The selection of ethanol-tolerant strains was applied to enrichment culture of YPD broth medium containing various concentrations of ethanol. Isolates were identified to be Saccharomyces cerevisiae, the others as S. dairensis, S. exiguus, S. telluris, Saccharomycodes ludwigii, Schwanniomyces occidentalis var. occidentalis and Zygosaccharomyces florentinus. Among isolates S. cerevisiae YO-1 was screened as having the highest ethanol tolerance and produced 18% (v/v) ethanol after 4 days fermentation. The change of fatty-acyl residues represents that a progressive decrease in fatty-acyl unsaturation and a proportional increase in saturation in phospholipids of yeast cells during fermentation affected the yeast viability. Supplementation ethanol to the cultures led to an increase of unsaturated fatty-acyl residues, especially $C_{16}$ or $C_{18}$ residues, along with a decrease in the proportion of saturated residues in cellular phospholipids. Increasing the amount of soy flour led to an increase in the maximum number of viable yeast cells and ethanol production. It was possible in 4 days to reach 21% (v/v) ethanol by adding 4% soy flour as source of unsaturated fatty-acyl residues to the fermentation medium. Soy flour not only increased yeast population but also enhanced the physiological properties of yeast cells to be ethanol tolerant in the anaerobic culture.
Hydrogen evolution by mixed fermentation of Clostn"dium butyn"cum and photosynthetic bacteria which were capable of consuming clostridial metabolites and evolving hydrogen was investigated. Acetate and butyrate formed from anaerobic clostridial fermentation were efficiently utilized by Rhodopseudomonas sPhaeroides K-7. For complete bioconversion of clostridial metabolites such as acetate and butyrate into hydrogen, mixed culture of both anaerobic organisms forming molecular hydrogen was performed. By the mixed culture, the yield of hydrogen production increased by 20 to 75% and the levels of clostridial metabolites such as acetate, butyrate decreased in the fermentation broth. Influence of cell mixing ratio. mixing time and inoculum level on hydrogen evolution by mixed culture were examined. And then cometabolic pattern compared with in pure culture was observed as time course.
Kim, Dae-Sik;Choe, Cheol-Ho;Lee, Yeong-Mu;Lee, Ui-Sang
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.237-240
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2000
Organic acids which were produced from biomass wastes streams by cell-recycle fermentation using Propionibacterium acidipropionici ATCC 4965 were extracted by Membrane Contactor using TOA/MIBK system. Maximum productivity was 3.32g organic acid/L/hr at the dilution rate of 0.2/hr in the results of continuous fermentation. The diluted organic acids in the fermenter were selectively separated by Membrane Contactor extraction using 30%(w/w) trioctylamine(TOA) dissolved in methylisobutylketone(MIBK). The flow rate of aqueous phase is 200ml/min and that of extraction phase is 100ml/min. The degree of Acetic acid and Propionic acid extraction from fermentation broth was reached 56.25%, 72.41% respectively.
Semicontinuous alcohol fermentation of Jerusalem Artichoke by K. fragilis CBS 1555 was performed to investigate the effect of the effective dilution rate and influent sugar concentration to the ethanol concentration and alcohol productivity at steady state. When the time interval for the replacement of fresh influent with fermentation broth was less than or equal to 1 hr, the effective dilution rate was found out to be equal to the specific growth rate. Wash out was not occurred until the effective dilution rate, 0.425 hr-1, and the maximum alcohol productivity was around 5.5 g/1·hr. In this case, the effective dilution rate was 0.25 hr-1 and the influent sugar concentration was distributed from 85 g/l to 135 g/1.
Kang, Chang-Ho;Jung, Ho Geon;Koo, Ja-Ryong;So, Jae-Seong
KSBB Journal
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v.30
no.4
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pp.161-165
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2015
Lactic acid and its derivatives are widely used in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries. It is also a major raw material for the production of poly-lactic acid (PLA), a biodegradable and environmentally friendly polymer and a possible alternative to synthetic plastics derived from petroleum. For PLA production by new strains of lactic acid bacteria (LAB), we screened LAB isolates from shellfish. A total of 51 LAB were isolated from 7 types of shellfishes. Lactic acid production of individual isolates was examined using high-performance liquid chromatography using a Chiralpak MA column and an ultraviolet detector. Lactobacillus plantarum T-3 was selected as the most stress-resistant strain, with minimal inhibition concentrations of 1.2 M NaCl, 15% ethanol, and 0.0020% hydrogen peroxide. In a 1 L fermentation experiment, $\small{D}$-lactic acid production of 19.91 g/L fermentation broth was achieved after 9 h cultivation, whereas the maximum production of total lactic acid was 41.37 g/L at 24 h.
In this report, we describe the high-yield secretory expression of the recombinant human anti-HBsAg Fab fragment from Pichia pastoris that was achieved by co-integration of the genes encoding the heavy and light chains (both under the control of alcohol oxidase promoter) into the genome of the yeast cells. The fed-batch fermentations were carried out in a 5 L scale. Both chains of the Fab were successfully expressed upon methanol induction. The absorbance ($OD_{600}$) of the broth can reach 350~500 at the end of fed-batch phase. After the induction, the expression level of the recombinant Fab (soluble) reached 420~458 mg/L. The recombinant Fab fragment was purified from the crude culture supernatant by ion exchange chromatography and the purity of the recombinant Fab fragment was over 95%. The affinity activities of the crude fermentation supernatant and the purified Fab were analyzed by indirect ELISA, which showed that the purified recombinant Fab fragment had high affinity activity with hepatitis B surface antigen.
Kim, Min-Gyun;Lee, Mo-Kwon;Im, Seong-Won;Shin, Sang-Ryong;Kim, Dong-Hoon
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.25
no.4
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pp.41-50
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2017
The design of proper agitation system is requisite in biological waste treatment and energy generation plant, which is affected by viscosity, impeller types, and power consumption. In the present work, hydrogen fermentation of food waste was conducted at various operational pHs (4.5~6.5) and substrate concentrations (10~50 g Carbo. COD/L), and the viscosity of fermented broth was analyzed. The $H_2$ yield significantly varied from 0.51 to $1.77mol\;H_2/mol\;hexose_{added}$ depending on the pH value, where the highest performance was achieved at pH 5.5. The viscosity gradually dropped with shear rate increase, indicating a shear thinning property. With the disintegration of carbohydrate, the viscosity dropped after fermentation, but it did not change depending on the operational pH. At the same pH level, the $H_2$ yield was not affected much, ranging $1.40{\sim}1.86mol\;H_2/mol\;hexose_{added}$ at 10~50 g Carbo. COD/L. The zero viscosity and infinite viscosity of fermented broth increased with substrate concentrations, from 10.4 to $346.2mPa{\cdot}s$, and from 1.7 to $5.3mPa{\cdot}s$, respectively. There was little difference in the viscosity value of fermented broth at 10 and 20 g Carbo. COD/L. As a result of designing the agitation intensity based on the experimental results, it is expected that the agitation intensity can be reduced during hydrogen fermentation. The initial and final agitation intensity of 30 g Carbo. COD/L in hydrogen fermentation were 26.0 and 10.0 rpm, respectively. As fermentation went on, the viscosity gradually decreased, indicating that the power consumption for agitation of food waste can be reduced.
LEE, JI-HYUN;JEONG-HWA KIM;MI-RYUNG KIM;SUNG-MI LIM;SOO-WAN NAM;JIN-WOO LEE;SUNG-KOO KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.1
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pp.1-7
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2002
The effects of DO and pH on the mass production of pullulan with high molecular weight and the morphology of A. pullulans ATCC 42023 were evaluated. A. pullulans showed a maximum production of pullulan (11.98 g/l) when the initial pH of the culture broth was 6.5 in a shake-flask culture. In a batch culture, the mixture of a yeast-like and mycelial cell forms was found at a pH of 4.5, and the maximum production of pullulan (13.31 g/l) was obtained. However, a high proportion of high molecular weight pullulan (M.W.>2,000,000) was produced at a pH of 6.5, with a yeast-like morphology. The maximum pullulan production yield ($51\%$) was obtained at a pH noncontrol (initial pH 6.5) and DO control (above $50\%$) condition. Pullulan degrading enzyme was activated when the pH of the broth was lower than 5.0 and the portion of low molecular weight pullulan was increased. The formation of a black pigment was observed at an initial stationary phase, at 40 h of fermentation. Therefore, the fermentation should be carried out in a pH noncontrol (initial pH of 6.5) and DO control (above $50\%$) condition, and should be harvested before reaching the stationary phase (around 40 h) for the production of high molecular weight pullulan.
In this study, precipitation process was developed for the recovery of the lactic acid from calcium lactate fermentation broth. Calcium lactate yield was improved by decreasing the solubility of calcium lactate through the addition of ethanol (25%, v/v) as a co-precipitant. The optimal lime type, lime concentration, stirrer speed, precipitation time, temperature, and solvent amount for $Ca(LA)_2$ precipitation were CaO, 0.0175 g/mL, 220 rpm, 24 h, $5^{\circ}C$, ethanol 25% (v/v), respectively. Lactic acid was easily and efficiently recovered from precipitated $Ca(LA)_2$ by adding sulfuric acid ($Ca(LA)_2/H_2SO_4$ molar ratio=1:1). In the model solution of organic acids and fermentation broth, the overall yields of recovered lactic acid were 62% and 55%, respectively, under the aforementioned optimal conditions.
In separating alkaline protease from the bacteria (Bacillus licheniformis) fermentation broth using reverse micelle, effects of various factors;ionic strength, pH and surfactant concentration, on separation efficiency were studied. KCl controls the ionic strength. The lower KCl concentration was in the feed solution, the more protein and activity was recovered. The higher KCl concentration was in the stripping solution, the more protein and activity was recovered. Using sodium-di-2-ethylhexyl sulfosuccinate(Aerosol-OT or AOT) as a surfactant, the higher AOT concentration in the solvent, the more activity and protein were recovered. 0.1N NaOH and IN HCl were used to adjust pH. Maximum recovery of protein mass and activity were obtained at feed solution of pH 5.3. Maximum activity was recovered at stripping solution of pH 7.5
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[게시일 2004년 10월 1일]
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