Predetermination of sex in mammalian species has many aspects of application including the prenatal diagnoses of genetic disorders in humans and sex-selected breeding programs in the animal industry. Embryos sexing can be carried out using the polymerase chain reaction (PCR) to amplify specific sequences present in the sex chromosomes, or by fluorescent in situ hybridization (FISH) of specific probes to the X and Y chromosomes. A 3.3 kb porcine male-specific DNA fragment (pEM39) was cloned previously in our laboratory. In this study, FISH and PCR methods were employed to examine if the pEM39 can be used a sex-specific DNA probes Porcine ovaries were obtained from a local slaughter house and oocytes collected. All oocytes were subjected to in vitro maturation followed by 1n vitro fertilization. Parthenogenetically activated embryos were served as a negative control. Embryonic samples were collected at the 2-cell stages and PCR was performed to analyze DNA. Among 10 embryos examined, four embryos were identified as males and six were females. The cloned male-specific DNA fragment showed male-specificity for the cells in the liver tissue and the porcine early embryos by FISH. It was also demonstrated that the cloned male-specific DNA is localized on the hetero chromatic region of the long arm in the Y chrom-osome (Yq) as shown by the FISH and karyotyping. The results suggest that the cloned male-specific DNA fragment may be useful for predetermination of sex with a few embryonic cells. The porcine male-specific sequence can be a reliable index for embryo sexing by PCR.
Park, Jin Woo;Kwon, Joon Yeong;Jin, Ye Hwa;Oh, Sung-Yong
Ocean and Polar Research
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v.38
no.1
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pp.81-88
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2016
In many fish species, including Nile tilapia (Oreochromis niloticus), gonadal development occurs at the expense of stored energy and nutrients. Therefore, reproductive systems are inhibited by limited food supply. It has been well established that reproductive function is highly sensitive to both metabolic status and energy balance. Nothing is known about the possible mediated connection between energy balance and reproduction. Kisspeptin, a neuropeptide product of the Kiss gene has emerged as an essential gatekeeper of reproduction and may be possibly be linked to energy balance and reproduction in non-mammalians. Thus, in this study, the effect of fasting (10 days) on the expression of kisspeptin and the gonadotropin-releasing hormone (GnRH) gene were assessed in Nile tilapia (male and female) using qRT-PCR. In addition, plasma levels of estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$) and 11-ketotestosterone (11-KT) in adult tilapia were measured by ELISA. In male tilapia, fasting reduced Kiss2 and GnRH I mRNA expression in the brain and 11-KT level in comparison with the fed tilapia (p < 0.05). In females, however, there were no significant differences in GnRH I mRNA expression and $E_2$ between fish subjected to fasting and those fed (p > 0.05). These data indicate the impact of nutritional states on kisspeptin as a potential regulatory mechanism for the control of reproduction in male Nile tilapia.
Hematological analysis can provide crucial information for monitoring the health of fish. However, there is no current information available regarding hematological changes in olive flounder following infection by Vibrio scophthalmi. In this study, hematological and biochemical alterations were determined in olive flounder infected by the high virulence strain (HVS) and low virulence strain (LVS) of V. scophthalmi. Survival in serum, skin mucus, and macrophages of olive flounder was also compared between the HVS and LVS. The results demonstrated that the hematocrit value in infected fish declined from 23.4% at 0 h to 18.0% at 168 h post infection. The total protein concentration in fish infected with the HVS was significantly higher than in fish infected with the LVS and a non-infected control. Lysozyme activity was significantly different between infected and control fish. The HVS survived in serum and cell numbers increased substantially, while cell numbers of the LVS in serum decreased. These changes in hematological characteristics in fish infected by V. scophthalmi can be used as an effective and sensitive index to monitor the physiological and pathological conditions of fish. The survival and reproduction of V. scophthalmi in host serum, skin mucus, and macrophages play a major role in systemic infection and can serve as a virulence indicator for different strains.
Sexing from bovine embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of the sex-controlled cattle production. This study was carried out to investigate the possibility of determining of embryo sex by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe which constructed from the btDYZ-1 sequences. To evaluate Y-chromosome specificity of the FISH probe, metaphase spreads of whole embryos and lymphocytes were prepared and tested. A male-specific signal was detected on 100% of Y chromosome bearing metaphase specimens. Using the FISH technique with a bovine Y-specific probe, 232 whole embryos of 8 cell- to blastocyst-stage were analyzed. Observing the presence of the Y-probe signal on blastomeres, 102 embryos were predicted as male, and 130 embryos as female. The determining rate of embryo sex by FISH technique was about 93% regardless of embryonic stages. In conclusion, the FISH using a bovine Y-specific DNA probe is an accurate, reliable and quick method for determining the sex of bovine embryos.
Kim, Kyung-Hee;Lee, Sanghyun;Park, Jong-Won;Jung, Hyo Sun;Kim, Julan;Yang, Hyerim;Lee, Jeong-Ho;Lee, Dain
Development and Reproduction
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v.25
no.4
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pp.235-244
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2021
Interferon Regulatory Factor 3 (IRF3) is a member of interferon-regulated transcription factor family and is known to play an important role in the innate immune response against viral infections. In this study, the expression of IRF3 in different tissues, developmental stages, and stocking densities of olive flounder was investigated. The expression of IRF3 was observed to gradually increase in early-stage juvenile fish. The highest expression was observed in later-stage juvenile fish when immune tissues were formed. High IRF3 expression was observed in the muscles and the brain tissues. The expression of IRF3 was observed in fish at different stocking densities after viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) infection. It yielded an interesting expression pattern in the muscles and the brain tissues of fish stocked at low density. These observations can be used as basic data for the study of the expression of immune response-related genes against viruses based on stocking density and immune systems in other fish species.
Six demographic parameters including life span (LS), maturation time (MT), net reproduction rate (Ro), mean generation length (G), innate capacity for increase $(r_m)$ and finite rate of increase $(\gamma)$ were estimated in the rotifer (Brachionus rotundiformis) cultured at three salinities of 5, 20 and 34 PSU and under a constant temperature of $28^{\circ}C$. The maximum life spans at salinities of 5, 20 and 34 PSU were 17, 12 and 13 days, respectively. The shortest maturation time (24 hr) was recorded at 5 PSU, and the rotifer at 20 PSU showed a most delayed maturation (192 hr). The maximum reproduction rate was 42 offspring per female in rotifer cultured at 5 PSU, while the longest generation length (8 days) was observed at 20 PSU. Maximum and minimum values of $r_m$ (1.56 and 0.46 individual per day) and $(\gamma)$ (6.67 and 1.70 individuals per day) were calculated at 5 and 34 PSU, respectively. Salinity also showed strong effect on correlation of the demographic traits examined. ANOVA revealed significant differences (P<0.05) between demographic parameters of the rotifer at the three salinity condition. Considering the higher values of life span, innate capacity and finite rate of increase, and shortest maturation time at 5 PSU, the rotifer we examined had a higher reproductive potential and longer life span at 5 PSU rather than at 20 or 34 PSU.
Kim, Ji Eun;Kim, Hyung Bae;Lee, Young Don;Baek, Hea Ja
Development and Reproduction
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v.21
no.4
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pp.391-397
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2017
Skeletal deformities are significant problems that affect the growth and commercial value of fish reared in hatcheries. However, studies of bone metabolic process related to skeletal deformities are limited. We investigated the potential correlation between bone deformities and plasma calcium, phosphorus, and estradiol-$17{\beta}$ levels in reared red spotted grouper (Epinephelus akaara) juveniles. We collected E. akaara frys from private farms at 110, 140, 180 and 300 days after hatching (DAH), and classified the normal and deformed fish by observing their external shape and inner frame by soft X-ray. We also analyzed the calcium, phosphorous, and estradiol-$17{\beta}$ levels in their plasma. A comparison between normal and deformed fish, indicated that calcium and estradiol-$17{\beta}$ levels were higher in deformed fish than in the normal at 180 and 300 DAH. The level of phosphorus was also higher in deformed individuals than in normal fish, but only at 300 DAH. These results suggest that skeletal deformities are associated with increases in plasma calcium, phosphorus, and estradiol-$17{\beta}$ levels.
The disease-causing koi herpes virus (KHV), also known as cyprinid herpesvirus-3 (CyHV3), causes mass mortality of koi and carp. Koi (Cyprinus carpio) is a host for KHV, one of 12 virus species in the Alloherpesviridae family. We examined the effects of KHV disease koi (KK), and on koi×red common carp (KR) and red common carp×koi (RK) cross, using a virus challenge test. The infected fish had clinical signs that included gill necrosis and skin lesions. The RK and KR were highly more resistant (cumulative mortality: RK; 6% and KR; 8%) to KHV infection than KK fish (cumulative mortality: 28%). KHV DNA was confirmed in the tissues of all dead fish in groups by use of polymerase chain reaction (PCR), and the presence of the KHV protein in kidney was confirmed by immunohistochemistry. Histological analysis showed severe gill lesions and fusion of the lamellae in KK fish, but less severe damage in RK fish. In immunohistochemistry analysis, the KHV protein localized in the cytoplasm of infected kidney cells of KK, but the cross groups had lower levels of KHV antigen. Our data indicate that the cross groups had increased resistance to KHV disease.
The suitability of any fish species for successful aquaculture requires basic information on its reproduction and growth. This study investigated some facets of the reproductive biology of Synodontis shall (Mochokidae) from River Siluko in Nigeria. Fish samples were collected forth-nightly for a duration of fourteen (14) months-March 2015 to April, 2016 with the assistance of artisanal fishermen. Fishes were identified using taxonomic guides and standard techniques were used for determination of sex ratio, gonad maturation and fecundity. Linear regression method was used to define the correlation between fecundity and fish length, body weight and ovary weight. Results showed that sex ratio did not indicate a significant divergence (p > 0.05) from the 1 male to 1 female distribution ratio (1:1.41). Gonad morphology revealed paired gonads. Testes and ovaries were classified into four maturity stages: immature, resting, ripening and ripe. Gonadosomatic index ranged from 0.04 to 5.68 (males) and 0.03 to 20.19 (females). Absolute fecundity ranged from 1,014 to 4,520 eggs (mean = 2,592 eggs) and did not correlate significantly (p > 0.05) to ovary weight. This study has contributed to existing data on the biology of freshwater fish species in Nigeria and provided valuable information for fishery management tools in the conservation and utilization of this valuable freshwater fish species.
Marie Anne Galvez Escudero;Anthony Jesus Mendoza De La Vega
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.2
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pp.57-65
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2024
Paiche (Arapaima gigas), is a colossal freshwater fish native to the Amazon basin. Its geographic distribution spans various regions, including Brazil, Peru, Colombia, and Guyana, making it a significant component of the aquatic ecosystems in this area. Beyond its ecological role, the paiche holds substantial importance as a valuable fish resource for local communities, providing sustenance and economic opportunities. This review provides a comprehensive analysis of the reproductive aspects of the paiche, based on information published from January 2000 to January 2022. It encompasses a wide range of reproductive characteristics, including sexual differentiation, age at first maturity, and identification techniques. Additionally, it offers an evaluation of various mating behaviors, highlighting their respective advantages and disadvantages. The review also explores genetic and behavioral traits observed in both wild and captive specimens, offering valuable insights for the effective management of breeding programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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