베큘로바이러스 시스템이 제조되었는데 이것은 polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자를 재조합한 것이다. 본 재조합벡터 시스템은 인간 섬유아세포에 적용하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 본 베큘로바이러스 시스템이 유전자의 전이와 유전자 발현 면에서 대조 벡터시스템 보다 고효율을 나타내었다.
Essential hypertension is a heterogeneously multifactorial disease in which blood pressure is harmfully high without overt cause. Both genetic and environmental factors have been implicated in its etiology. In view of the regulatory role of this peptide in the carbohydrate metabolism and renin-angiotensin system, amylin gene has been proposed to a candidate gene for essential hypertension. Therefore, we scanned the amylin gene for mutations in 133 Korean normotensives and 61 essential hypertensives by single-strand conformational polymorphism, and found a single heterozygous S20G missense mutation. However, no significant difference was observed between normotensives and essential hypertensives in the distribution of allele and genotype frequencies of this mutation at the amylin gene (P>0.05). This finding suggests that S20G missense mutation of the amylin gene are unlikely to contribute to the etiology of essential hypertension in the Korean population.
The Greater Sudbury Region has been known as one of the most ecologically disturbed areas in Canada for the past century. Plant adaptation to environmental stressors often results in modifications in gene expression at the transcriptional level. The main objective of the present study was to compare the expression of genes associated with nickel resistance in Acer rubrum and Populus tremuloides growing in areas contaminated and uncontaminated with metals. Primers targeting Nramps4, Nas 3, At2G, MRP4 and alpha-tubulin genes were used to amplify cDNA of both species. The expression of the At2G gene, was $2{\times}$ and $9{\times}$ higher in P. tremuloides than in A. rubrum for St. Charles (uncontaminated site) and Kelly Lake (metal contaminated site), respectively. There was a much smaller difference between the two species for the Nramps 4 gene as its expression was $2.5{\times}$ and $3{\times}$ higher in P. tremuloides compared to A. rubrum from St. Charles and Kelly Lake, respectively. The same trend was observed for the MRP4 gene whose expression was $2{\times}$ and $14{\times}$ higher in P. tremuloides than in A. rubrum from St. Charles and Kelly Lake, respectively. For the Nas 3 gene, the expression was similar in both sites. This gene was upregulated $11{\times}$ and $10{\times}$ in P. tremuloides compared to A. rubrum in samples from St. Charles and Kelly Lake, respectively. In general, no significant difference was observed between the metal contaminated and uncontaminated sites for gene expression. In depth analysis revealed that AT2G and MRP4 genes were significantly down regulated in A. rubrum from the metal contaminated sites compared to those from uncontaminated areas, but environmental factors driving this differential gene expression couldn't be established.
SUC2 유전자를 가진 재조합 Saccharomyces cerevisiae의 invertase 생산성을 향상시키기 위하여 균체 생육과 유전자 발현에 미치는 아미노산과 용존산소 농도의 영향을 연구하였다. 균체 생육과 invertase 발현에 적합한 leucine과 histidine의 최적 첨가량은 탄소원인 포도당에 대한 비율로서 나타내어 0.03g/g glucose와 0.04g/g glucose였다. 회분배양에서는 통기량이 적을수록 invertase 비활성이 증가하였다. 희석율 0.09h에서 용존산소농도를 조절한 연속배양에서는 요존산소농도가 감소함에 따라 유전자 발현이 잘되어 5 포화 이하일때 invertase 비활성이 급격히 증가하여 통기를 하지 않은 조건에서 125.54KU/g cell의 최고 비활성을 얻었다.
목 적 : 소아 신증후군 환자에서 과응고성 경향을 가지고 있으며 Plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1)은 강력하게 섬유소의 용해를 감소시키는 당단백으로 최근 몇몇 연구에 의하면 신증후군에서 증가된 PAI-1과 사구체내의 섬유소원이나 섬유소와 관련된 항체의 침착이 연관되어 있음을 시사하고 있다. 저자는 PAI-1 유전자 다형성 중에서 A-844 G 대립유전자 다형성의 빈도와 유전형을 소아의 신증후군에서 임상경과와의 연관성을 비교 평가하였다. 방 법 : 2001년 10월부터 2003년 1월까지 경희대학교 부속병원 동서신장병연구소에 방문한 146명의 신증후군 환아와 249명의 대조군을 대상으로 하였고 신증훈군 환아는 infrequent relapser(IR)와 frequent relapser(FR)로 다시 나누었다. 이들에 대해 PAI-1 promoter gene의 A-844 G에 대한 중합효소 연쇄반응-제한효소절편길이 다형현상(PCR-RFLP)을 이용하여 유전자형을 A/A, A/G, G/G로 분류하여 비교 분석하였다. 통계는 Graph Pad Prism 통계분석 소프트웨어 version 2.0을 사용하였고 95% 신뢰구간과 P value는 0.05보다 작은 것을 의미 있게 보았다. 결 과 : PAI-1 promoter gene의 A- 844G 다형성의 분포는 대조군애서 G/G 81(32.5%), A/A 42(16.9%), G/A 126(50.6%)이였고 신증후군 그룹 중 IR 그룹은 G/G 29(34.1%), A/A 15(17.7%), G/A 41(48.2%)이였으며 FR 그룹에서는 G/G 17(27.9%), A/A 18(29.5%), G/A 26(42.6%)이었다. 단지 PAI-1 gene의 A-844G의 다형성중 A/A 유전자형이 신증후군 환아 중 FR군에서만 대조군에 비하여 유의하게 증가하였다(16.9% vs 29.5%, OR=2.06, P=0.0251). 반면 A/G 유전자형(OR=0.73, P=0.2639)이나 G/G 유전자형(OR=0.80, P=0.4828)은 통계학적인 의의가 없었고 IR군에서 대조군에 비하여 A/A(OR=1.06, P=0.8690), A/G(OR=0.91, P=0.7063), G/G(OR=1.07, P=0.7880)으로 모두 통계학적으로 유의하지 않았다. 결 론 : A-844G AA 유전자형을 가진 신증후군 환자와 FR와 통계적인 상관관계가 있음을 알수 있었다. 이는 향후 PAI-1 유전자와 과응고성과 관련된 생화학적 검사와의 연관성에 대한 추가적인 조사와 특히, 신증후군의 과응고성과 신증후군 재발과의 연관성이 있는지에 관한 연구가 더 필요할 것으로 사료된다.
The objective of this study was to investigate single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the bovine nephroblastoma overexpressed (NOV) gene and to evaluate whether these polymorphisms affect carcass traits in the Korean cattle population. We resequenced to detect SNPs from 24 unrelated individuals and identified 19 SNPs within the full 8.4-kb gene, including the 1.5-kb promoter region. Of these 19 SNPs, four were selected for genotyping based on linkage disequilibrium (LD). We genotyped 429 steers to assess the associations of these four SNPs with carcass traits. Statistical analysis revealed that g.7801T>C and g.8379A>C polymorphisms in the NOV gene were associated with carcass weight (p = 0.012 and 0.008, respectively), and the g.2005A>G polymorphism was associated with the back fat thickness (BF) trait (p = 0.0001). One haplotype of the four SNPs (GGTA) was significantly associated with BF (p = 0.0005). Our findings suggest that polymorphisms in the NOV gene may be among the important genetic factors affecting carcass yield in beef cattle.
Kim, Seung-Chang;Lee, Seung-Hwan;Kim, Bum-Soo;Kim, Tae-Hun;Seong, Hwan-Hoo;Oh, Sung-Jong;Yoon, Du-Hak;Choi, Bong-Hwan
Journal of Animal Science and Technology
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제53권6호
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pp.511-516
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2011
Fas gene known to associate with intramuscular fat content in Korean cattle was selected for DNA marker development. Fas (APO-1, CD95), a member of the tumor necrosis factor (TNF) receptor superfamily, is a cell membrane protein that mediates apoptosis (programmed cell death). We discovered single nucleotide polymorphisms (SNPs) within Fas gene in order to develop novel DNA markers at genomic level. Of this gene to search for SNP, sequences of whole exon and 1kb range of both front and back of the gene using 24 cattle were determined by direct-sequencing methods. As a result, 16 SNPs in exon, 37 SNPs in intron and 2 SNPs in promoter region, a total of 55 SNPs were discovered. In these SNPs, thirty-one common polymorphic sites were selected considering their allele frequencies, haplotype-tagging status and Linkage Disequilibrium (LD) for genotyping in larger-scale subjects. Selected SNPs were confirmed genotype through SNaPshot method (n=274) and were examined for possible genetic association of Fas polymorphisms with carcass weight (CWT), eye muscle area (EMA), and backfat thickness (BF). So, the SNP have been identified significant g.-12T>G, g.1112T>G and g.32548T>C. These results suggest that polymorphism of Fas gene was associated with meat quality traits in Hanwoo.
Angiogenesis is regulated by a large number of molecules and complex signaling mechanisms. The G protein $G{\alpha}_{13}$ is a part of this signaling mechanism as an endothelial cell movement regulator. Gene expression analysis of $G{\alpha}_{13}$ knockout mouse embryos was carried out to identify the role of $G{\alpha}_{13}$ in angiogenesis signaling during embryonic development. Hypoxia-inducible response factors including those acting as regulators of angiogenesis were over expressed, while genes related to the cell cycle, DNA replication, protein modification and cell-cell dissociation were under expressed. Functional annotation and network analysis indicate that $G{\alpha}_{13}{^{-/-}}$ embryonic mice were exposed to hypoxic conditions. The present analysis of the time course highlighted the significantly high levels of disorder in the development of the cardiovascular system. The data suggested that hypoxia-inducible factors including those associated with angiogenesis and abnormalities related to endothelial cell division contributed to the developmental failure of $G{\alpha}_{13}$ knockout mouse embryos.
The penicillin G acylase(pga) gene was cloned in the vector plasmid pKM $300(Ar^r,\;Tc^r,\;6.33kb)$ for the study of the structure and expression of the pga gene. This recombinant plasmid pPAKS-1 DNA(24.5 Kb) was cleaved into 2 fragments by restriction enzyme Eco R1.1fragment by BamH1, 4fragments by Hind III, and 2 fragments by Pst I. The pga gene was located on the Eco R1.Hind III-C fragement of pPAKS-1. The recombinant plasmids pPAKS-1 and pPAKS-2, in which the Hind III-B and Hind III-D fragments pPAKS-1 are deleted, are characterized. The results are summarized as follows : 1. Doubling times of bacterial strain bearing pPAKS-1 and pPAKS-2 are 90 and 60 minutes, respectively. 2. pPAKS-1 and pPAKS-2 are present at about 16-32 and 70 copies per cell, respectively, are 0.66 and 5.5 units, respectively, which represent 2-fold and 20-fold higher enzyme 4. pPAKS-1 is very unstable, but pPAKS-2 is stable.
A putative protein encoded by Arabidopsis AtMTN3 gene, a homologue of Medicago truncatula MTN3, consists of 285 amino acid residues, and has a predicted molecular mass of 31.5 kDa and a calculated pI of 9.1. Primary amino acid sequence analyses have revealed that the protein contains seven putative transmembrane regions with N-terminus oriented to the outside of the membrane. The AtMTN3 protein shows overall 16.4% of amino acid identity with the rat GALR3 protein, known to be a G-protein-coupled receptor. The gene is present as a single copy in the Arabidopsis genome, and expressed in aerial parts but not in roots of Arabidopsis. Therefore, AtMTN3 appears not to be specifically involved in Rhizobium-induced nodule development, as was predicted for the MTN3 gene. These proteins possibly mediate signal transmission through G-protein-coupled pathways during general interactions between plants and symbiotic or pathogenic microbes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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