing diuretic이다. 본 연구에서는 amiloride와 아데노신 수용체의 상호작용을 밝히고자, 흰쥐에서 얻은 crude adipocytic membrane fractions의 adenylyl cyclase activity를 여러 조건하에서 측정하였다. 우선 GTP가 isoproterenol-stimulated adenylyl cyclase activity에 미치는 영향을 조사함으로서 $G_i$ protein (inhibitory guanine nucleotide binding protein)의 기능을 알아보았다. 그 결과 amiloride는 높은 GTP 농도에서 isoproterenol-stimulated adenylyl cyclase의 활성을 억제하는 것을 관찰할 수 없었다. 이와는 대조적으로 amiloride 존재 하에서 2-chloroadenosine을 사용하여 아데노신 수용체를 경유한 isoproterenol-stimulated adenylyl cyclase activity가 억제되는 정도를 측정하였을 때, 2-chloroadenosine의 농도에 따라 큰 변화 없거나 오히려 억제 효과가 더욱 크게 나타났다. 그러나 위와 같은 조건하에서 propranolol에 의한 isoproterenol-stimulated adenylyl cyclase activity의 억제는 amiloride에 의해서 유의하게 변하지 않는 것으로 보아서, 수용체를 매개로 한 $G_s$ protein의 기능은 amiloride에 의해 영향을 받지 않는 것으로 생각된다. 그리고 amiloride에 의해 증가된, 2-chloroadenosine-mediated adenylyl cyclase의 억제 효과는 150mM NaCl 존재 하에서도 그대로 유지되었다. 이러한 결과로 보아 amiloride는 아데노신 수용체와 결합하여 $G_i$ proteins과의 coupling을 용이하게 할 뿐만 아니라, $G_i$ protein을 선택적으로 변화시켜 $G_i$ protein의 GTP 의존적인 adenylyl cyclase의 억제 기능을 제거하는 두 작용을 갖는 것으로 사료된다.

• 약학회지
• /
• 제37권6호
• /
• pp.598-604
• /
• 1993

The calyx extract of Campsis grandiflora displayed inhibitory activity against protein kinase C from the bovine brain. Separation guided by protein kinase C enzyme assay and bleb forming assay led to isolation of a potent protein kinase C inhibitor that was identified as a known phenylpropanoid glycoside, verbascoside. It suppressed completely bleb-formation of K562 cell surface induced by phorbol 12,13-dibutylate at the concentration of 60 $\mu\textrm{g}$/ml and IC$_{50}$ of the protein kinase C occured at 20 $\mu{M}$. This compound was tested for cytotoxic activity against ten human tumor cell lines in vitro. it exhibited moderate cytotoxic activity against skin tumor cell line M14 (IC$_{50}$ 2.2 $\mu\textrm{g}$/ml) and very weak cytotoxicity against other cell lines (IC$_{50}$>10 $\mu\textrm{g}$/ml)

• Toxicological Research
• /
• 제35권3호
• /
• pp.209-214
• /
• 2019

Cancer is the leading cause of mortality worldwide. In cancer progression, sex hormones and their receptors are thought to be major factors. Many studies have reported the effects of estrogen and estrogen receptors (ERs) in cancer development and progression. Among them, G protein-coupled estrogen receptor (GPER), a G protein-coupled receptor, has been identified as an estrogen membrane receptor unrelated to nuclear ER. The mechanism of GPER, including its biological action, function, and role, has been studied in various cancer types. In this review, we discuss the relation between GPER and estrogen or estrogen agonists/antagonists and cancer progression.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
• /
• 제15권1호
• /
• pp.1-9
• /
• 1997

본 실험에서는 한우초유를 33% ammonium sulfate 포화용액으로 처리하여 조면역글로블린을 얻은 후 gel filtration, ion-exchange chromatography를 이용하여 조면역글로블린의 분리 정도를 조사하고 affinity chromatography column을 이용하여 조면역글로블린으로 부터 Ig G의 결합정도를 알아보고 Protein G Sepharose fast flow system을 이용하여 신속하게 대량으로 Ig G의 분리를 꾀하여 얻어진 Ig G를 이용하여 ELISA방법으로 항체 생성유무를 측정하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 1. HPLC상에서 Superose 12 column을 이 용하여 한우초유의 조면역글로블린을 분리한 결과 Holstein초유의 조면역글로블린과 유사한 분리정도를 나타냈지만 약 84%의 Ig G를 한우초유의 조면역글로블린으로 부터 분리할 수 있었다. 2. Mono Q를 이용하여 HPLC에서 한우초유의 조면역글로블린을 gel filtration방법보다 짧은 시간에 분리할 수 있었지만 그다지 분리 정도가 좋지 않은 것으로 나타났다. 3. Hi-trap protein G column이 protein A sepharose CL-4B column보다 더 많은 양의 Ig G를 한우초유의 조면역글로블린으로 부터 얻을 수가 있었다. 4. Protein G Sepharose fast flow system을 이용하여 20mg의 sample양을 주입하여도 충분히 Ig G를 분리할 수 있었으며, ml 당 약 1.25mg의 Ig G를 얻을 수가 있었다. 5. ELISA방법을 이용하여 한우초유의 Ig G에 대한 항체 생성 유무를 측정한 결과, 면역화된 토끼에서 정상 토끼의 혈청에서보다 titer가 높게 나타났으므로 항체생성이 확인되었다.

• 한국양식학회지
• /
• 제6권1호
• /
• pp.29-46
• /
• 1993

조피볼락 사료의 적정 에너지/단백질 비를 구명하기 위해서, 사료의 단백질 함량이 $45\%$와 $40\%$일 때의 2회에 걸쳐 평균 체중이 각각 36g 및 80g되는 실험어를 대상으로 사육 실험을 실시하여, 사료의 에너지 함량 변화에 따른 조피볼락의 성장, 사료효율, 영양소 축적효율, 어체성분 및 소화율의 변화를 검토하였다. 실험 사료구는 사료의 가소화 에너지/단백질 비(DE/P비)가 단백질 $45\%$ 사료에서는 7.4-10 kcal/g protein이 되도록 6개구를, 단백질 $40\%$ 사료에서는 7.5-8.9 kca1/g protein이 되도록 3개구를 설정하였다. 사료의 에너지 함량은 dextrin과 지질의 함량을 변화시켜 조정하였으며, 단백질원으로는 북양어분을 사용하였다. 실험 결과, 어체 100g 당 일간 증중랭과 사료효율은 단백질 $45\%$와 $40\%$ 사료에서 모두 사료의 DE/P비 변화에 따른 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 반면, 일간 단백질 및 에너지 축적량, 단백질, 지질 및 에너지 축적효율과 어체의 일반성분은 사료의 DE/P비 변화에 따라 증가 또는 감소하는 경향을 나타내었다. 이러한 결과로부터 조피볼락 사료의 적정 DE/P비는 단백질 $40\%$ 및 $45\%$ 사료에서 모두 8kca1/g protein으로 추정되었다. DE/P비가 이보다 높은 경우에는 흡수된 가소화 에너지 1Mcal당 단백질 축적량만 점차 감소할 뿐, 일간 증중량, 일간 단백질 축적량, 사료효율 및 단백질 축적효율에는 아무런 개선효과가 없었다. 또한, 사료의 DE/P비가 증가함에 따라 조피볼락의 전어체와 내장의 지질함량이 급격히 증가하여, 사료의 에너지 증대효과는 주로 비가식부인 내장에 지질축적으로 나타났다. 한편, 산화크롬 $(Cr_2O_3)$을 표식물질로 사용하여 간접법으로 측정한 조피볼락의 단백질 (어분), 지질 및 탄수화물(dextrin) 소화율은 각각 $90\%$, $98\%$ 및 $70\%$ 내외로 조성이 다른 각 실험 사료간에 큰 차이가 없었다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
• /
• 제27권3호
• /
• pp.171-179
• /
• 2024

A study was conducted to evaluate dietary valine (Val) requirement for Pacific white shrimp (Penaeus vannamei). Five isonitrogenous (353 g/kg) and isocaloric (4.08 kcal/g) semi-purified diets containing graded levels of Val (2.7, 5.1, 8.7, 12.1 or 16.0 g/kg) were formulated. Quadruplicate groups of 12 shrimp (average body weight: 0.46 ± 0.00 g) were fed one of the experimental diets (2%-5% of total body weight) for 8 weeks. Maximum weight gain was observed in 8.7 g/kg Val group. However, the growth performance was reduced when Val concentration in diets were higher than 12.1 g/kg. Feed conversion ratio was significantly increased with 2.7 and 16.0 g/kg Val inclusion. Shrimp fed the diets containing 2.7 g/kg Val showed significantly lower protein efficiency ratio, whole-body crude protein and Val concentrations. Dietary inclusion of Val significantly improved the relative expression of insulin-like growth factor binding protein and immune-related genes (prophenoloxidase, lysozyme and crustin) in the hepatopancreas and 8.7 g/kg Val group showed highest expression among all the groups. The dietary requirement of Val for maximum growth of juvenile P. vannamei, estimated using polynomial regression analysis on growth, was 9.54 g/kg of Val (27.2 g/kg based on protein level) and maximum growth occurred at 9.27 g/kg of Val (26.2 g/kg based on protein level) based on broken-line regression analysis.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
• /
• 제28권6호
• /
• pp.1005-1009
• /
• 2007

Leukotriene B4 (LTB4) is a potent chemoattractant for leukocytes and considered to be an inflammatory mediator. Human BLT2 (hBLT2) is a low-affinity G-protein coupled receptor for LTB4 and mediates pertussis toxin-sensitive chemotactic cell movement. Here, we dissected the interaction between hBLT2 and G-protein alpha subunits using GST fusion proteins containing intracellular regions of hBLT2 and various Gα protein including Gα i1, Gα i2, Gα i3, Gα s1, Gα o1, and Gα z. Among the tested Gα subunits, Gα i3 showed the highest binding to the third intracellular loop region of hBLT2 with a dissociation constant (KD) of 5.0 × 10?6 M. These results suggest that Gα i3 has the highest affinity to hBLT2, and the third intracellular loop region of hBLT2 is the major component for the interaction with Gα i3.

• 한국정보통신학회:학술대회논문집
• /
• 한국정보통신학회 2014년도 춘계학술대회
• /
• pp.813-815
• /
• 2014

polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자가 포함된 새로운 재조합 베큘로바이러스를 제조하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 293T, HepG2, HFF, Hur7 세포에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템이 감염에 의한 유전자의 전달과 해당 유전자 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 우수한 효과를 나타내었다.

• Journal of Microbiology
• /
• 제35권4호
• /
• pp.323-326
• /
• 1997

Toxin protein from Ustilago maydis virus SH14 isolated in Korea was purified using ethanol precipitation, cation exchange, gel filtration and anion exchange chromatography. The molecular weight of the purified protein was estimated to be 8.3 kDa by SDS-PAGE analysis. The Nterminal sequence of the protein is L-G-I-N-C(K)-R-G-S-S-Q--C(K)-G-L-S-G which is highly homologous with that of P4 toxin, but the amino acid composition and electrophoretic mobility in a native PAGE of the toxin protein were totally different from those of P4 toxin respectively. The SH14 toxin was shown to have immunological cross-reactivity about 50% with P4 toxin when examined by Western hybridization.