Joh, Seong Joon;Kweon, Chang Hee;Kim, Min Jeong;Kang, Min Su;Jang, Hwan;Kwon, Jun Hun
Korean Journal of Veterinary Research
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v.50
no.1
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pp.29-35
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2010
Yersinia (Y.) ruckeri has been recognized as a serious bacterial pathogen to several kinds of fish, including rainbow trout. However, there are no reports about the characteristics and pathogenicity of Y. ruckeri isolated from farm-cultured eels. In this study, we isolated and characterized Y. ruckeri from the farm-cultured eel Anguilla japonica in Korea. We investigated the phenotypic and genotypic characteristics of Y. ruckeri and tested the virulence of Y. ruckeri isolates on experimentally infected eels. Examination of the flagellar morphology of Y. ruckeri by electron microscopy showed peritrichous flagella in its cell body. Biochemical reaction studies showed overall identical profiles between the isolates and the reference strain of Y. ruckeri in API 20E and API ZYM tests. We sequenced the 16S rRNA of the Y. ruckeri (1,505 bp) for the genotypic characterization (National Center for Biotechnology Information accession number EU401667). Comparison of the 16S rRNA sequences with previously reported Y. ruckeri strains revealed similar phylogenetic relationships. In the virulence assay of the Y. ruckeri on eels, the eels exhibited listlessness, but Y. ruckeri was reisolated from those of the gills and kidneys.
Ultrahistology of spermatogenic cells on spermatogenesis were analyzed from triploid males of the mud loach, Misgurnus mizolepis. All the testis of triploid males were smaller in thickness and shorter in length than those of diploid males, but the testes developmental stages in triploid males were very similar to those of diploid males. And cytological characteristics were also almost identical to each other. Also Sertoli cells with high activity were recognized at intralobuli of the testis in triploid males during the period of spermiogenesis. And then a few matured spermatozoa were observed in testis of triploid, and interstitial cells also appeared high active in interlobuli. But nucleus sizes of spermatogenic cells of triploid male according to developmental stages were larger than those of diploid overall. Especially, spermatozoa of triploid showed abnormal morphology such as two or more tail flagella, significantly larger head sizes, nucleus size, and diameter of axial filaments etc. than those from diploid.
This study investigated the ecology and growth of Monostroma nitidum Wittrock in both its natural habitat and the laboratory. The maximum length, width, and weight of M. nitidum in March were 9.0$\pm$4.7 cm, 9.6$\pm$3.6 cm, and 1.52$\pm$1.13 g, respectively. Yellowish-green or yellowish-brown reproductive thalli began to appear in January, and over 80% of the thalli matured by March. The male and female spores were ca. 6 $\mu$m long, and elongate and ovoid in shape. The spores had two flagella and one-eye spot, and tended to swim toward light. Maximum number of spores released from matured thalli was 236 cells/mL after 70 minutes at a light intensity of 100 $\mu$mol/m$^2$/s. The zygote diameter ranged from 3.4-6.0 $\mu$m (mean 4.2 $$m) and increased to 69.8 $\mu$m 14 weeks after culture. The mass release of zoospores was observed from thalli in the dark (3 to 12 days), after 30 min under dry conditions in the shade, at 25$^{\circ}C$, and a light intensity of 100 $\mu$mol/m$^2$/s. The maximum number of zoospores released was 109.8 cells/mL after 60 min of induction. M. nitidum fronds on the net increased to 6.8-7.2 cm in length, and 6.6-8.9 cm in width during the winter.
Cryptomonads are unicellular, biflagellate algae. Generally, cryptomonad cells cannot be preserved well because of their fragile nature, and an improved methodology should be developed to identify cryptomonads from natural habitats. In this study, we tried using several cytological fixatives, including glutaraldehyde, formaldehyde, and their combinations to preserve field samples collected from various waters, and the currently used fixative, Lugol's solution was tested for comparison. Results showed that among the fixatives tested, glutaraldehyde preserved the samples best, and the optimal concentration of glutaraldehyde was 2%. The cell morphology was well preserved by glutaraldehyde. Cells kept their original color, volume, and shape, and important taxonomic features such as furrow/gullet complex, ejectosomes, as well as flagella could be observed clearly, whereas these organelles frequently disappeared in Lugol's solution preserved samples. The osmotic adjustments and buffers tested could not preserve cell density significantly higher. Statistical calculation showed the cell density in the samples preserved by 2% glutaraldehyde remained stable after 43 days of the fixation procedure. In addition, DNA was extracted from glutaraldehyde preserved samples by grinding with liquid nitrogen and the 18S rDNA sequence was amplified by PCR. The sequence was virtually identical to the reference sequence, and phylogenetic analyses showed very close relationship between it and sequences from the same organism. To sum up, the present study demonstrated that 2% unbuffered glutaraldehyde, without osmotic adjustments, can preserve cryptomonads cells for identification, in terms of both light microscopy and phylogenetic analyses based on DNA sequences.
The attractant (orange light) or repellent (white light) signal is transmitted from SRI (Sensory Rhodopsin I) via protein-protein interaction with its transducer Htrl (Halobacterial Transducer for Sensory Rhodopsin I) which in turn controls a cytoplasmic phospho-transfer pathway that modulates flagella motor switching in Halobacterium salinarum. Some mutations in both SRI and Htrl showed an unusual mutant phenotype called inverted signaling, in which the cell produces a repellent response to normally attractant light. Twelve mutations at the Glutamate 56 (E56) position in the second transmembrane helix of Htrl were introduced by site-specific random mutagenesis. Almost all E56 mutants showed orange-light inverted responses in pH and temperature-dependent manners except E56D and E56Y. Except for these two mutants, all mutants accelerated the $S_{373}$ decay compared to wild-type at $18^{\circ}C$. This supported that there is an interaction between SRI and the second transmembrane of Htrl. Also a structural model of Htrl based on the Tar crystal structure and the secondary structure prediction program proposed the E56 residue to be in the middle of the proton channel. The most important observation is that the E56 mutant provides the evidence that this residue is very sensitive for signal relay, which can be explained by the open and closed conformations of the channel (A and R conformations) in SRI, as was postulated by the unified conformational shuttling model for transport and signaling.
The Urechis unicinctus sperm and spermatogenic cells prepared from the testis are investigated to identify $\alpha-tubulin$ of axoneme microtubules using mouse monoclonal $anti-\alpha-tubulin$ as the first Ab and Gold(10nm) conjugated goat anti-mouse IgG as the Ab marker. The Ag-Ab reaction analyzed excellently the localization of $\alpha-tubulin$ and the gold particles incorporated with the proximal and distal centrioles, manchette microtubules, and flagellum. The gold particles can be also observed in the spermatogenic cells while the cells are still in sperm ball which is composed of a somatic cell and spermatogenic cells. The sperm ball is the functional unit of sperm production in U unicinctus testis. The spermatids are developed from the spermatogenic cells in the sperm ball and released into the testis cavity through a cortical cytoplasmic opening. The spermatid architectures are similar with the mature sperm of the testis cavity in aspects of shape of discoid acrosome, degree of nuclear condensation and ring type of mitochondrion. However, the distal centriole connecting with the flagella can be observed from the mature sperm while the both proximal and distal centrioles reveal only in the spermatids. The proximal centriole is directly connected with nuclear outer membrane during the stage of nuclear condensation and oriented perpendicularly to the distal centriole whose axis coinciding with the longitudinal axis of the spermatozoon. There are indications that the distal centriole is intimately associated with the polymerization of the flagellum. The manchette microtubules appear during spermatid development but the mature sperm have round head and no conspicuous middle piece.
A bacterial strain named HY-3 that produces a highly active extracellular protease was isolated from the digestive tract of a spider, Nephila clavata. The bacterium was a Gram-negative, oxidase-negative, catalase-positive, nonhalophilic, nitrate-reducing, facultative anaerobe. Transmission and scanning electron microscopies demonstrated that the isolate was non-spare-forming, straight, rod-shaped, and motile by peritrichous flagella. The G+C content of the DNA was 57.0 mol%. The isoprenoid quinone type was ubiquinone with 8 isoprene units (Q-8). The morphological and biochemical characteristics including the predominant fatty acid and phospholipids profiles placed the isolate HY-3 in the family Enterobacteriaceae. Further biochemical characterization and phylogenetic studies including determination of an almost complete 16S ribosomal DNA sequence suggested that the bacterium was closely related to the genus Serratia. DNA-DNA hybridization analysis revealed that this extracellular protease-producing strain belongs to Serratia proteamaculans, which is also known far its association with insects.
A slimy non-spore-forming bacterium strain SAF-C isolated from bean stem and root was motile with flagella and identified to one of Agrobacterium radiobacter. Studies were made on the conditions necessary for maximal production of this acidic succinoglucan polysaccharide by this strain in shaken culture. Much production was observed with yeast extract,$(NH_4)_2\;HPO_4$, distillers' dried solubles(D.D.S.), as nitrogen source in the medium composed of 4% glucose, 0.5% nitrogen source, 0.3% $CaCO_3$. The yield was greatest with yeast extract and decreased in order with the above nitrogen source from 22.9% to 9.6 percent. A polysaccharide was produced in a yield of about 25% in a medium composed of 3% glucose, 0.4% D.D.S., 0.5% $K_2\;HPO_4$, 0.01% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.8
no.1
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pp.27-32
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1973
Listeria monocytogenes human infection is a relatively rare disease which usually is meningitis in newborn babies. The organism was isolated from blood cultures of a 52 year old female patient with meningitis. It was considered that the underlying disease, i.e. S.L.E., and the steroid therapy which the patient had been receiving played some role for the Listeria infection. The isolate was showing characteristics of L. monocytogenes, i.e. diphtheroid like morphology, motility with four peritrichous flagella, hemolytic small colonies on blood agar, growth in the presence of 7.5% salt and at 4 C, and inducing monocytosis in an experimentally infected rabbit. Serologically the organism was identified as L. monocytogenes 4b. The isolate was showing susceptibility to many antibiotics tested including ampicillin, penicillin and tetracycline which were the recommended drugs of choice for the treatment of Listeriosis. It is the general opinion that Listeriosis is not so rare as literatures are showing. It is considered that some of the isolate of the organism from clinical specimens are mistakenly discarded due to the fact that the organism shows diphtheroid like morphology and that not many laboratories are able to recognize the organism. Literatures are seen which emphasize more careful examination of gram positive bacilli with diphtheroid like morphology especially when they are isolated from blood or from spinal fluid of patient.
Plesiomonas shigelloides, a member of the family Vibrionaceae, is a gram-negative, rod-shaped, facultative anaerobic bacterium with flagella. P. shigelloides has been isolated from such sources as freshwater, surface water, and many wild and domestic animals. P. shigelloides contains 102 O-antigens and 51 H-antigens. The diversity of O-antigen gene clusters is relatively poorly understood. In addition to O1 and O17 reported by other laboratories, and the 12 O serogroups (O2, O10, O12, O23, O25, O26, O32, O33, O34, O66, O75, and O76) reported previously by us, in the present study, nine new P. shigelloides serogroups (O8, O17, O18, O37, O38, O39, O44, O45, and O61) were sequenced and annotated. The genes for the O-antigens of these nine groups are clustered together in the chromosome between rep and aqpZ. Only O38 possesses the wzm and wzt genes for the synthesis and translocation of O-antigens via the ATP-binding cassette (ABC) transporter pathway; the other eight use the Wzx/Wzy pathway. Phylogenetic analysis using wzx and wzy showed that both genes are diversified. Among the nine new P. shigelloides serogroups, eight use wzx/wzy genes as targets. In addition, we developed an O-antigen-specific PCR assay to detect these nine distinct serogroups with no cross reactions among them.
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