We monitored the occurrence of fungal species on bed-logs inoculated with oak mushroom (Lentinula edodes) and the environmental conditions of temperature and humidity in the cultivation houses during monsoon. Six fungal species, viz., Cladosporium sp., C. cladosporioides, C. anthropophilum, Pleosporales sp., Trichoderma harzianum, and Acremonium sp., wereidentified from the cultivation houses located in Jangheung, Jeonnam province. This identification was confirmed by performing nucleotide sequence analysis of the internal transcribed spacer and 28S rDNA regions. Our study presents significant findings that can help in preventing fungal damage induced by inappropriate temperature and humidity in oak mushroom cultivation houses.
Fungal endophytes are microfungi that live in plants without causing apparent symptoms of infection. This study was conducted to identify endophytic fungi isolated from leaves of coniferous trees in Bohyeon Mountain of Korea. We collected leaves of two species of coniferous trees, Pinus densiflora and Pinus koraiensis, from 11 sites in the study area. A total 58 isolates were obtained and identified using molecular and morphological characteristics. Four species of endophytic fungi were isolated from P. densiflora: Lophodermium conigenum, Leotiomycetes sp., Septoria pini-thunbergii, and Polyporales sp., while two fungal species were isolated from P. koraiensis: Eurotiomycetes sp. and Rhytismataceae sp. The most frequently isolated species were L. conigenum and S. pini-thunbergii.
The phylogenetic relationships of the most dominant and morphologically cryptic endophytic fungal isolates from each of five selected medicinal plants, namely Potentilla fulgens, Osbeckia stellata, Osbeckia chinensis, Camellia caduca, and Schima khasiana of the biodiversity rich state of Meghalaya, were assessed with random amplification of polymorphic DNA and PCR-restriction fragment length polymorphism profiles. Sequencing of the internal transcribed spacer 1, small subunit rRNA and partial ${\beta}$-tubulin gene fragments was also conducted to determine the phylogenetic relationships of these isolates with fungal sequences available in Genbank, NCBI. The identity of the fungal isolates is suggested based on the molecular phylogenetic data.
The endophytic fungi were isolated from red pine trees (Pinus densiflora) that were distributed in three sites of Chungbuk, Korea. Twenty fungal isolates were isolated from 16 trees and divided into 8 groups by morphological characters. The fungal isolates were identified using the sequences of ITS region of rDNA; Lophodermium complex, Sydowia polyspora, Hymenula sp., Sistotrema brinkmannii, Septoria pini-thunbergii, Earliella sp. Lophodermium spp. were the most frequently found fungal species the across sites and firstly detected from Pinus species in Korea by molecular work.
This study aims to isolate and identify the fungal pathogen responsible for gummosis disease affecting Thanh Tra pomelo in Vietnam. Through molecular identification utilizing primer pairs ITS5 and ITS4, the analysis pinpointed Lasiodiplodia theobromae as the specific fungal pathogen. Notably, the fungal colonies exhibited vigorous growth on potato dextrose agar. Initially, these colonies appeared whitish-grey, transforming into a black-grey hue within 5-7 days at a temperature of 30℃. According to previous reports, Phytophthora spp. was the most common pathogenic genus causing gummosis on Thanh Tra pomelo in Vietnam. To our knowledge, this is the first report on L. theobromae causing gummosis on Thanh Tra pomelo in Vietnam.
Candida glabrata is the second most prevalent causative agent for candidiasis following C. albicans. The opportunistic yeast, C. glabrata, is able to cause the critical bloodstream infections in hospitalized patients. Conventional identification methods for yeasts are often time consuming and labor intensive. Therefore, recent studies on sequence-based identification have been conducted. Recently, sequencing the D1/D2 domain of the large subunit ribosomal RNA gene and the internal transcribed spacers (ITS) 1 and ITS2 regions of the ribosomal DNA has proven useful for DNA-based identification of most species of fungi. In the present study, therefore, fungal ITS and D1/D2 domain regions were targeted and analyzed by DNA sequencing for the accurate identification of C. glabrata clinical isolates. A total of 102 C. glabrata clinical isolates from various clinical samples including bloodstream, catheterized urine, bile and other body fluids were used in the study. The results of the DNA sequence analysis showed that the mean standard deviation of species identity percent score between ITS and D1/D2 domain regions was $97.8%{\pm}2.9$ and $99.7%{\pm}0.46$, respectively. These results revealed that the D1/D2 domain region might be a better target for identifying C. glabrata clinical isolates based on DNA sequences than the ITS1 and ITS2 regions. However, in order to evaluate the usefulness of D1/D2 domain region for species identification of all Candida species, other Candida species such as C. albicans, C. tropicalis, C. dubliniensis, and C. krusei should be verified in further studies additionally.
The red flour beetle, Tribolium castaneum, is one of the most common and economically important pests of stored cereal products worldwide. Furthermore, these beetles can act as vectors for several fungal post-harvest diseases. In this study, we collected T. castaneum from 49 rice processing complexes (RPCs) nationwide during 2016-2017 and identified contaminating fungal species on the surface of the beetles. Five beetles from each region were placed on potato dextrose agar media or Fusarium selection media after wet processing with 100% relative humidity at $27^{\circ}C$ for one week. A total of 142 fungal isolates were thus collected. By sequence analysis of the internal transcribed spacer region, 23 fungal genera including one unidentified taxon were found to be associated with T. castaneum. The genus Aspergillus spp. (28.9%) was the most frequently present, followed by Cladosporium spp. (12.0%), Hyphopichia burtonii (9.2%), Penicillium spp. (8.5%), Mucor spp. (6.3%), Rhizopus spp. (5.6%), Cephaliophora spp. (3.5%), Alternaria alternata (2.8%) and Monascus sp. (2.8%). Less commonly identified were genera Fusarium, Nigrospora, Beauveria, Chaetomium, Coprinellus, Irpex, Lichtheimia, Trichoderma, Byssochlamys, Cochliobolus, Cunninghamella, Mortierella, Polyporales, Rhizomucor and Talaromyces. Among the isolates, two known mycotoxin-producing fungi, Aspergillus flavus and Fusarium spp. were also identified. This result is consistent with previous studies that surveyed fungal and mycotoxin contamination in rice from RPCs. Our study indicates that the storage pest, T. castaneum, would play an important role in spreading fungal contaminants and consequently increasing mycotoxin contamination in stored rice.
The substantial use of fungal enzymes to degrade lignocellulosic plant biomass has widely been attributed to the extensive requirement of powerful enzyme-producing fungal strains. In this study, a two-step screening procedure for finding cellulolytic fungi, involving a miniaturized culture method with shake-flask fermentation, was proposed and demonstrated. We isolated 297 fungal strains from several cellulose-containing samples found in two different locations in Thailand. By using this screening strategy, we then selected 9 fungal strains based on their potential for cellulase production. Through sequence-based identification of these fungal isolates, 4 species in 4 genera were identified: Aspergillus terreus (3 strains: AG466, AG438 and AG499), Penicillium oxalicum (4 strains: AG452, AG496, AG498 and AG559), Talaromyces siamensis (1 strain: AG548) and Trichoderma afroharzianum (1 strain: AG500). After examining their lignocellulose degradation capacity, our data showed that P. oxalicum AG452 exhibited the highest glucose yield after saccharification of pretreated sugarcane trash, cassava pulp and coffee silverskin. In addition, Ta. siamensis AG548 produced the highest glucose yield after hydrolysis of pretreated sugarcane bagasse. Our study demonstrated that the proposed two-step screening strategy can be further applied for discovering potential cellulolytic fungi isolated from various environmental samples. Meanwhile, the fungal strains isolated in this study will prove useful in the bioconversion of agricultural lignocellulosic residues into valuable biotechnological products.
Endophytic fungi are microorganisms inhabiting living plant tissues without causing apparent harm to the host. They are drawing increasing attention due to their ability to produce various bioactive compounds as well as their effects on host growth and resistance to biotic and abiotic stresses. As a first step to assess biodiversity of plant associated fungi in Korea and the following evaluation on diverse biological activities, we are collecting endophytic fungi from plant in wild followed by systematic long-term storage in liquid nitrogen. Molecular identification using ITS sequences was also incorporated for pure culture by hyphal tip isolation. As of April 2015, about 1,400 fungal strains had been isolated from about 170 plant taxa. Fungal isolates belonging to Pleosporales, Diaporthales, Glomerellales, Hypocreales, and Xylariales were the most abundant. These collections are being used for several complementary researches, including screening of isolates with novel bioactive compounds or conferring drought stress resistance, phylogenetic and genomic study. Genome sequencing was performed for 3 isolates, one Xylaria sp. strain JS573 producing griseofulvin, an antifungal compound, and two Fusarium spp. strains JS626 and JS1030, which are assumed to be new species found in Korea. More detailed analysis on these genomes will be presented. These collections and genome informations will serve as invaluable resources for identifying novel bioactive materials in addition to expand our knowledge on fungal biodiversity.
An imperfect fungus Fusiococcum species was isolated from Quercus dentata. A naturally infected Daimyo oak tree was collected and showed elongate wounds on the stem. The fungal cultures were initially white and cottony, and later turned dark gray. Numerous solitary pycnidia were developed on the medium surface, and typically spherical. Yellowish conidial masses were exuded from pycnidia on the culture plates. Conidial masses were swollen and measured as approximately 100 to $300{\mu}m$ in length. It appeared that conidia were usually held together in globose to oval drops. Conidia were hyaline, single-celled (nonseptate), ellipsoid to fusoid, and measured as approximately $8.0{\times}2.7{\mu}m$. Based on these cultural and morphological characteristics, the fungal isolate was identified as a species of Fusicoccum Corda. To preserve and examine fungal spores exuded from pycnidia on the medium surface, a vapor fixation procedure for scanning electron microscopy was employed in this study. The specimens were exposed to the vapor of 2% (v/v) glutaraldehyde and 2% (w/v) osmium tetroxide each for 2 h. With the vapor fixation we obtained excellent retention of conidial masses in this study. The simple and versatile procedure for demonstrating fungal spores and their exudation from fruiting bodies would facilitate characterization of diverse pathological and environmental isolates as they are in native environments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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