Spring black stem and leaf spot, caused by Phoma medicaginis, is an issue in annual Medicago species. Therefore, in this study, we analyzed the response to P. medicaginis infection in a collection of 46 lines of three annual Medicago species (M. truncatula, M. ciliaris, and M. polymorpha) showing different geographic distribution in Tunisia. The reaction in the host to the disease is explained by the effects based on plant species, lines nested within species, treatment, the interaction of species × treatment, and the interaction of lines nested within species × treatment. Medicago ciliaris was the least affected for aerial growth under infection. Furthermore, the largest variation within species was found for M. truncatula under both conditions. Principal component analysis and hierarchical classification showed that M. ciliaris lines formed a separate group under control treatment and P. medicaginis infection and they are the most vigorous in growth. These results indicate that M. ciliaris is the least susceptible in response to P. medicaginis infection among the three Medicago species investigated here, which can be used as a good candidate in crop rotation to reduce disease pressure in the field and as a source of P. medicaginis resistance for the improvement of forage legumes.
This work focused on characterization of the starch degradation activity from extremophile strain Deinococcus geothermalis. Glucoamylase gene from D. geothermalis was cloned and overexpressed by pET-21a vector using E. coli BL21 (DE3). In order to characterize starch degrading activity of recombinant glucoamylase, enzyme was purified using HisPur Ni-NTA column. The recombinant glucoamylase from D. geothermalis exhibited the optimum temperature as $45^{\circ}C$ for starch degradation activity. And highly acido-stable starch degrading activity was shown at pH 2. For further optimization of starch degrading activity with metal ion, various metal ions ($AgCl_2$, $HgCl_2$, $MnSO_4{\cdot}4H_2O$, $CoCl_2{\cdot}6H_2O$, $MgSO_4$, $ZnSO_4{\cdot}7H_2O$, $K_2SO_4$, $FeCl_2{\cdot}4H_2O$, NaCl, or $CuSO_4$) were added for enzyme reaction. As results, it was found that $FeCl_2{\cdot}4H_2O$ or $MnSO_4{\cdot}4H_2O$ addition resulted in 17% and 9% improved starch degrading activity, respectively. The recombinant glucoamylase from D. geothermalis might be used for simultaneous saccharification and fermentation (SSF) process at high acidic conditions.
Recent research results regarding the very long chain transmembrane ${\alpha},{\omega}-dicarboxylic$ components in the membrane of extremophilic eubacteria, such as Sarcina ventriculi, Thennotoga maritima, and Thermoanaerobacter ethanolicus have raised interesting questions concerning the physical and biochemical function on these components in the membrane. In order to understand the dynamic characteristics of these acids which reside in the bilayer membrane, 580 ps molecular dynamic simulations at 300 K were performed for two model systems. These systems were the bilayer with regular chain (C16:0 or C18:1) fatty acid methyl esters and the fatty acid bilayer containing very long chain transmembrane dicarboxylic acid methyl esters (${\alpha},{\omega}-15,16-dimethyltriacotane-dioate$ dimethyl ester; C32:0). Our analyses indicate that very long chain transmembrane dicarboxylic acids have a noticeable influence on the bilayer dynamics at a sub-nanosecond time scale. The center-ofmass mean-squared-displacement (MSD) of regular chain fatty acids adjacent to the very long chain transmembrane dicarboxylic acids decreased, the long-axis order parameter increased, and the reorientational motions of methylene groups were slowed along the hydrocarbon chains. These results indicate that the very long chain transmembrane dicarboxylic acids reduce the molecular order of the whole bilayer membrane.
Since the biosynthetic production of indigo and indirubin normally reflects a difficult process including the toxicity of indole to microorganisms, only several bacterial strains have been exploited to produce indigo and indirubin from indole or its derivatives. P. savastanoi BCNU 106, which was a gram negative bacterium, was isolated and tolerant to 10% (v/v) toluene. The indole tolerance level of P. savastanoi BCNU 106 was as high as 160 mg/ml when toluene or p-xylene was added to the medium to 20% by volume. P. savastanoi BCNU 106 grown in a two-phase culture system containing indole(100 mg/ml) and P-xylene (0.2 ml/ml) produced P-xylene-soluble pigments, blue indigo and purple indirubin. Of the conditious tried, the production of indigo and indirubin was found only when P. savastanoi BCNU 106 was grown in the two-phase system overlaid with the organic solvents with appropriate polarity. This study may illustrate that the isolated extremophile P. savastanoi could be used in the microbial conversion process of the industrial potentials.
Kim, Myung Kyum;Jang, Seon-A;Namkoong, Seung;Lee, Jin Woo;Park, Yuna;Kim, Sung Hyeok;Lee, Sung Ryul;Sohn, Eun-Hwa
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.30
no.4
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pp.583-590
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2020
Deinococcus actinosclerus BM2T (GenBank: KT448814) is a radio-resistant bacterium that is newly isolated from the soil of a rocky hillside in Seoul. As an extremophile, D. actinosclerus BM2T may possess anti-inflammatory properties that may be beneficial to human health. In this study, we evaluated the anti-inflammatory effects of BM2U, an aqueous extract of D. actinosclerus BM2T, on lipopolysaccharide (LPS)-mediated inflammatory responses in RAW264.7 macrophage cells. BM2U showed antioxidant capacity, as determined by the DPPH radical scavenging (IC50 = 349.3 ㎍/ml) and ORAC (IC50 = 50.24 ㎍/ml) assays. At 20 ㎍/ml, BM2U induced a significant increase in heme oxygenase-1 (HO-1) expression (p < 0.05). BM2U treatment (0.2-20 ㎍/ml) significantly suppressed LPS-induced increase in the mRNA expression of proinflammatory cytokines tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-1β, and IL-6 (p < 0.05). BM2U treatment also suppressed the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), which are involved in the production of inflammatory mediators. BM2U treatment also inhibited the activation of nuclear factor-κB (NF-κB) and mitogen-activated protein kinases (MAPKs): JNK, ERK, and p-38 (p < 0.05). Collectively, BM2U exhibited anti-inflammatory potential that can be exploited in attenuating inflammatory responses.
The tRNA structure contains conserved modifications that are responsible for its stability and are involved in the initiation and accuracy of the translation process. tRNA modification enzymes are prevalent in bacteria, archaea, and eukaryotes. tRNA Gm18 methyltransferase (TrmH) and tRNA $m^1G37$ methyltransferase (TrmD) are prevalent and essential enzymes in bacterial populations. TrmH involves itself in methylation process at the 2'-OH group of ribose at the 18th position of guanosine (G) in tRNAs. TrmD methylates the G residue next to the anticodon in selected tRNA subsets. Initially, $m^1G37$ modification was reported to take place on three conserved tRNA subsets ($tRNA^{Arg}$, $tRNA^{Leu}$, $tRNA^{Pro}$); later on, few archaea and eukaryotes organisms revealed that other tRNAs also have the $m^1G37$ modification. The present study reveals Gm18, $m^1G37$ modification, and positions of $m^1G$ that take place next to the anticodon in tRNA sequences. We selected extremophile organisms and attempted to retrieve the $m^1G$ and Gm18 modification bases in tRNA sequences. Results showed that the Gm18 modification G residue occurs in all tRNA subsets except three tRNAs ($tRNA^{Met}$, $tRNA^{Pro}$, $tRNA^{Val}$). Whereas the $m^1G37$ modification base G is formed only on $tRNA^{Arg}$, $tRNA^{Leu}$, $tRNA^{Pro}$, and $tRNA^{His}$, the rest of the tRNAs contain adenine (A) next to the anticodon. Thus, we hypothesize that Gm18 modification and $m^1G$ modification occur irrespective of a G residue in tRNAs.
Berthold, David Erwin;Rosa, Nina de la;Engene, Niclas;Jayachandran, Krish;Gantar, Miroslav;Laughinghouse, Haywood Dail IV;Shetty, Kateel G.
ALGAE
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v.35
no.1
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pp.91-106
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2020
Incorporating renewable fuel into practice, especially from algae, is a promising approach in reducing fossil fuel dependency. Algae are an exceptional feedstock since they produce abundant biomass and oils in short timeframes. Algae also produce high-valued lipid products suitable for human nutrition and supplement. Achieving goals of producing algae fuels and high-valued lipids at competitive prices involves further improvement of technology, especially better control over cultivation. Manipulating microalgae cultivation conditions to prevent contamination is essential in addition to promoting optimal growth and lipid yields. Contamination of algal cultures is a major impediment to algae cultivation that can however be mitigated by choosing extremophile microalgae. This work describes the isolation of alkali-tolerant / alkaliphilic microalgae native to South Florida with ideal characteristics for cultivation. For that purpose, water samples from Lake Okeechobee were inoculated into Zarrouk's medium (pH 9-12) and incubated for 35 days. Selection resulted in isolation of three strains that were screened for biomass and lipid accumulation. Two alkali-tolerant algae Chloroidium sp. 154-1 and Chlorella sp. 154-2 were poor lipid accumulators. One of the isolates, the diatom Fistulifera sp. 154-3, was identified as a lipid accumulating, alkaliphilic organism capable of producing 0.233 g L-1 d-1 dry biomass and a lipid content of 20-30% dry weight. Lipid analysis indicated the most abundant fatty acid within Fistulifera sp. was palmitoleic acid (52%), or omega-7, followed by palmitic acid (17%), and then eicosapentanoic acid (15%). 18S rRNA phylogenetic analysis formed a well-supported clade with Fistulifera species.
Fusarium and Rhizoctonia genera are important pathogens of many field crops worldwide. They are constantly evolving and expanding their host range. Selecting resistant cultivars is an effective strategy to break their infection cycles. To this end, we screened a collection of Medicago truncatula accessions against Fusarium oxysporum, Fusarium solani, and Rhizoctonia solani strains isolated from different plant species. Despite the small collection, a biodiversity in the disease response of M. truncatula accessions ranging from resistant phenotypes to highly susceptible ones was observed. A17 showed relative resistance to all fungal strains with the lowest disease incidence and ratings while TN1.11 was among the susceptible accessions. As an initiation of the characterization of resistance mechanisms, the antioxidant enzymes' activities, at the early stages of infections, were compared between these contrasting accessions. Our results showed an increment of the antioxidant activities within A17 plants in leaves and roots. We also analyzed the responses of a population of recombinant inbred lines derived from the crossing of A17 and TN1.11 to the infection with the same fungal strains. The broad-sense heritability of measured traits ranged from 0.87 to 0.95, from 0.72 to 0.96, and from 0.14 to 0.85 under control, F. oxysporum, and R. solani conditions, respectively. This high estimated heritability underlines the importance of further molecular analysis of the observed resistance to identify selection markers that could be incorporated into a breeding program and thus improving soil-borne pathogens resistance in crops.
Microbial metal reduction influences the biogeochemical cycles of carbon and metals as well as plays an important role in the bioremediation of metals, radionuclides, and organic contaminants. The use of bacteria to facilitate the production of magnetite nanoparticles and the formation of carbonate minerals may provide new biotechnological processes for material synthesis and carbon sequestration. Metal-reducing bacteria were isolated from a variety of extreme environments, such as deep terrestrial subsurface, deep marine sediments, water near Hydrothemal vents, and alkaline ponds. Metal-reducing bacteria isolated from diverse extreme environments were able to reduce Fe(III), Mn(IV), Cr(VI), Co(III), and U(VI) using short chain fatty acids and/or hydrogen as the electron donors. These bacteria exhibited diverse mineral precipitation capabilities including the formation of magnetite ($Fe_3$$O_4$), siderite ($FeCO_3$), calcite ($CaCO_3$), rhodochrosite ($MnCO_3$), vivianite [$Fe_3$($PO_4$)$_2$ .$8H_2$O], and uraninite ($UO_2$). Geochemical and environmental factors such as atmospheres, chemical milieu, and species of bacteria affected the extent of Fe(III)-reduction as well as the mineralogy and morphology of the crystalline iron mineral phases. Thermophilic bacteria use amorphous Fe(III)-oxyhydroxide plus metals (Co, Cr, Ni) as an electron acceptor and organic carbon as an electron donor to synthesize metal-substituted magnetite. Metal reducing bacteria were capable of $CO_2$conversion Into sparingly soluble carbonate minerals, such as siderite and calcite using amorphous Fe(III)-oxyhydroxide or metal-rich fly ash. These results indicate that microbial Fe(III)-reduction may not only play important roles in iron and carbon biogeochemistry in natural environments, but also be potentially useful f3r the synthesis of submicron-sized ferromagnetic materials.
Salt cress (Thellungiella halophila or Thellungiella parvula), species closely related to Arabidopsis thaliana, represents an extremophile adapted to harsh saline environments. To isolate salt-tolerance genes from this species, we constructed a cDNA library from roots and leaves of salt cress plants treated with 200 mM NaCl. This cDNA library was subsequently shuttled into the destination binary vector [driven by the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter] designed for plant transformation and expression via recombination- assisted cloning. In total, 305,400 pools of transgenic BASTA-resistant lines were generated in Arabidopsis using either T. halophila or T. parvula cDNA libraries. These were used for functional screening of genes involved in salt tolerance. Among these pools, 168,500 pools were used for primary screening to date from which 7,157 lines showed apparent salt tolerant-phenotypes in the initial screen. A secondary screen has now identified 165 salt tolerant transgenic lines using 1,551 (10.6%) lines that emerged in the first screen. The prevalent phenotype in these lines includes accelerated seed germination often accompanied by faster root growth compared to WT Arabidopsis under salt stress condition. In addition, other lines showed non-typical development of stems and flowers compared to WT Arabidopsis. Based on the close relationship of the tolerant species to the target species we suggest this approach as an appropriate method for the large-scale identification of salt tolerance genes from salt cress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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