This study was designed to develop biomarkers of coastal pollution using biochemical indices of flounder (Paralichthys olivaceus) by changes in lactate dehydrogenase (LDH) activity in the serum and cholinesterase activities in brain membranes. For this purpose acetylcholiesterase (AChE) activity, butyrylcholinesterase (BChE) activity, LDH/AChE ratio and LDH/BChE ratio of cultured flounders at 5 different sites on the southern coast of Korea were compared to those of wild flounders caught in the Pohang, eastern coast of Korea as a control group. Relatively high LDH activities were measured in the serum of flounders cultured on the southern coast of Korea (0.101-0.145 unit) than those in the Pohang control group (0.093 unit). AChE activities were significantly low $(about\;10-20\%)$ in brain membranes of cultured flounders compared to those in the Pohang control group. The ratios of LDH/AChE and LDH/BChE were consistently higher $(136-178\%,\; 155-214\%)$ in cultured flounders than those of Pohang control group. Thus, we propose that the ratios of LDH/AChE and LDH/BChE in flounders could be applicable for the diagnosis of marine pollution.
해양오염의 진단을 위한 생화학적 오염지표 설정의 기초 연구의 일환으로, 오염이 심각한 서해(또는 황해)산 넙치(Paralichthys olivaceus)의 혈액 및 뇌중의 활성산소종 및 그들의 제거효소의 활성을 분석 평가하였다. 이들 넙치의 혈청중의 단백질의 함량은 해역이나 양식산의 자연산사이에는 뚜렷한 차이를 발견할 수 없었지만, 서해안 양식산 넙치의 뇌 및 근육중의 단백질 함량이 동해안의 포항의 자연산 넙치(대조군)의 단백질 함량에 비해 각각 30-45%(brain) 및 25-45%(muscle)나 유의적으로 감소하였다(p<0.001). 서해안의 양식 및 자연산 넙치의 혈청중의 과산화지질(MDA)의 량은 대조굼으로 사용한 동해안 포항의 자연산 넙치 대비 각각 30-80% 및 125-145%나 현저히 높았다. 서해안의 양식산 넙치의 혈청중의 히드록시 라디칼의 생성량은 동해안 포항의 자연산 넙치 대비 각각15-30%정도나 오히려 낮았을 뿐만 아니라 서해안의 자연산 넙치도 격포를 제외하고 영광의 자연산 넙치의 히 시 라디칼의 생설양도 약 20%나 낮았다. 서해안의 양식산 넙치의 혈청중의 SOD의 활성은 동해안 포항의 자연산 넙치 대비 15-35%정도나 오히려 낮았을 뿐만 아니라 서해안의 자연산 넙치도 영광은 35%나 낮았지만, 단지 격포만이 SOD의 활성이 35% 정도 높았을 뿐이다. 서해안의 양식산 넙치의 혈청중의 GSHPx의 활성은 동해안 포항의 자연산 넙치 대비 15-25%정도나 유의적으로 높았지만, 서해안의 자연산 넙치의 GSGPx의 활성은 어느 곳이나 낮았다. 이상의 실험결과에서 볼 때 뇌나 근육중의 단백질의 함량이나 뇌중의 GSHPx의 활상, 그리고 혈청중의 과산회지질의 함량이 넙치의 오염지표로서의 가능성을 검토할 가치가 있다고 판단된다.
해양오염의 진단을 위한 생화학적 오염지표 설정의 기초 연구의 일환으로, 오염이 심각한 서해(또는 황해)산 넙치(Paralchthys olvaceus)의 노 및 근육중의 아세틸콜린에스테라아제(AChE) 및 무털릴콜린에스테라아제(butyrylcho-linesterase:BChE)의 활성, 그리고 전산탈수소효소(lactate dehydrogenase:LDH)의 활성을 분석${\cdot}$평가하였다. 서해안의 양식산의 넙치의 뇌 및 근육증의 AChE의 활성은 동해안의 포항의 자연산 넙치의 노 및 근육의 AChE의 활성 대비 각각 40-50% 미 40-55% 정도나 유의적으로 저하되었을 뿐만 아니라 서해안의 자연산 넙치의 뇌 및 근욱중의 AChE의 활성 대비 각각 15-40% 및 25-35% 정도나 유의적으로 저하되었다. 또 서해안의 양식산 넙치의 뇌 및 근육중의 BChE의 활성은 동해안 포항의 자연산 넙치의 뇌 및 근육중의 BChE의 활성 대비 각각 70-75% 및 65-75% 정도나 유의적으로 저하되었ㅇ르 뿐만아니라 서해안의 자연산 넙치의 뇌 및 근육중의 BChE의 활성 대비 각각 50-75% 및 45-50% 정도나 유의적으로 저하되었다. 한편 서해안의 양식산 넙치의 혈약중의 LDH의 활성은 동해안 포항의 자연산 넙치의 혈액중의 LDH의 활성 대비 10-50%정도나 유의적으로 증가하였을 뿐만 아니라 서해안의 자연산 넙치의 혈액중의 LDH의 활성 대비 20-25% 정도나 유의적으로 증가하였다. 따라서 서해안의 양식산 넙치의 오염 뿐만 아니라 자연산 넙치의 오염 가능성도 있다는 사실을 알 수 있다.
Characteristics, pathogenicity and control of the causative organisms isolated front diseased cultured flounder, Paralichthys olivaceus were studied. The causative organisms were identified as E tarda by biochemical and biophysical characteristics. Also, it strains were named as E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1, and optimal pH of E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1 were 8.0, and optimal concentration of NaCl. E tarda KBF-1 was 0% and E tarda KMF-1 was 1%. In the pathogenicity test, 0~10 of the flounders of artificially infected group(E tarda KBF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 60 hrs, but 0~9 flounders infected group with 41.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Also, 0~10 flounders infected group(E tarda KMF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 36 hrs, while 0~7 flounders infected with $1.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Drug sensitivity of E tarda KBF-1 strain was resistant to AM, CF and N, and intermediate to E, K and S, and sensitivity to C, G, SxT and FF. But E tarda KMF-1 strain was resistant to CF, E and V, and intermediate to AM, C, N and SxT, and sensitivity to GM and FF.
In this study aiming at the cultured olive flounders in Jeju island of Korea, has performed a total of 216 cases of pathogen tests for the olive flounders which seemingly had the symptom of emaciation in 24 farms on the suspicion of its occurrence from June 2010 to December 2013 and intended to get the basic information about the pathogen. According to the survey results of the emaciation infection status of 24 farms in Jeju over the period of this survey, it was confirmed that 18 (75%) of 24 farms in Jeju are positive in the emaciation infection. Among them, as for the rate of infection per year, it was observed that they are 38% in 2010, 48% in 2011, 50% in 2012 and 60% in 2013, and over the period of this survey the infection rate in accordance with the temperature of water has observed a variety of incidence rates from the summer to the winter season. In addition, according to the results of emaciation infection status for each size, the equivalent showed a detection rate, 54% in 11-20 cm, 43.9% in 21-30 cm and 25.4% in over 31 cm. This result accounts for an important portion among the diseases of farmed olive flounders in Jeju, is considered to be one of the diseases which cause troubles in the farms for olive flounders on land and it is thought that it can be utilized as basic data in order to estimate emaciation which may occur in the similar size of the cultured olive flounders in Jeju island.
Despite its economic importance, olive flounder Paralichthys olivaceus aquaculture industry is facing a crisis with a continuous production decline. There have been many solutions to overcome the complicate predicament proposed. Increasing genetic diversity and discovering new commercial value through selective breeding are among them. The aims of the present study are to increase the selection power of the golden flounders. We examined the genetic diversity of the breeder population of golden flounders and developed selective markers for the golden flounder population. The 6 microsatellite (MS) markers were selected from melanogenesis-related genes, which are believed to be involved in the pigmentation of fish. All markers were polymorphic (except PO4) and 5 of them had PIC value of 0.6 or above. All makers had distinctive alleles indicating either normal or golden individuals. For examples, from PO4 marker, the frequency of an allele (316) in the golden population was 100% and in normal population was 0% (P<0.001). Although some more studies with more samples at the later generations should be performed to confirm this result, the 316 allele from PO4 marker could be a distinctive tool for decision of the colors in olive flounders at an early stage of the life cycle.
1989년부터 1993년 12월까지 우리나라의 전 연안에서 채집된 가자미아목 Pleuronectoidei 어류표본에 대하여 분류학적으로 재검토하였다. 한국산 가자미아목의 어류를 풀넙치과 Citharidae, 넙치과 Paralichthyidae, 둥글넙치과 Bothidae 및 가자미과 Pleuronectidae의 4과로 구분하고 여기에 26속 34종으로 분류하여 검색표를 제시하였다. 본 조사기간 채집된 가자미아목 어류 20속 26종의 표본은 재기재하였고, 미세분포지를 기록하였으며, 동종이명에 대하여 검토정리하였다. 본 조사에서 넙치과 Paralichthyidae의 왜넙치 Tarphops oligolepis (Bleeker), 둥글넙치과 Bothidae의 긴가자미 Parabothus kiensis (Tanaka)와 가자미과 Pleuronectidae의 뿔가자미 Pleuronectes pallasii Steindachner의 3종은 한국 미기록종이다. 대부분의 넙치과와 둥글넙치과 어류는 서, 남해안에 주로 분포하였고 문치가자미 Limanda yokohamae, 물가자미 Eopsetta grigorjewi와 도다리 Pleuronichthys cornutus를 제외한 가자미과 어류는 대부분 동해안에서 출현하였다. 가자미아목 어류의 대부분은 중국과 일본에 서식하는 어류와 공통적으로 분포하고 있으나 한국 고유종은 없었다.
This experiment was done to observe the pathological findings of lymphocystis naturally occurred in the cultured flounders in the southern sea of Korea. Anatomical sign of lymphocystis was characterized by the presence of wart-like nodules on the fins, body surface and mouth. Dense clustering of hypertrophic cells originated from fibroblasts was observed in the lesions. Infected hypertrophic cells had a thick hyaline capsule, large vesiculated nucleus with irregular rims and large nucleolus, and large ribbon-shaped basophilic inclusions at the peripheral zone of the cytoplasm. Hexagonal virus particles with the two layers of capsid were scattered throughout the cytoplasm and were absent from the inclusions.
해양오염의 진단을 위한 생화학적 오염지표 설정의 기초연구의 일환으로서, 오염이 심각한 서해 (또는 황해)산 넙치(Paralichthys olivaceus)에 이어 서해산 도다리 (Pleuronichthys cornutus)의 혈액 및 뇌중의 활성산소종 및 그들의 제거효소의 활성을 동해안의 포항의 자연산 도다리를 대조군으로 하여 분석 평가하였다. 이들 넙치의 혈청중의 단백질의 함량은 해역이나 서식환경에 따라 뚜렷한 차이를 발견할 수 없었지만, 서해안 자연산 도다리의 뇌 및 근육중의 단백질의 함량은 동해안의 포항산 도다리 대비 뇌는 $15\~45\%$, 근육은 $35\~45\%$나 현저히 감소되고 있었다. 서해안의 자연산 도다리의 혈청중의 과산화지질 (MDA)의 함량은 포항의 자연산 도다리의 대조군 대비 $30\~70\%$나 현저히 높았다. 서해안의 자연산 도다리의 혈청중의 히드록시 라디칼의 생성이 동해안 포항의 자연산 도다리의 혈청중의 히드록시 라디칼의 생성 대비 $15\~90\%$ 정도나 유의적으로 높았다. 서해안의 자연산 도다리의 혈청중의 SOD의 활성은 동해안 포항의 자연산 도다리의 혈청중의 SOD의 활성 대비 $20\~40\%$나 SOD의 활성이 유의적으로 낮았을뿐만 아니라 서해안의 자연산 도다리의 뇌중의 GSHPx의 활성도 동해안 포항의 자연산 도다리의 뇌중의 GSHPx의 활성 $10\~60\%$정도나 유의적으로 낮았다. 이러한 사실도 도다리의 SOD의 활성과 마찬가지로 해양오염에 의해 활성산소의 제거효소로서 생체의 방어효소가 그 만큼 활성이 저하되고 있다는 사실을 입증하고 있다. 이상의 실험결과에서 볼 때 뇌나 근육중의 단백질 함량의 감소, 혈청중의 SOD 및 뇌중의 GSHPx 활성의 저하, 그리고 혈청중의 과산화지질의 함량이 서해안의 도다리가 동해안의 대조군 대비 유의적인 변화를 나타낸다는 사실은 생화학적 오염지표로서의 가능성을 검토할 가치가 있다고 판단된다.
Comet assay is a potential monitoring tool because DNA strand breakage may be produced by a wide range of agents. The comet assay, also called the single-cell gell electrophoresis (SCGE) assay, is rapid and sensitive method for the detection of DNA damage in cells. This study was performed for the identification of DNA damage in the cells from flounders and clams exposed to PAHs. As a control experiments, flounder and clam cells were exposed to $H_2O$$_2$. The cells exposed to $H_2O$$_2$ were displayed a typical nuclei movement DNA damage of cells were significantly increased when the isolated cells from the blood of flounders and the tissue of clams were in vitro exposed to the different concentrations (5, 10, 50, 100 ppb) of five kinds of PAHs (benzo[a]pyrene, pyrene, fluoranthene, anthrancene, and phenanthrene). For the in vivo test, flounders and clams were exposed to the different concentrations of BaP for 4 days. The results showed that DNA strand breakage was effected by the concentration of BaP and the duration of exposure. In high concentration of BaP, the mean tail lengths of nuclei was longer than it In low concentration, while the mean size of head DNA decreased. In this research, both in vitro and in vivo genotoxicity of PAHs could be biomonitored by the comet assay. Especially, clams and flounders seem to be useful as materials for monitoring genotoxic damage by comet assay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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