Park, Min-Jeong;Jeon, Ye-Ji;Madsen, Eugene L.;Jeon, Che-Ok
Journal of Applied Biological Chemistry
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제50권2호
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pp.41-45
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2007
Polaromonas naphthalenivorans CJ2, responsible for naphthalene degradation at a coal tar contaminated site, was isolated on MSB agar media supplied with naphthalene vapor as the sole carbon source at $10^{\circ}C$. The strain is not isolated under the same isolation condition using the same soil sediment at $20^{\circ}C$ although its optimum temperature is about $20^{\circ}C$. In this work we explored the reason why strain CJ2 could not have been isolated on MSB agar with naphthalene vapor at $20^{\circ}C$. Dispersed CJ2 cells in PBS buffer formed colonies on MSB agar with naphthalene vapor at $10^{\circ}C$ with low naphthalene vapor pressure, but not at $20^{\circ}C$ with high naphthalene vapor pressure. However, streaked cells without resuspension grew on MSB agar with naphthalene vapor at $10^{\circ}C,\;20^{\circ}C$, and even $25^{\circ}C$. Investigation of scanning electron microscopy showed that CJ2 cells formed extracellular polysaccharide (EPS) capsules, which were released easily from CJ2 cells by just dispersion. Therefore, it is concluded that strain CJ2 is able to overcome the naphthalene toxicity by forming a capsule-type barrier around the cells although it is susceptible to naphthalene toxicity at high temperature.
본 연구에서는 경기도 안양에 있는 하천에서 분리한 홍색 비황 광합성 세균Rhodopseudomonas sp. KH4에서 생성된 extracellular polysaccharide (EPS)의 중금속 흡착특성에 대해 연구하였다. 100 mg/L의 Cd과 Cu의 최적 흡착조건(온도$40^{\circ}C$ Cd; pH 8, Cu; pH 5)에서 1.0 g/L의 EPS를 첨가하였을 때, Cd의 경우 30분 동안 842 mg/L, Cu의 경우 10분 동안 70.0 mg/L가 흡착되었다. 또한 Cd과 Cu가 각각 100 mg/L씩 공존되어 있는 경우, pH 5, $25^{\circ}C$에서 EPS 1.0 g/L 첨가하였을 때 Cd과 Cu가 각각 16.8 mg/L, 48.7 mg/L가 흡착되었다. 또한 Langmuir 등은 흡착식으로 부터 EPS 1.0 g/L, pH 5, $25^{\circ}C$에서 Cd과 Cu의 흡착량은 각각 76.9 mg/L, 67.1 mg/L로 실제 경험치와 큰 차이를 보이지 않았다. 에탄올 침전법으로 정제된 KH4 strain으로부터 생성된 EPS는 gas-liquid chromatography (GLC) 분석에 의한 중성당 분석 결과, arabinose, glucose, mannose가 각각 2.4%, 7.1%, 90.5%로 mannose가 대부분을 구성하였다.
유산균이 생성하는 다당류에 관한 연구의 일환으로서 발효유 제품의 종균으로 널리 사용되고 있는 Str. themophilus, Lb. bulgaricus, Lb. casei 등을 10% 환원멸균 탈지유에 배양하면서 다당류 생성에 따른, 우유 배양액 점도의 경시적 변화 및 다당류의 최적 생성 조건에 대하여 조사하였다. 1. 시험균 중에서 Str. thermophilus 510이 가장 높은 점도를 나타냈으며 $41^{\circ}C$ 배양 5일째에 5,000 CP로서 다른균에 비해서 1,000 CP 이상 높았다. 2. 인공합성배지를 사용하여 흡광도를 측정한 결과 $41^{\circ}C$에서의 흡광도가 가장 높았으며 다당류 합성을 위한 탄소원으로서는 Sucrose의 이용성이 1~5% 농도에서 가장 높았다. 3. 다당류 합성효소의 금속염에 대한 영향을 살펴본 결과 $Mg^{++}$의 효과가 인정되었다.
Agrocybe cylindracea으로부터 분리 배양한 균사체 배양액을 이용하여 균사체내 다당류(IP)와 균사체외 다당류(EP)를 분리하고, 동물실험을 통한 각 다당류의 면역증강활성에 관해 실험을 실시하였다. 탐식능에 대한 실험결과, IP와 EP 모두는 복강 침출 세포(PEC)에서 대조군에 비해 6.6-50%, 말초 임파구(ML)에서 67-167%, 비장(SP)에서 16-90%의 전반적으로 높은 탐식능을 나타냈다. 또한 항체 생성능 측정을 위한 plaque forming cell(PFC)와 rosette forming cell(RFC)의 실험결과에서 볼 때, PFC형성능은 대조군에 비해 EP투여 II군에서 46-50%, IP투여 I군에서 49-70%의 활성증가를 나타내었다. 또한 RFC형성능은 대조군에 비해 IP투여 I군에서 91%의 증가를, EP투여 I군에서 33%, EP투여 II군에서 43%의 활성증가를 나타내어 높은 항체생성이 기대되었다. Mitogen 활성은 농도 의존적으로 세포 증식능을 보였으며, IP와 EP를 비교할 때, EP는 IP에 비해 약2.5배의 세포증식 활성을 보였다.
Schizophyllum commune의 균체 생육 및 다당체 생성에 미치는 여러 가지 배지성분의 영향을 조사하였다. 탄소원으로는 산업적인 경제성과 높은 다당체 생성량을 나타낸 glucose를 선택하였고, 무기질소원은 유기질소원에 비해 현저히 낮은 다당체 생성량을 나타내었으며, 그 결과 균체량과 다당체 생성량에서 높은 효과를 나타낸 yeast extract를 질소원으로 선택하였다.
토양으로부터 점질성을 나타내 주는 물질 생산세균을 분리하였으며 이 균을 동정한 결과 Enterobacter agglomerans로 동정되었다. 이 균이 생산하는 다당류는 glucose와 galactose로 구성된 ${\beta}-glucan\;polymer$로 추정되었다. 이 다당류는 1% 농도에서 264 mPa.s.의 점도를 나타내며 항복치는 4.89Pa이었다. 한편 이 다당류 용액은 열안정성은 없으며 pH 및 NaCl에 대한 안정성은 있었다.
Seo, Weon-Taek;Kahng, Goon-Gjung;Nam, Sang-Hae;Choi, Sang-Do;Suh, Hyun-Hyo;Kim, Seon-Won;Park, Yong-Ha
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권6호
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pp.820-825
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1999
A bacterial strain WN9, which produced a new type of extracellular polysaccharide, was isolated from soil samples. By morphological, physiological, biochemical, and phylogenetic studies, strain WN9 was identified as a Paenibacillus sp. and it was named as Paenibacillus sp. WN9, which produced a high molecular extracellular polysaccharide from glucose. The molecular weight of the exopolysaccharide (EPS-WN9) was estimated to be about 31.5 mega-Da. The FT-IR spectrum of EPS-WN9 revealed typical characteristics of polysaccharides. EPS- WN9 consisted of D-glucose and D-mannose with a molar ratio of 1:1.4 being identified as a neutral sugar component. The acidic component of EPS- WN9 was tyrosine. Rheological analysis of EPS- WN9 revealed that the pseudoplastic property and its apparent viscosity remained stable at various temperatures and pHs.
본 연구에서는 참당귀 현탁세포배양에 의한 면역 증강성 ECP의 생산을 증진시키기 위하여 배지교환식 배양을 수행하였으며, ECP의 분비를 촉진하는 초음파 처리와 Pluronic F-68의 영향을 조사하였다. 참당귀의 현탁세포배양시, 최대 세포생장은 6일째에 16.8 g DCW/L였고, ECP의 생산은 세포생장과 함께 증가하다가 8일째에 최고 0.9 g/L가 생산되었다. 식물세포 고농도배양법인 배지교환식 배양을 적용해, 초기 당 농토를 높이고 접종 후 5일부터 연속적으로 배지교환을 해주어 23.8 gDCW/L의 고농도의 현탁세포를 얻을 수 있었다. 초음파 처리 및 Pluronic F-68의 첨가는 참당귀 세포의 세포막의 투과성을 증진시켜 ECP의 생산성을 높임과 동시에 세포 내의 다당의 배지로의 배출을 유도한 것으로 판단된다.
제한통성 메탄올 자호세균인 Methylovorus sp. strain SS1은 최적 성장 조건하에서는 소량의 세포외 다당류(EPS)를 생산하였지만, 질소원이 결핍된 성장 조건하에서는 성장속도는 느렸지만 다량의 EPS를 생산하였다. EPS는 배지내의 탄소대 질소 비율이 5.2일 때 가장 많이 생산되었다. EPS 생산을 위한 최적 온도는 30^{\circ}C.$이고 최적 pH는 6.5였다. EPS는 탄수화물과 단백질 및 약간의 피루브산으로 구성되어 있었고, 환원당으로는 다량의 포도당과 소량의 mannose가 존재하였다. 에탄올을 처리한 EPS(EPSae)에는 에탄올을 처리하지 않은 EPS(EPSbe)에 존재하던 피루브산이 존재하지 않았고, EPS보다 단백질의 양도 적고 점성도 낮았다. EPSbe의 점성은 NaCl에 의해 큰 영향을 받았는데, 0.5%(w/v) 농도의 NaCl 용액에서도 점성이 크게 떨어졌으며, 높은 온도에서는 점성이 비가역적으로 크게 증가하였다. Gel filtration 방법으로 조사한 EPSae의 분자량은 $2.5{\times}$10^6$ - $3.5{\times}$10^6$이었다. 냉동건조한 다당류를 전자현미경으로 관찰하였을 때, EPSbe는 섬유모양을 하였고, EPSae는 벌집모양의 망상구조를 하고 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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