• 한국동물생명공학회지
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• 제34권4호
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• pp.272-279
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• 2019

The study was conducted to evaluate the seminal attributes and cryobanking of Achhami (Bos indicus) bull semen. Of two Achhami bulls, 8 ejaculates from each bull were evaluated for seminal attributes. For semen freezing and cryo-banking, 4 ejaculates (having ≥2 mL semen volume, ≥75% of sperm motility and ≥1,000 × 10⁶ cells/mL of sperm concentration) from each bull were used. Semen samples were diluted in egg-yolk-tris-citrate extender using a two-step dilution protocol, and were frozen in liquid nitrogen (LN₂) vapour in a styrofoam box. The mean semen volume, colour, sperm mass activity, motility, viability, concentration, abnormal acrosome, midpiece and tail and, abnormal head of two Achhami bulls were 4.4 ± 0.5 mL vs. 2.5 ± 0.2 mL, 2.5 ± 0.1 vs. 2.4 ± 0.1, 3.5 ± 0.1 vs. 3.5 ± 0.1, 77.0 ± 1.1% vs. 78.3 ± 1.3%, 94.4 ± 0.5% vs. 91.0 ± 0.6%, 1137.7 ± 73.7 × 10⁶ cells/mL vs. 1060.0 ± 44.3 × 10⁶ cells/mL, 10.2 ± 0.5% vs. 10.3 ± 0.5% and 6.7 ± 0.5% vs. 8.2 ± 0.3%, respectively. The post-thawed sperm motility and viability were 53.0 ± 2.0% vs. 50.0 ± 0.0% and 80.2 ± 0.4% vs. 73.2 ± 0.7%, while evaluating by computer-assisted sperm analysis (CASA) system, the percentage of the progressive motility, fast motility, slow motility, local motility and immotile sperm were 75%, 68%, 7.4%, 16.6% and 8.6%, respectively. A total number of 620 doses semen straw were cryo-banked. Due to the acceptable post-thawed sperm motility and viability recorded, cryopreservation of Achhami semen is hereby recommended so as to preserve the Achhami breed. For further validation, the fertility will be observed from the produced frozen semen.

• 한국수정란이식학회지
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• 제18권2호
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• pp.143-149
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• 2003

한우의 유전자원을 보존하기 위하여 정액동결 시험을 수행하였으며 고급육계통은 육질에 대한 육종가 상위 10% 이내의 자손에서 선발하였고 다 유계통은 어미의 이유시 체중에 대한 육종가 상위 10%이내의 자손에서 선발하였으며 2개 계통에서 종모우 총 13두를 선발하여 공시하였다. 정액채취는 인공질법으로 실시하였고 의빈대에 수소를 계류하고 채정대상우를 승가시켰으며, 3회 가승가후에 채정하였다. 채정후 10분 이내에 실험실로 옮겨와 검사항목을 조사하고 37$^{\circ}C$에서 1차 희석을 하고 5$^{\circ}C$까지 하강한 후 2차 희석을 하였으며, 액체 질소 5cm 위에서 5분간 평형후 침지하여 동결하였다. 이들 종모우 정액의 일반적 성상에 있어서 채정된 정액량은 1차와 2차를 합하였을 때 평균 채정량이 5.7 ml였고 정자농도는 975${\times}$$10^{6}$개였으며 정액의 색상은 유백색이었고 pH는 6.8이었다. 채취시 생존성은 90.2% 그리고 동결 융해후에는 65.7 %가 생존하였으며 총 6,870스트로우의 동결 정액을 생산하여 보존하였다.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제49권4호
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• pp.443-450
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• 2007

본 연구에서는 엘크 사슴의 계절별 정액성상 변화, 동결정액의 융해 후 활력 및 발정동기화 후 인공수정 시간이 수태율에 미치는 영향을 조사하여 효율적인 인공수정 방법을 제시코자 시도하였다. 수사슴에서 정액의 연중 변화는 정액량, 정자 농도, 총 정자 수 및 정자 활력은 7월부터 급격히 증가 되어 정액량과 총 정자 수 및 정자 운동성은 10월에 최고치에 달했고, 정자 농도는 9월에 가장 많은 것으로 조사 되었다. 그 후 정액량, 정자농도, 총 정자 수 및 정자 운동성은 점진적으로 감소하여 정액 양, 정자 농도는 4~6월, 총 정자 수는 4~5월 및 정자 운동성은 6월에 최저 수준으로 감소하였다.번식계절(9~2월)과 비번식계절(3~8월)의 정자 농도, 총 정자 수 및 정자 운동성은 번식계절이 유의적으로 높게 조사되었다(P<0.05). 번식계절과 비번식계절에 채취한 정액의 동결과정 중에 정자 운동성의 결과는 채취 직후, 5℃냉각 후 및 동결 융해 후 활력이 번식계절이 높은 것으로 조사 되었다(P<0.05).인공수정 시간에 따른 수태율은 CIDR 제거 후 60시간에 인공수정 한 처리구가 수태율이 다른 시간들 보다 다소 높았으나 유의적인 차이는 나타나지 않았다.이러한 연구 결과는 엘크 사슴에서 정액 생산과 인공수정을 수행함에 있어 유용한 자료로 이용 될 수 있으며, 발정동기화 후 호르몬 변화, 배란 및 수정 적기 등에 관한 연구가 추가적으로 수행되어야 할 것으로 사료된다.

• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2001년도 발생공학 국제심포지움 및 학술대회 발표자료집
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• pp.57-57
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• 2001

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2001년도 추계학술대회 및 정기총회
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• pp.30-30
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• 2001

• 한국임상수의학회:학술대회논문집
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• 한국임상수의학회 2009년도 추계학술대회
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• pp.260-260
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• 2009

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제15권11호
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• pp.1553-1558
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• 2002

This study was carried out to obtain informations regarding the effect of N-acetyl-D-glucosamine in the LEY (lactoseegg yolk) diluent according to incubation time in 5 ml maxi-straw and the effects of freezing rate, thawing temperature and thawing time in the LEN (lactose-egg yolk and N-acetyl-D-glucosamine) diluent on acrosome morphology and motility of frozen-thawed boar sperm. The study showed that the LEN diluent was higher post-thaw NAR (normal apical ridge) acrosome than the LEY diluent for 0.5 h incubation at 37$^{\circ}C$. However, there were no differences between the LEN and LEY diluents on post-thaw sperm motility according to incubation time. The straws frozen from 5.0 cm (20$^{\circ}C$/min) to 17.0 cm (1$^{\circ}C$/min) above the liquid nitrogen surface did not show any significant differences on post-thaw sperm motility. However, the straws frozen above 5.0 cm from the liquid nitrogen surface were higher NAR acrosome than those frozen above 17.0 cm. The post-thaw percentages of motile sperm and NAR acrosome were significantly higher (p<0.05) for the maxi-straws submerged for 40 or 45 sec in a 52$^{\circ}C$ water bath than for 30, 35, 50 or 55 sec. The mean sample temperatures of maxi-straws after 40 or 45 sec submersion were 20.7 or 26.4$^{\circ}C$. In conclusion, the sample temperature of the thawed semen was very important for post-thaw sperm survival in the LEN diluent of 5 ml maxi-straw. When the temperature of the thawed semen was 20.7$^{\circ}C$, the percentages of motile sperm and NAR acrosome were highest.

• 한국수정란이식학회지
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• 제25권4호
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• pp.291-295
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• 2010

Four estrus-induced Himalayan tahrs (Hemitragus jemlahicus) were inseminated with frozen-thawed semen by laparoscopic or transcervical insemination techniques with no regard to the site of ovulation in non-breeding season. In June and July, 2009, estrus was synchronized by Eazi-Breed $CIDR^{(R)}$ (Controlled internal drug release; Pfizer Animal Health, New Zealand) insertion for 16 days and PG 600 (PMSG 400IU, hCG 200 IU; Intervet, Netherlands) injection (IM) a day before removing $CIDR^{(R)}$. Forty eight hours later, laparoscopic or transcervical insemination was done to each of two tahrs under anesthetic condition inducted by ketamine (1.5 mg/kg) and medetomidine (0.09 mg/kg). For examination of estradiol and progesterone, blood was collected right before $CIDR^{(R)}$ insertion, PG 600 injection, $CIDR^{(R)}$ removal and insemination. Estradiol levels of four tahrs (No. 1, 2, 3, 4) before $CIDR^{(R)}$ insertion and insemination were 13.3, 8.8, 14.3, 12 pg/ml and 23.5, 25.5, 21.1, 11.5 pg/ml, respectively. Progesterone levels of four tahrs (No. 1, 2, 3, 4) before $CIDR^{(R)}$ insertion and insemination were 1.8, 0.05, 0.63, 0.61 ng/ml and 1.03, 0.37, 1.48, 2.12 ng/ml. Except for No. 4 tahr, cervices showed cervical mucus and opened enough to penetrate with embryo transfer gun sheet usually used for cows. Therefore, No.4 was laparoscopically inseminated together with No. 1. In conclusion, none of four Himalayan tahrs was pregnant. However, we proved that estrus could be induced by CIDR and PG 600 injection in non-breeding season, and laparoscopic or transcervical insemination with frozen-thawed semen could be one of assisted reproductive techniques in Himalayan Tahr.

• 한국임상수의학회지
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• 제10권1호
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• pp.11-18
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• 1993

Four extenders such as tris-fructose-citrate, Tris-glucose-citrate, glycine-glucose-citrate and lactose that the more frequently utilized types of semen extenders used for freezing dog semen evaluated with sperm motility, viability and acrosomal score in the processing procedures to prior freezing and after frozen-thawing respectively. Each extender contained 4% glycerol and 20% egg yolk were treated by same methods in dilution, freezing, storage and thawing. The results were obtained as follows; 1. The sperm motility and viability in procedure from dilution to frozen-thawing appeared superiorly with recovery rate of 53.2%, 54.8% in tris-fructose-citrate but appeared inferiorly with recover rate of 8.4%, 8.3% in lactose to others. 2. In the processing procedure course to prior-freezing, glycine-glucose-citrate appeared superiorly with decrease rate of 5.4% in motility, and lactose with decrease rate of 4.6% in viability, but tris-glucose-citrate appeared inferiorly with decrease rate of 12.2%, 11.4% in the sperm motility and viability. 3. During frozen-thawing, tris-fructose-citrate appeared superiorly with decrease rate of 35.2% in motility and 30.7% in viability but lactose appeared inferiorly with decrease rate of 76.7% in motility and 75.7% in viability. 4. The variation of acrosome morphology in the total processing procedures appeared that glycine-glucose citrate were superior with acrosome score of 0.1191$\pm$0.029, that tris-fructose-citrate were inferior with acrosome score of 0.1941$\pm$0.045 to others.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제37권3호
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• pp.155-159
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• 2013

본 연구는 제주흑우의 정액의 동결과 보존기술 개발을 위해 AndroMed와 Trialdyl를 사용하여 보다 우수한 희석제와 우수 종모우 선정을 위해 실시되었다. 종모우 1번부터 4번까지 개체 정자의 성상비교에서 수정능 획득과 첨체반응의 비율은 36.8%, 26.8%, 37.8% 그리고 38%의 결과를 나타내었다. 2번 개체 정자에서 수정능 획득과 첨체반응의 비율이 유의적으로(p<0.05) 낮은 결과를 보였다. 제주흑우 정액을 동결하기 전 정자의 생존율은 약 $93.27{\pm}1.62$, 동결 융해 후 생존율은 $73.34{\pm}3.27%$로 나타나 동결전 정액의 생존율이 유의적으로(p<0.05) 높은 결과를 나타내었으나, 사멸 정자의 비율은 약 $7.35{\pm}2.63%$와 $13.71{\pm}2.85%$의 결과를 나타내었다. 그리고 $Triladyl^{(R)}$ 동해 방지제를 사용하였을 때, 정자의 운동성은 $72.86{\pm}2.83%$, $AndorMed^{(R)}$를 사용하였을 때 운동성은 $81.47{\pm}2.48%$로 $AndorMed^{(R)}$ 동해방지제를 사용하였을 때 운동성이 다소 높은 경향을 보였으나, 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 마찬가지로 정자의 사멸율에서도 $Triladyl^{(R)}$ 동해 방지제는 $18.41{\pm}3.42%$, $AndorMed^{(R)}$ 동해방지제는 $17.26{\pm}4.25%$의 결과를 보여 AndroMed를 사용한 동해방지제가 정자의 생존율을 향상시키는 것으로 나타났다. 결론적으로 제주흑우 정액의 동결 보존을 위해 보다 향상된 동결보호제 선정과 동결보존 기술 개발이 필요할 것으로 사료된다.