• 제목/요약/키워드: Extracellular

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Vibrio sp. AL-145가 생산하는 균체외 효소의 정제 (I) (Purification of Extracellular Enzyme Produced by Vibrio sp. AL-145)

  • 주동식;이응호
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.234-239
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    • 1993
  • 알긴산 분해능이 강한 균주를 자연산 미역으로부터 분리하여 동정한 결과 Vibrio sp.로 밝혀졌고, 이 균은 탄소원으로 alginate, 질소원으로 peptone, NaCl 농도 2.5%, 28$\pm$2$^{\circ}C$에서 최대의 효소활성을 보였다. 겔 여과 및 이온크로마토그래피 방법으로 정제하여 정제도가 53.7배, 비활성이 11.84U/mg의 정제효소를 얻었다. 이 정제효소를 SDS-전기영동하여 분자량을 측정한 결과 약 27,000 정도로 추정되었다.

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Therapeutic application of extracellular vesicles for various kidney diseases: a brief review

  • Lee, Sul A;Yoo, Tae Hyun
    • BMB Reports
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    • 제55권1호
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    • pp.3-10
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    • 2022
  • Extracellular vesicles (EVs) released from different types of kidney cells under physiologic conditions contribute to homeostasis maintenance, immune-modulation, and cell-to-cell communications. EVs can also negatively affect the progression of renal diseases through their pro-inflammatory, pro-fibrotic, and tumorigenic potential. Inhibiting EVs by blocking their production, release, and uptake has been suggested as a potential therapeutic mechanism based on the significant implication of exosomes in various renal diseases. On the other hand, stem cell-derived EVs can ameliorate tissue injury and mediate tissue repair by ameliorating apoptosis, inflammation, and fibrosis while promoting angiogenesis and tubular cell proliferation. Recent advancement in biomedical engineering technique has made it feasible to modulate the composition of exosomes with diverse biologic functions, making EV one of the most popular drug delivery tools. The objective of this review was to provide updates of recent clinical and experimental findings on the therapeutic potential of EVs in renal diseases and discuss the clinical applicability of EVs in various renal diseases.

Extracellular Vesicles as an Endocrine Mechanism Connecting Distant Cells

  • Kita, Shunbun;Shimomura, Iichiro
    • Molecules and Cells
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    • 제45권11호
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    • pp.771-780
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    • 2022
  • The field of extracellular vesicles (EVs) has expanded tremendously over the last decade. The role of cell-to-cell communication in neighboring or distant cells has been increasingly ascribed to EVs generated by various cells. Initially, EVs were thought to a means of cellular debris or disposal system of unwanted cellular materials that provided an alternative to autolysis in lysosomes. Intercellular exchange of information has been considered to be achieved by well-known systems such as hormones, cytokines, and nervous networks. However, most research in this field has searched for and found evidence to support paracrine or endocrine roles of EV, which inevitably leads to a new concept that EVs are synthesized to achieve their paracrine or endocrine purposes. Here, we attempted to verify the endocrine role of EV production and their contents, such as RNAs and bioactive proteins, from the regulation of biogenesis, secretion, and action mechanisms while discussing the current technical limitations. It will also be important to discuss how blood EV concentrations are regulated as if EVs are humoral endocrine machinery.

The complex role of extracellular vesicles in HIV infection

  • Jung-Hyun Lee
    • BMB Reports
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    • 제56권6호
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    • pp.335-340
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    • 2023
  • During normal physiological and abnormal pathophysiological conditions, all cells release membrane vesicles, termed extracellular vesicles (EVs). Growing evidence has revealed that EVs act as important messengers in intercellular communication. EVs play emerging roles in cellular responses and the modulation of immune responses during virus infection. EVs contribute to triggering antiviral responses to restrict virus infection and replication. Conversely, the role of EVs in the facilitation of virus spread and pathogenesis has been widely documented. Depending on the cell of origin, EVs carry effector functions from one cell to the other by horizontal transfer of their bioactive cargoes, including DNA, RNA, proteins, lipids, and metabolites. The diverse constituents of EVs can reflect the altered states of cells or tissues during virus infection, thereby offering a diagnostic readout. The exchanges of cellular and/or viral components by EVs can inform the therapeutic potential of EVs for infectious diseases. This review discusses recent advances of EVs to explore the complex roles of EVs during virus infection and their therapeutic potential, focusing on HIV-1.

흰쥐 뇌하수체 전엽세포에서 PKC나 cAMP에 의한 LH 분비 및 $LH{\beta}$ Subunit mRNA 증가에 미치는 $Ca^{++}$의 영향 (Effects of Extracellular $Ca^{++}$ on PKC or cAMP-stimulated Increases in LH Release and $LH{\beta}$ Subunit mRNA Levels in Rat Anterior Pituitary Cells)

  • 박덕배;김창미;천민석;유경자
    • 대한약리학회지
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    • 제32권3호
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    • pp.347-355
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    • 1996
  • 흰쥐 뇌하수체 전엽배양세포에서 PKC나 cAMP에 의한 LH 분비와 $LH{\beta}$subunit mRNA 증가과정에서 세포외 $Ca^{++}$의 역할을 검증하기 위하여 phorbol ester와 forskolin에 의해 촉진된 LH 분비와 $LH{\beta}$ subunit mRNA 수준에 미치는 EGTA와 verapamil의 영향을 조사하였다. Forskolin에 의해 촉진된 LH 분비와 $LH{\beta}$ subunit mRNA 수준은 $Ca^{++}$ chelator인 EGTA나 $Ca^{++}$ 채널차단제인 verapamil의 처리로 세포외부로부터 $Ca^{++}$의 이동을 억제시켰을때 모두 감소하였다. PMA에 의해 유도된 LH 분비는 EGTA와 verapamil 처리에 의해 영향을 받지 않았으나 PMA에 의해 촉진된 $LH{\beta}$ subunit mRNA는 억제되었다. 따라서 본 연구에 의하면 PKC 활성화나 세포내 cAMP 농도 증가는 $LH{\beta}$ subunit mRNA 수준을 증가시키며 이러한 과정은 세포외 $Ca^{++}$ 의존적인 것으로 생각된다. 그러나 PKC 활성화나 cAMP 증가에 의한 세포외 $Ca^{++}$의 역할이 서로 다른 양상을 보인다. PKC 활성화에 의한 LH 분비는 세포외 $Ca^{++}$에 비의존적이나 cAMP에 의해 촉진된 LH 분비는 세포외 $Ca^{++}$ 유입의 영향을 받는 것으로 사료된다.

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군산 인근 해역에서 종속영양 세균의 분포, 평균체적 및 세포외 효소활성력 (Distribution, Biovolume and Extracellular Enzyme Activities of Heterotrophic Bacteria in the Sea near Kunsan,Korea)

  • 이건형;김재원;김정희
    • The Korean Journal of Ecology
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    • 제17권1호
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    • pp.79-90
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    • 1994
  • 1991년 11월부터 1992년 8월까지 총 8회에 걸쳐 금강하구에서 고군산군도까지 6개 정점을 대상으로 종속영양 세균의 분포와 평군체적 및 세포와 효소활성을 측정하였다. 해양성 종속영양 세균은 1.0X103~5X105 c.f.u./ml의 범주에서 분포하였으며, 간균이 45~72%를 차지하였다. 또한 구균의 평균체적은 (7.69$pm$0.18)X10-2~(8.18$pm$0.38)X10-2$mu$m3, 간균은 (6.09$pm$0.29)X10-2~(7.72$pm$0.41)X10-2$mu$m3의 범주에서 변화하였다. 세포외 효소활성도를 측정한 결과, glucosidase의 활성은 0~3.49$mu$M/l/hr, chitinase의 활성은 0~1.25$mu$M/l/hr, phosphatase는 0~11.95$mu$M/l/hr, amylase는 0~3.80$mu$M/l/hr의 범주에서 측정되어 세포외 효소활성은 여름철에 높은 값을 보였으며, 측정효소중 phosphatase의 활성이 가장 높았다. 종속영양 세균의 분포와 세포외 효소활성은 수온과 유입되는 유기물의 양과 밀접한 관계가 있었으며, 세균의 체적의 크기는 세포외 효소 활성과는 직접적인 관계가 없었다.

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Rhodotorula graminis SW 214의 세포외 지방질 생산에 관한 연구 (Production of Extracellular Lipid by Rhodotorula graminis SW 214)

  • 김성연;고경;박성오
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권6호
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    • pp.794-800
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    • 1993
  • 알바비스커스 잎으로부터 세포외 지질을 대량 생산하는 효모를 분리하고 동정한 결과 Rhodotorula graminis SW 214로 확인하였으며, $25^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양시 Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량은 7.31g/l였다. 배지내의 질소원과 탄소원의 농도는 세포의 지질 생산에 큰 영향을 주었는데 배지내의 질소원이 효모 성장에 거의 이용되고 탄소원이 아직 남아 있을때 지질 생산이 활발히 이루어졌다. 배지내에 질소원 농도가 높은 동안에는 지질 생산이 더디게 이루어졌다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 gluaminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 glucose 8%, yeast extract 2.5g/l, $KH_{2}PO_{4}\;1g/l,\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O\;0.2g/l$, pH6에서 8일간 배양할 때임을 알 수 있었고 효모건조 균체량은 8.05g/l, 지방 생산량은 8.89g/l였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질의 TLC에 의한 분별 정량 결과는 triglyceride 75.16%, phospholipid 10.77%, free fatty acid 5.88, esterified sterol 4.94%, free sterol 3.25%였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지방의 주된 지방산 조성은 3-hydroxypentadecanate 37.90%, 3-hydroxypentadecanate 20.80%, trans-9-octadecanate 11.53%, cis-9-headecanate 10.93%, 15-methylhexadecanate 9.82%, 18-methylnonadecanate 4.63%, octadecanate 2.64%, 3-hydroxytridecanate 1.75%였다.

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고농도 포도당이 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사에 미치는 영향에 관한 연구 (Effect of Glucose at High Concentrations on the Apoptosis of the Cultured Periodontal Ligament Cells and Osteoblasts)

  • 박성호;주성숙;홍정표;신제원
    • Journal of Oral Medicine and Pain
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    • 제32권4호
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    • pp.357-364
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    • 2007
  • 고농도 포도당이 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사에 미치는 영향과 그 경로를 알아보기 위하여 뼈모세포주인 MC3T3-E1 (E1) 세포와 사람 치주인대로부터 일차배양을 통해 얻은 치주인대세포를 1,000 mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액 (대조군)과 4,500 mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액 (실험군)으로 나누어 24시간과 48시간 배양하였다. 그 후, ELISA assay를 통해 p38 MAPK와 caspase-3의 발현을 평가하고 Western blot을 통해 JNK-1과 ERK-1의 발현을 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 대조군에 비해 실험군에서 caspase-3와 p38 MAPK 발현이 증가하였다. 2. 실험군에서의 caspase-3와 p38 MAPK 발현은 뼈모세포에 비해 치주인대세포에서 더욱 크게 증가하였다. 3. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 대조군에 비해 실험군에서 JNK-1 발현이 증가하였다. 4. 뼈모세포와 치주인대세포 모두 ERK-1 발현에는 변화가 없었다. 이상의 결과로 보아, 고혈당 조건에 의해 뼈모세포와 치주인대세포의 세포자멸사가 증가하며, 치주인대세포가 고혈당 조건에 더욱 민감하게 반응하여 세포자멸사가 크게 증가하는 것으로 생각된다. 또한 이들 세포의 세포자멸사 과정은 p38 MAPK와 JNK-1 경로가 관여하며 ERK-1 경로는 관여하지 않는 것으로 추정된다.

Saccharomyces diastaticus의 포자형성 특이 글루코아밀라제의 특성 (Characterization of Sporulation-Specific Glucoamylase of Saccharomyces diastaticus)

  • 김은주;안종석;강대욱
    • 생명과학회지
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    • 제20권5호
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    • pp.683-690
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    • 2010
  • 효모 Saccharomyces diastaticus 는 세포 외로 분비되는 glucoamylase I, II, III 동위효소 중 하나를 생산하여 전분을 가수분해하여 포도당을 생성할 수 있다. Glucoamylase I, II, III는 STA1, STA2, STA3 유전자에 의해 각각 암호화된다. 효모 Saccharomyces 속이 포자가 형성되는 시기에 세포 내에서 특이적으로 발현된다고 알려진 glucoamylase (SGA)의 분자생물학적 및 생화학적 연구를 수행하기 위한 일환으로 S. diastaticus YIY 345 형질전환체의 배양 상등액으로부터 SGA 정제를 시도하였다. 황산암모늄 침전, DEAE-Sephadex A-50, CM-Sephadex C-50, Sephadex G-200 chromatography 등의 정제과정을 거쳐서 비특이 활성이 174배 증가된 0.22 mg의 순수한 SGA를 얻었다. HPLC와 SDS-PAGE 분석을 통해 이 효소는 63, 68 kDa의 단위체로 구성된 이합체임을 확인할 수 있었다. Con-A Sepharose 친화성 크로마토그피와 탈당쇄 효소를 처리한 결과로부터 SGA는 N-연결형 당쇄로 수식되었으며 단백질 부분은 59 kDa이었다. 정제한 SGA와 세포 외 분비성 glucoamylase의 효소학적 특성을 조사하고 비교한 결과 SGA의 최적 pH와 온도는 각각 5.5와 $45^{\circ}C$로 나타났으며 세포 외 분비성 glucoamylase는 5.0과 $50^{\circ}C$로 나타났다. SGA는 세포 외로 분비되는 glucoamylase에 비해 열처리 및 SDS에 대해 더 민감한 반응성을 나타내었다.

Purification and Characterization of Caseinolytic Extracellular pretense from Bacillus amyloliquefaciens S94

  • Son, Eui-Sun;Kim, Jong-Il
    • Journal of Microbiology
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    • 제40권1호
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    • pp.26-32
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    • 2002
  • From the culture supernatant of the psychrotrophic strain of Bacillus amyloliquefaciens an extracellular serine protease was purified to apparent homogeneity by successive purification steps using QAE-Sephadex, SP-Sephadex and Sephacryl S-100 column chromatography. The pretense is monomeric, with a relative molecular mass of 23,000. It is inhibited by the serine protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride, but not by EDTA. The enzyme is most active at pH 9-10 and at $45^{\circ}C$, although it is unstable at $60^{\circ}C$.