• Journal of Veterinary Science
• /
• 제24권1호
• /
• pp.11.1-11.14
• /
• 2023

Background: Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are commonly used to assess in vitro immune responses. However, PBMC isolation is a time-consuming procedure, introduces technical variability, and requires a relatively large volume of blood. By contrast, whole blood assay (WBA) is faster, cheaper, maintains more physiological conditions, and requires less sample volume, laboratory training, and equipment. Objectives: Herein, this study aimed to develop a porcine WBA for in vitro evaluation of immune responses. Methods: Heparinized whole blood (WB) was diluted (non-diluted, 1/2, 1/8, and 1/16) in RPMI-1640 media, followed by phorbol myristate acetate and ionomycin. After 24 h, cells were stained for interferon (IFN)-γ secreting T-cells followed by flow cytometry, and the supernatant was analyzed for tumor necrosis factor (TNF)-α. In addition, diluted WB was stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and polyinosinic:polycytidylic acid (poly I:C), reference strain KCTC3557 (RS), field isolate (FI), of heat-killed (HK) Streptococcus suis, and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). Results: The frequency of IFN-γ⁺CD3⁺ T-cells and concentration of TNF-α in the supernatant of WB increased with increasing dilution factor and were optimal at 1/8. WB TNF-α and interleukin (IL)-10 cytokine levels increased significantly following stimulation with LPS or poly I:C. Further, FI and RS induced IL-10 production in WB. Additionally, PRRSV strains increased the frequency of IFN-γ⁺ CD4^-CD8⁺ cells, and IFN-γ was non-significantly induced in the supernatant of re-stimulated samples. Conclusions: We propose that the WBA is a rapid, reliable, and simple method to evaluate immune responses and WB should be diluted to trigger immune cells.

• 한국엔터테인먼트산업학회논문지
• /
• 제13권1호
• /
• pp.217-223
• /
• 2019

본 연구는 사람의 대장암에 천연물인 과라나와 그라비올라가 어떤 효능을 나타내는지를 확인하고자 항산화 활성과 항암활성을 분석하였다. 각각 에탄올로 추출하여 control, 25.0, 50.0, 75, 100.0mg/ml의 농도에서 DPPH분석한 결과 과라나는 50mg/ml에서 80.9%, 그라비올라는 71.4%의 소거율을 보여 유의적인 항산화 활성이 있음을 확인하였다. 인체 대장암 세포주인 HCT-116에서 MTT assay와 FACS에 의한 apoptotic rate로 항암효과를 조사한 결과, 과라나와 그라비올라 모두 세포증식을 강하게 억제하였으며, 특히 10mg/ml의 농도에서 과라나는 96.65±3.71, 그라비올라는 76.58±2.87%의 높은 apoptotic rate를 나타냄으로써 뚜렷한 항암 효과가 있음을 확인하였다. 이와 같은 결과는 천연 식물성 성분인 과라나와 그라비올라가 대장암의 예방과 치료에 새로운 항암제로서의 기초자료를 제공하는 것이며, 향후 국민건강 및 의료비 절감에도 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

• Korean Journal of Radiology
• /
• 제21권8호
• /
• pp.967-977
• /
• 2020

Objective: To evaluate the effects of tube voltage on image quality in coronary CT angiography (CCTA), the estimated radiation dose, and DNA double-strand breaks (DSBs) in peripheral blood lymphocytes to optimize the use of CCTA in the era of low radiation doses. Materials and Methods: This study included 240 patients who were divided into 2 groups according to the DNA DSB analysis methods, i.e., immunofluorescence microscopy and flow cytometry. Each group was subdivided into 4 subgroups: those receiving CCTA only with different tube voltages of 120, 100, 80, or 70 kVp. Objective and subjective image quality was evaluated by analysis of variance. Radiation dosages were also recorded and compared. Results: There was no significant difference in demographic characteristics between the 2 groups and 4 subgroups in each group (all p > 0.05). As tube voltage decreased, both image quality and radiation dose decreased gradually and significantly. After CCTA, γ-H2AX foci and mean fluorescence intensity in the 120-, 100-, 80-, and 70-kVp groups increased by 0.14, 0.09, 0.07, and 0.06 foci per cell and 21.26, 9.13, 8.10, and 7.13 (all p < 0.05), respectively. The increase in the DNA DSB level in the 120-kVp group was higher than those in the other 3 groups (all p < 0.05), while there was no significant difference in the DSBs levels among these latter groups (all p > 0.05). Conclusion: The 100-kVp tube voltage may be optimal for CCTA when weighing DNA DSBs against the estimated radiation dose and image quality, with further reductions in tube voltage being unnecessary for CCTA.

• 한국물환경학회지
• /
• 제40권4호
• /
• pp.161-167
• /
• 2024

The demand for bottled water in South Korea is steadily increasing, but there are challenges regarding water sources and violations of water quality standards. Consumers struggle to identify products that do not meet these standards, highlighting the need for improved water management. This study aims to investigate the use of flow cytometry to identify microbial behavior in bottled water. Twelve different bottled water brands were selected for this study. A novel non-culture-based analysis method called total cell count via flow cytometry was utilized, which is not commonly used to assess drinking water quality. This method was compared to conventional culture-based methods for heterotrophic plate count and E. coli experiments, in order to introduce new indicators for hygiene management. Adenosine triphosphate analysis was also conducted to assess cell activity, and total organic carbon was measured to determine the presence of organic matter. The total cell counts varied among the different bottled water brands. The adenosine triphosphate levels ranged from 37.1ng/L to 221.7ng/L, while the total organic carbon ranged from 0.4 to 0.6 mg/L. Furthermore, E. coli was not detected in any of the bottled waters, and with the exception of two cases, the levels of heterotrophic bacteria did not exceed the drinking water standard of 100 CFU/mL. This study demonstrated a correlation between total cell count and heterotrophic plate count, suggesting that non-culture-based analysis could be valuable in promptly assessing microbial contamination, in contrast to the conventional methods that require approximately 48 hours for incubation.

• Journal of Plant Biotechnology
• /
• 제2권2호
• /
• pp.109-113
• /
• 2000

Somatic hybrids were produced by electrofusion between embryogenic callus protoplasts of 'Syougun' mandarin and leaf protoplasts of grapefruit. Hybridity of the two plants was confirmed by leaf morphological characteristics and random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. The cpDNA analysis using PCR-RFLP could not distinguish those of both parents. These plants showed normal growth and had chromosome number of 27. These unexpected triploid somatic hybrids might be derived from fused cells between diaploid protoplast of embryogenic calli and diploid protoplast of leaf, because polysomaty, a mixture of haploid cells and diploid cells was observed in the lactose medium-pretreated embryogenic calli of 'Syougun' by flow cytomehy analysis.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
• /
• 제7권1호
• /
• pp.52-55
• /
• 2002

Flow cytometric techniques were used to investigate cell size, protein content and cell cycle behavior of recombinant Saccharomyces cerevisiae strains producing human lysozyme (HLZ). Two different signal sequences, the native yeast $MF\alpha1$ signal sequence and the rat $\alpha-amylase$ signal sequence, were used for secretion of HLZ. The strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence showed a higher level of internal lysozyme and lower specific growth rates. Flow cytometric analysis of the total protein content and cell size showed the strain harboring the native yeast signal sequence had a higher total protein content than the strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence. Cell cycle analysis indicated that the two lysozyme producing recombinant strains had an increased number of cells in the $G_2+M$ phase of the yeast cell cycle compared with the host strain SEY2102.

• Reproductive and Developmental Biology
• /
• 제29권3호
• /
• pp.163-168
• /
• 2005

본 연구는 New Zealand White 수토끼에서 춘기발동 기간 동안에 혈청내 IGF-I(insulin-like growth factor-I)과 GH(growth hormone) 수준의 변화, 정자 형성에 따른 정소내 세포 구성 변화 및 이들 측정치들 간에 관계를 조사하기 위하여 실시되었다. 주령과 관련된 정소내 세포의 DNA 함량 변화 조사를 위하여 $10\~28$주령 수토끼 정소 조직의 fine-needle biopsy를 flow cytometry(FCM)로 분석하였다. 생체중은 $12\~20$주령 때 크게 증가되었고(P<0.05), 28주령 체중은 3.4kg이었다. 혈청 IGF-I 수준(451.3ng/mL)은 20주령에서 가장 높았으며(P<0.05), 그 후 낮은 수준으로 유지되었다. 혈청 GH 수준은 183.3pg/mL으로 다른 주령 때보다 현저히 높았으며(P<0.05), 상승시기가 IGF-I보다는 다소 빨랐다. 정소 조직세포 중 1C-세포의 상대적 비율은 18주령 때 $48.2\%$로 16주령보다 크게 상승되었고(P<0.05), 주령 증가와 더불어 $68\%$로 증가되었다. 2C-세포 비율은 18주령 때 $26.8\%$로 16주령의 $54.3\%$보다 현저히 낮았다(P<0.05). 4C-세포 비율은 18주령 때 $9.9\%$를 제외하고 $2\~6\%$를 유지하였다. 이상 결과에서 토끼는 춘기 발동 개시가 약 18주령에 일어나고 이 기간 중 IGF-I과 GH 수준의 변화가 나이 또는 체성장과 관계가 있었으며 그 영향이 정자 형성과 관련이 있음을 알 수 있었다. Fine-needle biopsy와 연계된 FCM은 춘기 발동 개시와 관련된 정자의 형성 과정을 평가하는데 매우 정확한 방법임을 확인할 수 있었다. 평균 CK-MB치는 $17.4\pm29.7\;IU/L$였다. 전체적인 이식편의 개통률은 $99.1\%\;(214/216)$(좌내유동맥 $100\%$, 요골동맥. $98.4\%$, 우내유동맥: $100\%$)를 보였다. 결론: 다중 복합 Y 동맥 이식편을 이용한 완전 동맥 무인공 심폐 바이패스 관상동맥우회술을 기술적인 문제점 없이 시행할 수 있었으며, 우수한 초기 임상 결과와 개통률을 보였다. 저자들은 특히 심장의 둔각 모서리 부위의 우회술시에 기존의 연쇄 문합에 비해 기술적으로 더 용이하며 복잡한 관상동맥우회술이 필요한 환자에게도 도움이 될 것으로 생각한다.보존하는 일에 등한시하여 왔다. 이 때문에 우리 민족 고유의 뿌리를 점차 잃어가고 있다. 이러한 시점에서 도시노점상을 정리하기 위한 목적으로 정부에서 도시 5일장을 개장한 것은 역사의 아이러니라 아니할 수 없다. 이렇게 정부주도로 개장된 5일장이 운영되어 온 지 2년이 되어가고 있다. 개장 초기에는 시에서의 지원도 적극적이고 소비자들의 호응도 좋았으나, 최근에 들어 활성화의 속도가 둔화되면서 도시 5일장의 개념을 재정립할 필요성이 제기되고 있다. 정부의 주도로 시작된 5일장이므로 정부의 적극적인 추진하에 풍물시장 번영회와 활성화 방안을 모색해야 한다. 쌍다리 풍물시장의 5일장을 활성화하기 위하여 도시 5일장의 개념을 ${\ulcorner}$국민들의 생활수준이 향상되고 여가를 즐길 수 있는 여건이 형성되고 있으므로 전통문화(향토문화)를 유지하고 시민들의 정서함양에 기여할 수 있는 여가공간 조성${\lrcorner}$으로 규정해야 한다. 이러한 개념 하에 5일장의 주체를 명확히 하기 위해 시청 지역경제과를 중심으로 지자제의 실시에 발맞춰 지역특색에 맞게 5일장을 활성화하기 위한 전학을 수립해야 한다

• 한국산림과학회지
• /
• 제101권2호
• /
• pp.291-296
• /
• 2012

세대기간이 긴 임목에 있어 3배체는 바이오매스 생산과 분자생물학적 연구 분야에서 매우 유용한 연구재료이다. 1970년대 육성된 현사시나무 4배체와 일반 2배체 간의 인공교배를 통해 3배체가 육성되었다. 유세포 분석법을 이용해 이들 $F_1$의 배수성을 확인한 결과 14개체 중 10개체가 3배체로 선발되었다. 그 가운데 3계통의 3배체(Line-1, Line-17, Line-18)는 기내배양시 2배체에 비해 잎이 크고, 엽형이 다소 변형된 형태적 특징이 있었다. 특히 'Line-18'은 줄기가 2배체에 비해 굵었으며, 뿌리 생육에 있어서 발근이 더뎠고 뿌리수도 다른 3배체나 2배체에 비해 적은 특징을 보였다. 그러나 순화율은 모두 100%에 달하였다. 본 연구결과는 3배체 현사시나무가 바이오매스 생산 및 형질전환 연구를 위한 좋은 재료가 될 수 있음을 보여주는 결과이며, 또한 유세포 분석법이 배수체 육종시 배수체를 확인하는데 효율적인 방법임을 시사한다.

• 대한임상검사과학회지
• /
• 제49권4호
• /
• pp.382-389
• /
• 2017

임상 실험실에서의 망상 적혈구 계산은 현재 수동 및 자동으로 구분된다. 현미경에 의한 망상 적혈구 수 검사는 정확성의 결여, 낮은 재현성 등이 망상 적혈구 결과의 정확성에 문제가 있다. 또한, 자동 혈액 분석기의 유동 세포 계측법은 개발 도상국 및 소규모 실험실에서 비용 때문에 사용하기가 어렵다. 따라서 본 연구는 이러한 단점을 보완 할 수 있는 새로운 방법을 찾기 위해 노력했다. 이 연구의 목적은 분광 광도계로 염색 된 망상 적혈구 수를 비교하고 또한 분광 광도계 및 유동 세포 계측기의 통계를 분석하는 것이다. 동일한 8 개의 EDTA 샘플을 36 회 반복하여 분광 광도계와 유동 세포 계측기 사이의 일치도를 비교 하였다. 이 연구는 700~780 nm에서 600 배 희석 한 표본을 10 개의 차이로 측정하였다. 흡광도에 의한 710~730 파장은 표준 및 검사와 양의 상관 관계가 있으며(r=0.967, p<0.01), 변수에 대한 상관 관계를 나타내었다. 결과에 대한 회귀 분석결과 최적 희석 계수는 600 배였다. 따라서 본 연구는 자동 분광 광도계를 이용한 망상 적혈구 흡광도 측정에 대한 경제적인 기여 그리고 망상 적혈구 관련 빈혈에 대한 모니터링 시스템 등에 기여 할 수 있는 기술적 활용을 시도한 것이다. 따라서 더욱 광범위한 연구가 필요할 것으로 사료된다.

• 대한임상검사과학회지
• /
• 제54권1호
• /
• pp.68-72
• /
• 2022

혈관면역모세포성 T세포 림프종(AITL)은 성숙 T follicular helper cells의 림프증식성 질환이다. 80세 여성의 골수에서 비정형 림프구가 관찰되었고 B세포에 대한 유세포검사에서 CD19+, CD20-, CD22- 및 lambda 경쇄 restriction과 같은 비정상 표현형이 관찰되었다. 처음에는 유세포검사에서 관찰된 비정상 B세포에 대해 B세포 림프종을 의심하였다. 그러나 환자는 골수를 침범한 AITL로 진단되었다. 유세포검사의 재분석에서 소수의 비정상 T세포 군집을 발견했다. 표면 lambda 경쇄 restriction은 비특이적 결합으로 생각되었다. EBV 양성 T세포 림프종 환자에서 형질세포와 유사한 면역표현형을 가진 B세포가 관찰될 수 있다. 이러한 비정상 B세포 혹은 형질세포의 증식이 기저에 존재하는 T세포 림프종을 가릴 수 있다. 정확한 진단을 위해서는 통합적인 접근이 필요할 것이다.