• 제목/요약/키워드: Functional assay

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RhoBTB3 Regulates Proliferation and Invasion of Breast Cancer Cells via Col1a1

  • Kim, Kyungho;Kim, Youn-Jae
    • Molecules and Cells
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    • 제45권9호
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    • pp.631-639
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    • 2022
  • Breast cancer is the leading cause of cancer-related death in women worldwide, despite medical and technological advancements. The RhoBTB family consists of three isoforms: RhoBTB1, RhoBTB2, and RhoBTB3. RhoBTB1 and RhoBTB2 have been proposed as tumor suppressors in breast cancer. However, the roles of RhoBTB3 proteins are unknown in breast cancer. Bioinformatics analysis, including Oncomine, cBioportal, was used to evaluate the potential functions and prognostic values of RhoBTB3 and Col1a1 in breast cancer. qRT-PCR analysis and immunoblotting assay were performed to investigate relevant expression. Functional experiments including proliferation assay, invasion assay, and flow cytometry assay were conducted to determine the role of RhoBTB3 and Col1a1 in breast cancer cells. RhoBTB3 mRNA levels were significantly up-regulated in breast cancer tissues as compared to in adjacent normal tissues. Moreover, RhoBTB3 expression was found to be associated with Col1a1 expression. Decreasing RhoBTB3 expression may lead to decreases in the proliferative and invasive properties of breast cancer cells. Further, Col1a1 knockdown in breast cancer cells limited the proliferative and invasive ability of cancer cells. Knockdown of RhoBTB3 may exert inhibit the proliferation, migration, and metastasis of breast cancer cells by repressing the expression of Col1a1, providing a novel therapeutic strategy for treating breast cancer.

Porcine Placenta의 기능성 화장품소재 특성 (Functional Cosmetic Effect of Porcine Placeta)

  • 김보영;김타곤;강환열;백현;전혜영;김동욱
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제48권3호
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    • pp.327-331
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    • 2010
  • 돈 태반의 화장품소재로서의 응용가능성을 조사하기 위해 알칼리 가수분해, 효소처리 및 산처리 가수분해 방법을 이용하여 추출물을 얻었다. 돈 태반 추출물의 중금속함량을 측정한 결과 납, 비소, 수은 등이 매우 낮아서 화장품소재로서 적절하였다. 화장품소재의 안전성시험(MTT assay) 결과 돈 태반 추출물은 모두 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 80% 이상의 세포생존율을 보여주어서 독성이 비교적 낮은 것으로 나타났다. DPPH free radical scavenging assay를 사용한 항산화시험 결과, $50{\mu}g/ml$의 농도에서 pH9로 알칼리 처리한 경우가 항산화율이 63%로 가장 높았다. Tyrosinase 활성저해시험을 사용한 미백효과 측정 결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 알칼리처리한 추출물의 효과가 30% 정도의 tyrosinase 억제효과를 보여주어서 가장 우수하였지만, 대조군인 arbutin이나 비타민 C에 비해 그 효과가 다소 낮았다. Elastase 활성억제시험을 이용한 주름개선 효과 측정결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 5가지의 처리법에서 모두 20~30%의 elastase 저해활성을 보여주어서, 대조군보다 우수하였으며, 특히 효소처리한 추출물의 효과가 가장 우수하였다. 돈 태반 추출물 1%를 함유한 스킨제형을 제조하여 온도, 시간에 따른 안정성 시험결과, 안정성 역시 매우 우수하였다. 따라서 돈 태반 추출물은 주름개선 기능성 화장품소재로서의 가능성이 높음을 알 수 있었다.

Development of Vitamin D Determination in Infant Formula by Column-Switching HPLC with UV Detector

  • Ko, Jin-Hyouk;Kwak, Byung-Man;Ahn, Jang-Hyuk;Shim, Sung-Lye;Kim, Kyong-Su;Yoon, Tae-Hyung;Leem, Dong-Gil;Jeong, Ja-Young
    • 한국축산식품학회지
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    • 제32권5호
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    • pp.571-577
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    • 2012
  • This study was carried out to develop an analytical method for the determination of vitamin D in infant formula. Vitamin D was determined by column-switching high-performance liquid chromatography (HPLC) equipped with a reversed phase column and UV detector after saponification and extraction of the formula with an organic solvent. A preseparation column ($C_8$), focusing column ($C_{18}$), analytical column ($C_{18}$) and UV-Vis detector (254 nm) were used. The limits of detection (LOD) and the limits of quantification (LOQ) for vitamin D were estimated to be $1.51{\mu}g/kg$ and $4.95{\mu}g/kg$, respectively. The linearity, recovery, precision and accuracy of the analytical method for vitamin D were evaluated through the application of a SRM (Standard Reference Material) 1846 (National Institute of Standard & Technology, USA). The linearity of this method was calculated with a value of the coefficient of determination ($r^2$) ${\geq}0.9999$. The recovery of vitamin D was $85.20{\pm}3.00%$. The intra-assay precision for vitamin D was between $1.68{\pm}0.03%$ and $5.75{\pm}0.33%$, and the inter-assay precision for vitamin D ranged from $1.73{\pm}0.03%$ to $2.96{\pm}0.09%$. The intra-assay accuracy for vitamin D was between $100.03{\pm}2.77%$ and $102.01{\pm}0.59%$, and the inter-assay accuracy for vitamin D ranged from $99.00{\pm}1.53%$ to $102.01{\pm}3.04%$. The proposed method is optimal for the separation and quantification of vitamin D from infant formula.

Cyanidine-3-glucoside (C3G) 색소의 함유량이 증대된 쌀 신품종(C3GHi)의 항산화 및 항당뇨 활성 (Antioxidative and Anti-diabetic Activity of C3GHi, Novel Black Rice Breed)

  • 김화영;김중학;이성애;류수노;한상준;홍성길
    • 한국작물학회지
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    • 제55권1호
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    • pp.38-46
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    • 2010
  • C3GHi 쌀 품종은 흑진주벼와 수원425호를 교배조합으로 하여 색소 성분인 cyanidine-3-glucoside(C3G)의 함량을 비약적으로 증대시킨 품종이다. C3GHi 벼품종을 활용하여 기능성 제품 및 소재로의 개발 가능성을 타진하기 위하여 본 연구에서는 C3GHi 벼품종의 항산화 활성 및 항당뇨 기능의 검증을 수행하였다. 1. C3GHi 벼품종의 항산화 활성을 비교 분석한 결과에서 C3GHi는 일반 벼 및 흑진주벼보다 매우 우수한 항산화 활성을 가진 것으로 나타났으며, 대표적 항산화 소재인 glutathione과 유사한 활성을 나타내었다. 2. C3GHi 벼품종의 혈당지수를 인체 시험을 통해서 산출한 결과에서도 일반 현미나 백미에 비해서 15%정도 낮은 혈당지수를 나타내 당뇨 환자들의 식사 대용식의 소재로서 활용 가능성이 높을 것으로 사료된다. 3. db/db mice 모델 및 STZ를 통해 당뇨병을 유발한 동물 모델에서 C3GHi 쌀추출물 및 C3GHi쌀 현미의 동결건조 분말이 혈당 상승을 막고, 산화적 손상을 억제하는 것으로 나타났다. 4. 이상의 결과에서 C3GHi쌀은 낮은 혈당지수 및 항산화 활성, 항당뇨 활성 등을 보유하고 있어 이후 당뇨 환자용 기능성 식사 대용식 및 기능성 식품 원료로서의 개발 가능성이 높다고 판단된다.

Functional Characterization of ABCB4 Mutations Found in Low Phospholipid-Associated Cholelithiasis (LPAC)

  • Kim, Tae Hee;Park, Hyo Jin;Choi, Ji Ha
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제17권6호
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    • pp.525-530
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    • 2013
  • Multidrug resistance 3 (MDR3) is expressed on the canalicular membrane of the hepatocytes and plays an important role in protecting the liver from bile acids. Altered ABCB4 gene expression can lead to a rare hepatic disease, low phospholipid-associated cholelithiasis (LPAC). In this study, we characterized 3 ABCB4 mutations in LPAC patients using various in vitro assay systems. We first measured the ability of each mutant to transport paclitaxel and then the mechanisms by which these mutations might change MDR3 transport activity were determined using immunoblotting, cell surface protein biotinylation, and immunofluorescence. Through a membrane vesicular transport assay, we observed that the uptake of paclitaxel was significantly reduced in membrane vesicles expressing 2 ABCB4 mutations, F165I and S320F. Both mutants showed significantly decreased total and cell surface MDR3 expression. These data suggest two missense mutations of ABCB4 may alter function of MDR3 and ultimately can be determined as LPAC-causing mutations.

서양민들레와 흰민들레 추출물의 Nitric Oxide 생성억제 및 소거 활성과 Tyrosinase 저해 활성 (Nitric Oxide Production Inhibitory and Scavenging Activity and Tyrosinase Inhibitory Activity of Extracts from Taraxacum officinale and Taraxacum coreanum)

  • 임도연;이경인
    • 한국약용작물학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.362-367
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    • 2011
  • The study was conducted to investigate functional materials as skin whitening and anti-inflammatory agent from Taraxacum officinale and Taraxacum coreanum. The total polyphenol and flavonoid content in the ethanol extract of Taraxacum officinale were found to be 64.07mg/g and 32.46mg/g, respectively. In tyrosinase inhibitory activity, the hot water extract of Taraxacum coreanum was higher than the other extracts. However, in nitric oxide (NO) scavenging ability, the ethanol extract of Taraxacum coreanum was higher than the other extracts. the ethanol extract of Taraxacum coreanum showed strong NO production inhibitory effect in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cell. In the cell viability measurement by MTT assay and the lactate dehydrogenase (LDH) assay against L929 cell, the extracts were exhibited fine cell viabilities and normal LDH release levels as nontoxic result in sample concentration of $250{\sim}1000{\mu}g/m{\ell}$. As a result, the ethanol extract and the hot water extract of Taraxacum coreanum could be applicable to functional materials for anti-inflammatory and skin whitening related fields, respectively.

Lactiplantibacillus plantarum으로 발효한 황련해독탕 가미방의 기능성 화장품 조성물로서의 생리활성 증대에 관한 연구 (A study on the increase of Physiological Activity as a Functional Cosmetic Composition of Hwangryunhaedoktang-Gamibang Fermented with Lactiplantibacillus Plantarum)

  • 서상완
    • 동의생리병리학회지
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    • 제35권6호
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    • pp.228-234
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    • 2021
  • Hwangryunhaedoktang is one of the prescriptions used in traditional medicine for skin diseases. In this study, Hwangryunhaedoktang-Gamibang (HG) was fermented with Lactiplantibacillus plantarum, a probiotic lactic acid bacterium, to evaluate its potential as a functional cosmetic composition. Strains with anti-inflammatory activity were selected by isolating lactic acid bacteria from kimchi, a traditional Korean fermented food. HG was inoculated with lactic acid bacteria and the viability was measured. The supernatant was obtained by centrifugation of fermented Hwangryunhaedoktang-Gamibang (HGF) and HG, and the filtered supernatant was freeze-dried and used in the experiment. By measuring DPPH and ABTS scavenging activity, it was confirmed that the antioxidant activity was increased. RAW264.7 cells were inoculated with HG and HGF to confirm anti-inflammatory activity through NO assay, and production levels of pro-inflammatory cytokines (IL-1β, IL-6, and TNF-α) were measured through ELISA assay. It was confirmed that HGF had a greater decrease in production than HG. Through lactobacilli fermentation, the beneficial probiotic properties and antioxidant and pro-inflammatory activities of lactic acid bacteria suggest potential clinical or technical applications.

서리태 에탄올 추출물의 항산화 활성 및 암세포 증식 억제 효과 (Antioxidant Activity and Cytotoxic Effect of an Ethanol Extract from Seoritae)

  • 전연희;원지혜;권지은;김미라
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.1-10
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    • 2011
  • 본 연구에서는 서리태 에탄올 추출물의 항산화 활성을 측정하고, 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량을 분석하였으며, MTT 및 SRB assay를 통한 암세포 증식 억제 활성을 측정하였다. 서리태 에탄올 추출물의 DPPH 및 ABTS 라디칼에 대한 전자공여능은 500 ${\mu}g$/assay의 농도에서 각각 63.75%와 87.68%로 나타났고, $IC_{50}$ 값은 각각 385.39 ${\mu}g$/assay와 209.39 ${\mu}g$/assay로 나타났으며, 항산화 활성 물질로 알려져 있는 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 1.65 mg/g과 0.59 mg/g으로 분석되었다. 또한 서리태 에탄올 추출물(800 ppm)은 MTT assay에서 인체 폐암세포인 A-549에 대해 76.48%의 암세포 증식 억제 활성을 나타내었고, SRB assay에서 인체 자궁암세포인 HeLa에 대해 80.54%의 암세포 증식 억제 활성을 나타내었다. 이들 결과는 서리태 에탄올 추출물이 높은 항산화 활성과 우수한 암세포 증식 억제 활성을 가지고 있음을 나타낸 것으로 서리태 에탄올 추출물의 천연 기능성 소재로서의 이용 가능성을 보여주었다.

왕겨초액의 대량생산과 항노화 및 미백 효과 (Mass Production of Chaff-vinegar and Its Effect of Anti-Aging and Whitening)

  • 황재규;윤종국;김숙경;이상한;한길환
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제40권3호
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    • pp.208-214
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    • 2012
  • 본 연구는 왕겨를 이용한 항산화, 항노화에 효과적인 초액을 대량생산하여 기능성을 검증하고 왕겨초액 내의 기능성물질을 분석하여 사업화의 가능성을 타진하고자 하였다. 정제된 왕겨초액을 분획하여 기능성이 확인된 부분을 HPLC 기기를 이용하여 확인한 결과 caffeic acid 외에 7종의 polyphenol 유래물질에서 기능성을 확인하였다. 기능성 화장품소재 시험으로는 세포 생존율 측정(MTT assay), 주름개선 (collagenase inhibition assay, elastase inhibition assay), 미백(tyrosinase inhibition assay), 항산화 시험(DPPH free radical scavenging assay, SOD-like activity, xanthine oxidase inhibition assay)이 실시하였다. 피부주름형성은 콜라겐의 합성과 분해가 중요한 원인으로 작용한다고 알려져 있지만, 최근 많은 연구에서 엘라스틴의 재형성과 분해 또한 주름형성 기전에서 중요한 작용을 하는 것으로 보고되고 있다. 왕겨초액은 $100{\mu}L/mL$의 농도에서 collagenase 저해효과가 100%, elastase 저해효과가 55% 이상으로 주름개선 효과가 우수하였다. 왕겨초액은 $100{\mu}L/mL$의 농도에서 tyrosine에 대한 tyrosinase 저해효과가 80% 이상으로 미백효과가 우수하게 나타났다. DPPH radical 소거율, xanthine oxidase 저해와 SOD-like 활성을 이용하여 항산화 효과를 측정하였다. 왕겨초액 $100{\mu}L/mL$의 농도에서 DPPH radical 소거율이 80%, xanthine oxidase 저해효과가 80%, 그리고 SOD-like 활성이 100%를 나타내었다. 따라서 본 연구를 통하여 정제 왕겨초액을 이용한 산업화를 위한 가능성을 타진하여 효과가 좋음을 확인할 수 있었다. 이와 같은 결과로 왕겨초액을 이용한 기능성 화장품의 소재로 뿐만 아니라, 식품 및 의약외품의 품목허가를 통하여 고부가가치의 상품화소재로의 가능성이 있다고 사료됩니다.

Antioxidative Activities of Korean Apple Polyphenols

  • Kim, Yoon-Sook;Choi, Hee-Don;Choi, In-Wook
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제16권4호
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    • pp.370-375
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    • 2011
  • The antioxidative activity and the polyphenolic composition were examined in four different cultivars of apple (Malus domestica), 'Fuji', 'Tsugaru', 'Hongro' and 'Kogetsu', and their parts (peel, core, pulp and juice). The total phenolics, flavonoids and anthocyanins differed among the tested cultivars and parts. Peel parts had the highest total phenolics and anthocyanin content. Contributions of those phenolics to total antioxidative activity were determined using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging assays, and the linoleic acid oxidation assay. Concentration of phenolics contributes significantly to the total antioxidative activity of apples. Clearly, apple peels, especially from Hongros and Kogetsus, possess high levels of phenolic compounds and antioxidants. Therefore, apple peels may potentially function as a value-added ingredient.