Aeromonas hydrophila is a pathogen to fish as well as human. It is a food-borne disease, and causes severe mortality in fish, and sometimes severe septicemia in human. In this study, a rapid detection method using latex agglutination has been developed for A. hydrophila. Polyclonal antibodies were raised against membrane and whole cells of three isolates from rainbow trout. Among these, latex particles coated with antibodies raised against whole cells of isolate No. 2 showed the best sensitivity. With latex particles coated with this antibody, we could detect $5{\times}10^4$ CFU of A. hydrophila in 5 min. The cross-reactivity with bacteria constituting the normal intestinal microflora and other pathogens for rainbow trout was insignificant. This latex agglutination assay method produced positive reaction with all clinical isolates of A. hydrophila which were identified by species-specific PCR for 16S rRNA in A. hydrophila.
In biofloc culture for olive flounder, Paralichthys olivaceus, the possibility of antibiotics treatment was investigated against edwardsiellosis. After inducing edwardsiellosis by immersion in Edwardsiella tarda 1.2 × 105/mL suspension, the survival trends on various biofloc water management and some physiological changes were observed. For biofloc water management, six types of water treatments were carried out, which were no exchange without antibiotics as negative control, the exchange to stored biofloc water, the exchange to stored biofloc water with 20% flow-through, the exchange to fresh biofloc water, half fresh biofloc water and half sea water, and the complete flow-through. There was no significant physicochemical change on water qualities in any type. The exchange to fresh biofloc water was shown the highest survival ratio as 72.3%, and in case of stored biofloc water with 20% flow-through, the survival ratio was also significantly high as 62%. Plasma glucose, cholesterol, total protein, calcium, and magnesium were analyzed as physiological index. Mostly, there was no significant change, but plasma cholesterol showed an initial decrease in low survival group, and an initial increase with high survival group. Consequently, antibiotic treatment against a bacterial disease during biofloc culture is possible as long as the biofloc water management follow along properly.
Thurner, Kensey;Goforth, Reuben R.;Chen, Shuai;Amberg, Jon;Leis, Eric;Kinsella, John M.;Mahapatra, Cecon;Sepulveda, Maria S.
Journal of fish pathology
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v.30
no.2
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pp.135-148
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2017
Pathogen introductions associated with aquatic invasive species threaten ecosystems and biodiversity worldwide. Bigheaded carps (BHC), including Silver Carp Hypophthalmichthys molitrix, Bighead Carp H. nobilis, and their hybrids, are prolific, invasive pests in central US rivers. However, little is known about pathogen effects on invading BHC or how BHC affect the disease risk profile for native fishes in receiving ecosystems. We therefore conducted, from May 2013-December 2014, a systematic pathogen survey for BHC and native fishes in the Wabash River watershed, Indiana, USA. We found Pseudomonas fluorescens, P. putida, and Salmonella enterica DNA in BHC as well as native fishes, although none of these bacteria were exclusively present in BHC. DNA from other bacterial taxa was detected only in native fishes and Common Carp Cyprinus carpio. No gastrointestinal helminths were detected in BHC, although they were common in most native fishes examined. We also conducted in vitro studies on BHC tissues (skin, gill, fin, and fry) and found high sensitivity to Largemouth Bass virus, viral hemorrhagic septicemia virus, and infectious pancreatic necrosis virus. We conclude that BHC are not heavily burdened by bacteria, viruses and parasites in the invaded study ecosystems, although they do harbor native bacteria and show potential for high sensitivity to endemic viruses.
Kim, Si-Woo;Kim, Jong-Oh;Kim, Wi-Sik;Kim, Do-Hyung;Oh, Myung-Joo
Journal of fish pathology
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v.27
no.2
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pp.133-137
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2014
We examined the cause of a disease outbreak in rainbow trout Oncorhynchus mykiss, which were adapting to a seawater in an aquaculture farm in Jeju on April, 2013. Most of the diseased fish showed a severe ulcer on the skin, enlarged spleen, expanded stomach and hemorrhage of abdominal and pyloric region. Although no parasites, fungi or viruses were isolated from diseased fish, over 200 same bacterial colonies were isolated from liver, spleen and kidney. Nucleotide sequences of the 16S rDNA gene of the bacterium in this study showed 100% identity with Vibrio anguillarum. This study is the first report of V. anguillarum infection in rainbow trout during sea adaption in Korea.
Vibrio spp. and Streptococcus spp. have caused a considerable disease of farmed fish and economic loss in fish farming and seafood industry. In this study, the efficacy of an aquatic disinfectant tablet composed to calcium hypochlorite was evaluated against V. anguillarum and S. iniae. A bactericidal efficacy test by broth dilution method was used to determine the lowest effective dilution of the disinfectant following exposure to test bacteria for 30 min at $4^{\circ}C$. An aquatic disinfectant tablet and test bacteria were diluted with distilled water (DW), hard water (HW) or organic matter suspension (OM) according to treatment condition. V. anguillarum on the DW, HW and OM condition was completely inactivated with 16,000 15,000 and 13,000 fold dilutions of the disinfectant, respectively. On the DW, HW and OM condition, S. iniae was absolutely inactivated with 17,000 16,000 and 14,000 fold dilutions of the disinfectant, respectively. As an aquatic disinfectant tablet possesses bactericidal efficacy against fish pathogenic bacteria such as V. anguillarum and S. iniae this disinfectant solution can be used to control the spread of fish infective bacterial diseases.
Korni, Fatma M.M.;Sleim, Al Shimaa A.;Abdellatief, Jehan I.;Abd-elaziz, Rehab A.
Journal of fish pathology
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v.34
no.2
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pp.185-199
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2021
Vibriosis is an important septicemic bacterial disease that affects a variety of commercial fish species, including cultured Dicentrarchus labrax. Nanotechnology has become an important modern tool for fish diseases prevention. Furthermore, nanomaterials have the ability to prevent and treat fish diseases. The current study was aimed to identify the causative agent of massive mortality of D. labrax commercial farm in Alexandria, Egypt. Experimental infection and the median lethal dose (LD50) of pathogenic isolate were assessed. Also, the effect of ginger nanoparticles (GNPs) and Sacchromyces cerevisiae as feed additives for prevention of vibriosis in D. labrax was carried out. Similarly, the tissue immunstimulant genes, IL-1β and TLR2 were measured in the spleen of feeding groups. The clinical signs of naturally diseased D. labrax showed corneal opacity and paleness of gills with excessive mucous secretion. The post-mortem abnormalities were severe hemorrhage and adhesion of internal organs. After bacteriological isolation and identification, the causative agent of mortality in the current study was Vibrio alginolyticus. The LD50 of V. alginolyticus was 1.5×105.4 CFU/ml. The experimentally infected D. labrax showed ulceration, exophthalmia and skin hemorrhages. The post-mortem findings of the experimentally infected D. labrax revealed internal hemorrhage, spleen darkness and paleness of liver. There is no mortality and 100% RPS in groups fed GNPs then injected with V. alginolyticus, in those fed a combination of GNPs and S. cerevisiae and a group fed normal diet then injected with physiological saline (control negative), respectively. Contrarily, there was 10% mortality and 87.5 RPS in the group fed S. cerevisae then injected with V. alginolyticus. On the other hand, the control positive group showed 79% mortality. The spleen IL-1β and TLR2 immunostimulant genes were significantly increased in groups of fish fed GNNP, S. cerevisiae and a combination of GNPs and S. cerevisiae, respectively compared to control group. The highest stimulation of those immunostimulant genes was found in the group fed a combination of GNPs and S. cerevisiae, while fish fed S. cerevisiae had the lowest level. Dietary combination of GNPs and S. cerevisiae was shown to be efficient in preventing of vibriosis, with greatest stimulation of spleen IL-1β and TLR2 immunostimulant genes.
Jee, Bo Young;Shin, Ki Won;Lee, Dae Wook;Kim, Young Jae;Lee, Mu Kun
Journal of fish pathology
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v.27
no.1
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pp.77-83
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2014
The monitoring was performed to survey the mortalities and medications occurred in the inland aquaculture farms of olive flounder in South Korea from May to October, 2012. Both of the indirect inquiry for entire inland farms and the sample survey for selected farms were carried out. The aquatic organism disease inspectors, who have the national licenses for the diagnosis and prevention of aquatic organism diseases and have close relationship with the farms, investigated the rates and causes of mortalities according to the standard manual. The cumulative mortalities rate by the indirect inquiry on 565 farms, was calculated to 27.18%, and the mortalities rate by infectious diseases was 22.64%. Otherwise, the mortalities rate by sample survey on 60 farms was 25.50%, 19.33% of them were caused by infectious diseases. The high mortality rates were recorded by scuticociliatosis, non-infectious loss, streptococcosis, VHS, artificial eliminations, vibriosis and gliding bacterial disease. Streptococcosis and non-infectious mortality caused to serious loss in productivity and economy of the farms, because of their outbreaks in the flounder groups over 600 g. The monitoring of medications in the selected farms revealed that formalin for the treatment of external parasites, such as scuticociliates, was the most commonly used drugs in the farms. As the antibiotic medications, amoxicillin and florfenicol for streptococcosis, and oxytetracycline and neomycin expecting wide antibacterial spectrum, were frequently prescribed.
This is a comprehensive study for considering the effective treatment and control program of bacterial disease occurring in common carp, israel carp, color carp, crucian carp, eel and tilapia by clarifying the causes, mechanism of infection and onset and the diagnostic criteria. As a first step, the authors investigated the external views, gross and histopathologic findings of diseased fish using 450 infected fishes obtained from various farmer of Korea. This infection was characterized by hyperemia, hemorrhage and swelling of body surface and fins, congestion of liver, spleen, kidney, inflammation of intestine, hemorrhagic inflammation of various tissues, and necrosis and ulcer of various tissues were accompanied in serious cases. Bacteriologically, Aeromonas hydrophila and Edwardsiella tarda were isoiated from these fishes. Particularly in the regular check on 222 eels, 177 strains were isolated as 29.94% of Aeromonas hydrophila, 48.58% of Edwardsiella tarda and 21.47% of Flexibacter columnaris. Hexibacter columnaris was isolated from corroded gill of eels. The identical disease was occurred by innoculating the isolated Aeromonas hydrophila and Edwardsiella tarda and the identical strains were isolated from infected experimental fishes. The eels which were diagnosed Aeromonas disease from Kwangju, Pusan accompanied hemorrhage, swelling of body surface and fins, inflammation of stomach and intestine containing mucous fluids mixed with the pathogens. Color carp and crucian carp which were innoculated with the isolated 5 strins of Aeromomas hydrorphil died within 3 or 4 days accompanying with the characteristics of Aeromonas disease. Edward disease was characterized by abscesses of body surface, pus formation with concentration on phagocytes. The size of absecsses increased with progression elf disease. There were also various abscesses at internal organ and white nodules appeared in kidney. Histologically, various progressive granuloma were examined without inflammation of intestine. Columnaris disease of eels showed no hemorrhage except slight white body color. In autopsy, most of internal organs appeared normal and there were no septic odors. The only character was corrosion of gills. In order to treat these bacterial diseases, infected fishes must bathe in 20ppm chloramphenicol or kanamycin solution for 1 hour. Besides, medication program in oral ingestion of 75mg/kg chloramphenicol per day continuing for 5 to 7 days. After injecting the formalin treated Aermonas hydrophila antigen into carp, relatively high agglutination titer showed between 3 weeks and 6 weeks. Though this titer decreased from that time, it was continued for 18 weeks. In the case of injecting the formalin treated Edwardsiella tarda antigen into tilapia, the titer also increased. But tilapia which were immersed in the suspension fluid of the formalin treated Edwardsiella tarda showed no increase of the titer.
Bacterial wihte enteritis ocurred by infection of V. ichthyoenteri is a devastating disease in olive flounder (Paralichthys olivaceus) hatcheries in Korea. Since white enteritis has been a problem in aquqtic industries, necessity of a rapid detection method is increased. In an attempt to develop rapid PCR method the detection of V. ichthyoenteri, we examined the 16S-23S rRNA intergenic spacer region(ISR) of V. ichthyoenteri and developed species-specific primer for V. ichthyoenteri. The intergenic spacers were amplified by primers complementary to conserved region of 16S and 23S rRNA genes. The intergenic spacer region between the 16S and 23S rRNA genes of V. ichthoenteri were investigated by PCR fragment length typing and DNA sequencing. Analysis of the ISR sequences showed that V. ichthyoenteri contains one types of polymorphic ISRs. The size of ISRs ranged 348bp length and not contains tRNA genes. Mutiple alignment of representative sequences from different Vibrio species revealed several domains of high sequence variability, and allowed to design species-specific primer for detection of Vibrio ichthyoenteri. PCR. The specific of the primer was examined using genomic DNA prepared from 19 different Vibrio species, isolated 18group Vibrio species. The results showed that the PCR reaction using species-specific primer designed in this study can be used to detect V. ichthyoenteri.
For the treatments and protection of bacterial fish disease, many requirements are needed for aquatic probiotics so that they are effective in aquaculture animals but are also harmless to humans. In the present study, among 17 candidate probiotic bacteria (CPB) obtained from the edible part of the shellfish, Bacillus sp. CPB-St (CPB-St) were selected and in vitro evaluated for the possibility as a probiotic strain for the control of fish streptococcosis which frequently occurs in the olive flounder farms. CPB-St showed inhibitory effects on the growth of various fish pathogenic bacteria, Streptococcus sp., S. parauberis, S. iniae, Lactococcus garvieae and L. piscium by the double layer test ranging about 18~26 mm of clear zone. Inhibitory activity of CPB-St to Streptococcus sp. was observed 6 hours after and the growth of Streptococcus sp. was decreased to 8~55 folds in the co-culture of CPB-St with Streptococcus sp.. The safety of CPB-St to fish and survival of CPB-St in the intestine were assessed in the olive flounder, Paralichthys olivaceus. Fish mortality was not observed in artificial infection with CPB-St for 2 weeks. CPB-St was entirely excreted from the stomach and intestine 24 hours after oral injection. This results indicate that CPB-St has potential applications as a probiotic for the control of fish streptococcosis in aquaculture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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