• 제목/요약/키워드: Extracellular

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Rhodotorula graminis SW 214의 세포외 지방질 생산에 관한 연구 (Production of Extracellular Lipid by Rhodotorula graminis SW 214)

  • 김성연;고경;박성오
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권6호
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    • pp.794-800
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    • 1993
  • 알바비스커스 잎으로부터 세포외 지질을 대량 생산하는 효모를 분리하고 동정한 결과 Rhodotorula graminis SW 214로 확인하였으며, $25^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양시 Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량은 7.31g/l였다. 배지내의 질소원과 탄소원의 농도는 세포의 지질 생산에 큰 영향을 주었는데 배지내의 질소원이 효모 성장에 거의 이용되고 탄소원이 아직 남아 있을때 지질 생산이 활발히 이루어졌다. 배지내에 질소원 농도가 높은 동안에는 지질 생산이 더디게 이루어졌다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 gluaminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 glucose 8%, yeast extract 2.5g/l, $KH_{2}PO_{4}\;1g/l,\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O\;0.2g/l$, pH6에서 8일간 배양할 때임을 알 수 있었고 효모건조 균체량은 8.05g/l, 지방 생산량은 8.89g/l였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질의 TLC에 의한 분별 정량 결과는 triglyceride 75.16%, phospholipid 10.77%, free fatty acid 5.88, esterified sterol 4.94%, free sterol 3.25%였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지방의 주된 지방산 조성은 3-hydroxypentadecanate 37.90%, 3-hydroxypentadecanate 20.80%, trans-9-octadecanate 11.53%, cis-9-headecanate 10.93%, 15-methylhexadecanate 9.82%, 18-methylnonadecanate 4.63%, octadecanate 2.64%, 3-hydroxytridecanate 1.75%였다.

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고농도 포도당이 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사에 미치는 영향에 관한 연구 (Effect of Glucose at High Concentrations on the Apoptosis of the Cultured Periodontal Ligament Cells and Osteoblasts)

  • 박성호;주성숙;홍정표;신제원
    • Journal of Oral Medicine and Pain
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    • 제32권4호
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    • pp.357-364
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    • 2007
  • 고농도 포도당이 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사에 미치는 영향과 그 경로를 알아보기 위하여 뼈모세포주인 MC3T3-E1 (E1) 세포와 사람 치주인대로부터 일차배양을 통해 얻은 치주인대세포를 1,000 mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액 (대조군)과 4,500 mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액 (실험군)으로 나누어 24시간과 48시간 배양하였다. 그 후, ELISA assay를 통해 p38 MAPK와 caspase-3의 발현을 평가하고 Western blot을 통해 JNK-1과 ERK-1의 발현을 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 대조군에 비해 실험군에서 caspase-3와 p38 MAPK 발현이 증가하였다. 2. 실험군에서의 caspase-3와 p38 MAPK 발현은 뼈모세포에 비해 치주인대세포에서 더욱 크게 증가하였다. 3. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 대조군에 비해 실험군에서 JNK-1 발현이 증가하였다. 4. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 ERK-1 발현에는 변화가 없었다. 이상의 결과로 보아, 고혈당 조건에 의해 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사가 증가하며, 치주인대세포가 고혈당 조건에 더욱 민감하게 반응하여 세포자멸사가 크게 증가하는 것으로 생각된다. 또한 이들 세포의 세포자멸사 과정은 p38 MAPK와 JNK-1 경로가 관여하며 ERK-1 경로는 관여하지 않는 것으로 추정된다.

Saccharomyces diastaticus의 포자형성 특이 글루코아밀라제의 특성 (Characterization of Sporulation-Specific Glucoamylase of Saccharomyces diastaticus)

  • 김은주;안종석;강대욱
    • 생명과학회지
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    • 제20권5호
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    • pp.683-690
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    • 2010
  • 효모 Saccharomyces diastaticus 는 세포 외로 분비되는 glucoamylase I, II, III 동위효소 중 하나를 생산하여 전분을 가수분해하여 포도당을 생성할 수 있다. Glucoamylase I, II, III는 STA1, STA2, STA3 유전자에 의해 각각 암호화된다. 효모 Saccharomyces 속이 포자가 형성되는 시기에 세포 내에서 특이적으로 발현된다고 알려진 glucoamylase (SGA)의 분자생물학적 및 생화학적 연구를 수행하기 위한 일환으로 S. diastaticus YIY 345 형질전환체의 배양 상등액으로부터 SGA 정제를 시도하였다. 황산암모늄 침전, DEAE-Sephadex A-50, CM-Sephadex C-50, Sephadex G-200 chromatography 등의 정제과정을 거쳐서 비특이 활성이 174배 증가된 0.22 mg의 순수한 SGA를 얻었다. HPLC와 SDS-PAGE 분석을 통해 이 효소는 63, 68 kDa의 단위체로 구성된 이합체임을 확인할 수 있었다. Con-A Sepharose 친화성 크로마토그피와 탈당쇄 효소를 처리한 결과로부터 SGA는 N-연결형 당쇄로 수식되었으며 단백질 부분은 59 kDa이었다. 정제한 SGA와 세포 외 분비성 glucoamylase의 효소학적 특성을 조사하고 비교한 결과 SGA의 최적 pH와 온도는 각각 5.5와 $45^{\circ}C$로 나타났으며 세포 외 분비성 glucoamylase는 5.0과 $50^{\circ}C$로 나타났다. SGA는 세포 외로 분비되는 glucoamylase에 비해 열처리 및 SDS에 대해 더 민감한 반응성을 나타내었다.

Purification and Characterization of Caseinolytic Extracellular pretense from Bacillus amyloliquefaciens S94

  • Son, Eui-Sun;Kim, Jong-Il
    • Journal of Microbiology
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    • 제40권1호
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    • pp.26-32
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    • 2002
  • From the culture supernatant of the psychrotrophic strain of Bacillus amyloliquefaciens an extracellular serine protease was purified to apparent homogeneity by successive purification steps using QAE-Sephadex, SP-Sephadex and Sephacryl S-100 column chromatography. The pretense is monomeric, with a relative molecular mass of 23,000. It is inhibited by the serine protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride, but not by EDTA. The enzyme is most active at pH 9-10 and at $45^{\circ}C$, although it is unstable at $60^{\circ}C$.

Voltage-sensitive Calcium Channels Are Linked to P2X Purinoceptors in PC12 Cells

  • Hur, Eun-Mi;Park, Tae-Ju;Kim, Kyong-Tai
    • 한국생물물리학회:학술대회논문집
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    • 한국생물물리학회 1999년도 학술발표회 진행표 및 논문초록
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    • pp.68-68
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    • 1999
  • Extracellular A TP is known to function as a neurotransmitter and as a modulator in the variety of cell types. In PC12 cells, extracellular A TP elevates [Ca$\^$2+/]j through receptor-operated Ca$\^$2+/ channels and through the activation of phospholipase C, thereby facilitating the secretion of neurotransmitters.(omitted)

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Streptomyces sp. 일주에서 균체외 호염기성 단백질분해 효소의 생합성 조절 (Regulation of extracellular alkaline protease biosynthesis in a strain of streptomyces sp.)

  • 신현승;이계준
    • 미생물학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.32-37
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    • 1986
  • In fermentation studies it revealed that Streptomyces sp. SMF 3001 started to synthesize extracellular alkaline protease from early exponential phase of cell growth. The biosynthesis of the alkaline protease was greatly induced by skim milk as a sola nitrogen source and further stimulation was observed under inorganic sulphur limited culture. However, it was found that the biosynthesis was apparently repressed by $NH_4^+$ and free amino acids, specially by cysteine. It was considered that the strain SMF 301 of Streptomyces sp. would produce the alkaline protease for the uptake of sulphur compounds from protein contained in the culture broth.

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Targeting Cell-Cell and Cell-Matrix Interactions and Its Therapeutic Applications

  • Kim, In-San
    • 대한약학회:학술대회논문집
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    • 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-1
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    • pp.100-101
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    • 2003
  • Cell-cell and cell-matrix interaction is clearly required for metazoans not only to hold their cells together but also to conduct more sophisticated biological processes. Each cell has adhesion molecules on its cell membrane to link extracellular matrix and adjacent cells to the intracellular cytoskeleton, and also to transduce signals. In complex metazoans, information is transmitted from one cell to another by mechanisms such as direct intercellular communication, soluble signal molecules among distant cells, and local cellular environments formed by highly specialized extracellular matrix. (omitted)

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인간조직인자 세포외 부분의 효과적인 제조 방법 (An Efficient Method for Production of Extracellular Human Tissue Factor in Escherichia coli)

  • 유환구;박양진;이우일
    • 생명과학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.561-565
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    • 2009
  • 인간조직인자는 혈액응고인자 factor VII 과 복합체를 형성하며 연속적인 혈액응고 연쇄반응을 촉매하는 효소 활성체이다. 복합체 형성에 필수적인 이 조직인자의 세포 외 부분이, 기존의 융합 단백질 및 히스티딘 말단이 없는 새로운 발현 벡터에 의해 대장균 내에서 과량 발현 되었다. 봉입체 형태로 발현된 재조합 인간조직인자는 DEAE-Sephacel 크로마토그라피 기술을 적용하여 분리, 정제 및 구조적 복원이 동시에 시도 되었다. 정제된 재조합 단백질은 SDS-PAGE 분석에서 순수한 형태로 나타났으며, 생물학적 활성도 또한 기존의 조직인자와 거의 동등함을 보였다. 본 연구의 발현 및 정제 시스템은 이전의 보고에서 보여진 방법들에 비해 단백질 분해효소를 사용하지 않아 추가적인 크로마토그라피 과정이 필요 없어 좀 더 효율적이기 때문에 기존의 발현 시스템에 대해 대체할 수 있는 매우 유용한 방법으로 제공된다.

The activation of CD99 inhibits cell-extracellular matrix adhesion by suppressing β1 integrin affinity

  • Lee, Kyoung-Jin;Lee, Sun-Hee;Yadav, Birendra Kumar;Ju, Hyun-Mi;Kim, Min-Seo;Park, Jeong-Hyun;Jeoung, Doo-Il;Lee, Han-Soo;Hahn, Jang-Hee
    • BMB Reports
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    • 제45권3호
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    • pp.159-164
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    • 2012
  • CD99 is known to be involved in the regulation of cell-cell adhesion. However, it remains unclear whether CD99 controls cell-extracellular matrix adhesion. In this study, the effects of CD99 activation on cell-extracellular matrix adhesion were investigated. It was found that engagement of CD99 with the stimulating antibody YG32 downregulated the adhesion of MCF-7 cells to fibronectin, laminin and collagen IV in a dose-dependent manner. The CD99 effect on cell-ECM adhesion was inhibited by overexpression of the dominant negative form of CD99 or CD99 siRNA transfection. Treatment of cells with $Mn^{2+}$ or by ${\beta}_1$ integrin-stimulating antibody restored the inhibitory effect of CD99 on cell-ECM adhesion. Cross-linking CD99 inactivated ${\beta}_1$ integrin through conformational change. CD99 activation caused dephosphorylation at Tyr-397 in FAK, which was restored by the ${\beta}_1$ stimulating antibody. Taken together, these results provide the first evidence that CD99 inhibits cell-extracellular matrix adhesion by suppressing ${\beta}_1$ integrin affinity.

침엽수 혼합목분에서 배양조건을 달리한 Fomitopsis palustris 의 균체외효소 활성 변화 (Effect of Various Culture Conditions on the Activity of Extracellular Enzymes from Fomitopsis palustris, Brown Rot Fungi)

  • 이영민;최두열;김현정;윤정준;김영숙
    • Journal of Forest and Environmental Science
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    • 제24권1호
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    • pp.53-59
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    • 2008
  • 목질 바이오매스(wood biomass)를 효율적으로 분해하는 최적 배양조건을 확립하기 위하여 국내 침엽수 4수종(소나무, 낙엽송, 잣나무, 리기다소나무)의 목질바이오매스를 혼합하여 목분의 적정입도, 배양기간, 기질첨가농도별 균주의 균체외효소 활성을 측정하였다. 연구 결과, 혼합목분을 기질로 했을때 Fomitopsis palustris가 분비하는 균체외효소 활성은 효소 종류에 따라 기질농도, 목분입도, 및 배양기간등의 배양조건에 따라 다른 효소활성 값을 나타냈다. 침엽수 혼합목분을 기질로 했을 때 대부분의 cellulase 분비를 유도하는 최적 조건은 목분 입도, 80~100 mesh, 기질 농도는 7.5%가 적정한 것으로 밝혀졌다. 또한 최적의 목분입도 및 투입농도 조건에서 배양기간은 4~8주로 적절한 것으로 구명되었다.

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