• 한국전자통신학회논문지
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• 제8권8호
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• pp.1187-1193
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• 2013

본 논문은 사실적인 3D 얼굴 모델링과 얼굴 표정 생성 시스템을 제안한다. 사실적인 3D 얼굴 모델링 기법에서 개별적인 3D 얼굴 모양과 텍스쳐 맵을 만들기 위해 Generic Model Fitting 기법을 적용하였다. Generic Model Fitting에서 Deformation Function을 계산하기 위해 개별적인 얼굴과 Generic Model 사이의 대응점을 결정하였다. 그 후, Calibrated Stereo Camera로부터 캡쳐 된 영상들로부터 특징점을 3D로 복원하였다. 텍스쳐 매핑을 위해 Fitted된 Generic Model을 영상으로 Projection하였고 사전에 정의된 Triangle Mesh에서 텍스쳐를 Generic Model에 매핑 하였다. 잘못된 텍스쳐 매핑을 방지하기 위해, Modified Interpolation Function을 사용한 간단한 방법을 제안하였다. 3D 얼굴 표정을 생성하기 위해 Vector Muscle기반 알고리즘을 사용하고, 보다 사실적인 표정 생성을 위해 Deformation 과 vector muscle 기반의 턱 rotation을 적용하였다.

• 대한의생명과학회지
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• 제12권3호
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• pp.139-143
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• 2006

Jopock (Jpk) has previously been ascertained that induces both bacterial and mammalian cell death. The Escherichia coli cells expressing Glutathion S-transferase (GST) fused Jpk showed elongated phenotype and inhibited cell growth which led eventual cell death. In an attempt to search the genetic suppressor of the lethal protein Jpk in bacterial cells, we constructed a unidirectional protein expression vector inserting tac promoter next to the C-terminus Jpk in pGEX-Jpk. The function of additional tac promoter was confirmed by substituting lac promoter in Plac-TOPO plasmid. The cells harboring plac- TOPO, which regulates $lacZ{\alpha}$ gene expression under lac promoter, formed blue colonies in 5-bromo-4-3 $indolyo-{\beta}-D-galactoside$ (X-gal) plate. When lac promoter was changed to tac promoter, same results were observed. Since the addition of tac promoter did not affect the toxic effect of Jpk, the pGEX-Jpk-ptac could be a useful vector for the screening of suppressor(s) for Jpk, in which GST-Jpk and a putative Jpk-suppressing protein are coexpressing from two unidirectional tac promoters, which response to the same inducer, $isopropyl-{\beta}-D-thiogalactopyranoside (IPTG)$.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권2호
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• pp.128-134
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• 2008

Erro-prone PCR에 의해서 열안정성이 향상된 Streptomyces coelicolor A(3) 유래의 L-threonine aldolase를 Corynebacterium glutamicum R에서 과잉발현시키기 위하여 Corynebacterium용 vector plasmid인 pCRB1의 SD배열과 개시코든사이의 1염기를 제거한 고발현용 vector plasmid인 pCG-H44(2)를 구축하였다. pCG-H (2)에 의해서 형질전환된 C. glutamicum R 균주(CGH44-2)에서 L-TA를 발현시킨 결과, 기존의 Corynebacterium용 vector plasmid인 pCRB1(CGH44-1)보다 L-TA의 발현량이 높았다. L-threo-DOPS의 합성을 위한 최적조건은 $30^{\circ}C$, 0.1 M cirtric acid buffer(pH 7.0)이었으며, 0.1% TritonX-100를 첨가하였을 경우 보다 높은 활성을 보였다. 최적조건하에서 CGH44-2를 whole cell biocatalyst로 이용한 반복회분식반응에서 재조합대장균을 숙주로 이용한 경우보다 재조합Corynebacterium을 이용하였을 경우, 목적하는 L-threo-DOPS의 합성이 안정적으로 이루어졌다.

• 한국정보통신학회:학술대회논문집
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• 한국정보통신학회 2018년도 추계학술대회
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• pp.444-447
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• 2018

Baculovirus 발현 시스템은 박테리아 발현 시스템, 특히 복잡한 번역 후 변형을 필요로 하는 것과 비교하여 다량의 재조합 단백질을 생성하는 빠르고 비용 효율적인 방법을 포함하는 많은 알려진 장점을 갖는다. 특히 재조합 baculovirus는 광범위한 포유류 세포 유형에서 벡터를 전달하고 재조합 단백질을 발현 할 수 있다. 본 연구에서는 pcDNA3.1로부터 재구성된 baculovirus 벡터를 사용하였는데 이 벡터는 cytomegalovirus (CMV) 프로모터, uroplakin II promoter, polyhedron promoter, 수포 구내염 바이러스 G (VSVG), 녹색 형광 단백질 (EGFP), 단백질 전달 도메인 (PTD) 유전자 등 다양한 유전자들로 재조합 되어 개발되었다. 이러한 재구성 된 벡터를 다양한 세포 및 세포주에 감염시켰다. 이렇게 개발된 baculovirus 벡터는 재조합된 유전자들의 전이성 및 발현성을 기존의 일반적인 벡터와 비교하여 분석하였다. 본 연구결과로 이렇게 개발된 baculovirus 벡터는 기존의 대조군 벡터보다 전이성 및 발현성면에서 더 높은 효율을 갖는다는 것을 확인하였다.

• 한국정보통신학회:학술대회논문집
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• 한국정보통신학회 2013년도 춘계학술대회
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• pp.1006-1008
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• 2013

A novel recombinant baculovirus vector system containing coding genes for polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), and protein transduction domain (PTD) was constructed. We applied this recombinant baculovirus vector into cells and murine tissues and compared efficacy of gene transfer and expression of this recombinant baculovirus vector system with control vector system. From this result, we confirmed that this novel recombinant baculovirus vector system was very effective than control vector system.

• 생태와환경
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• 제52권4호
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• pp.394-402
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• 2019

The Agrobacterium tumefaciens mediated gene transfer is widely used to generate genetic transformation of plants and transient assay of temporal exogenous gene expression. Syringe infiltration system into tobacco (Nicotiana benthamiana) leaves is a powerful tool for transient expression of target protein to study protein localization, protein-protein binding and protein production. However, the protocol and technical information of transient gene expression, especially double strand RNA (dsRNA), in tobacco using Agrobacterium is not well known. Recently, dsRNA is crucial for insecticidal effect on destructive agronomic pest such as Corn rootworm. In this study, we investigated the factor influencing the dsRNA expression efficiency of syringe agro-infiltration in tobacco. To search the best combination for dsRNA transient expression in tobacco, applied two Agrobacterium cell lines and three plant vector systems. The efficiency of dsRNA expression has estimated by real-time PCR and digital PCR. As a result, pHellsgate12 vector constructs showed the most effective accumulation of dsRNA in the cell. These results indicated that the efficiency of dsRNA expression was depending on the kind of vector rather than Agrobacterium cells. In summary, the optimized combination of transient dsRNA expression system in tobacco might be useful to in vivo dsRNA expression for functional study and risk assessment of dsRNA.

• 한국정보통신학회:학술대회논문집
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• 한국정보통신학회 2015년도 춘계학술대회
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• pp.954-957
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• 2015

polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자로 구성된 재조합 베큘로바이러스를 제작하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 여러가지 세포주와 여러 가지 조직에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전달과 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구의 결과로 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템은 유전자의 전달과 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 효능과 안전성면에서 우수하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권5호
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• pp.541-547
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• 1999

Constructions of a transfer vector and a recombinant baculovirus using the thymidine kinase gene of the Herpes simplex virus type 1 strain F (HSV -1) were carried out. Newly cloned transfer vector, pHcgXIIIB, was constructed by insertion of the glycoprotein gX gene signal peptide sequence of Pseudorabies virus into the baculovirus vector pHcEV-IV. The gX sequence was inserted just downstream from the promoter for the polyhedrin gene of the Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV). HSV-1 thymidine kinase(tk) gene (1.131 kb) was used as a candidate gene for transferring into the baculovirus expression system. The tk gene was inserted into a BamHI site downstream from the gX sequence-promoter for the polyhedrin gene in the pHcgXIIIB transfer vector and was transferred into the infectious lacZ-HcNPV expression vector. Recombinant virus was isolated and was named gX-TK-HcNPV. The recombinant virus produced a 45 kDa gX-TK fusion protein in Spodoptera frugiperda cells, which was confirmed by Western blot analysis. Microscopic examination of gX-TK-HcNPV-infected cells revealed normal multiplication. Fluorescent antibody staining indicated that the gX-TK fusion protein was present in the cytoplasm. These results indicated that the transfer vector successfully transferred the gX-tk gene into the baculovirus expression system.

• 미생물학회지
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• 제35권1호
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• pp.28-34
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• 1999

본 연구에서는 Yeast Artificial Chromosome을 효율적으로 조작하고 유유전자의 기능을 보다 더 용이하게 분석하기 위해 EMCV 바이러스의 IRES 염기서열과 $\beta$-galactosidase를 포함하는 새로운 bicistronic fragmentation vector를 제조하였다. 이 벡터의 폴리클로닝 site에 네 개의희귀한 제한효소 부위를 도입하여 DNA를 용이하게 클로닝할 수 있게 만들었다. 그러므로 원하는 어떤 YAC도 효모세포에서 쉽게 상동 재조함에 의해 절편할 수 있는 장점이 있다. 이 bicistronic fragmentation vector 시스템을 이용하면하나의 메시지로부터 연구하고자 하는 유전자와 $\beta$-galactosidase를 동시에 한 세포에서 발현할 수 있기 때문에 유전자의 발현양상을 쉽게 분석할 수 있는 새로운 도구로 이용할 수 있다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제3권1호
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• pp.23-28
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• 2003

Background: Intracellular antibody specific to hepatitis B virus X protein (HBx) might be useful for studying the role of HBx in hepatocellular carcinogenesis and HBV replication. Methods: With variable region genes for H7 monoclonal anti-HBx Ab, we constructed a vector for bacterial expression of single chain Ab (scFv) and a vector for eukaryotic cell expression of it. The expression of H7 scFv and its binding activity against HBx was examined by immunoblotting and immunofluorescence microscopy. Results: H7 scFv expressed in bacterial cells retained reactivity to HBx. We demonstrated its intracytoplasmic expression in CosM6 eukaryotic cells. Conclusion: This is the first study showing the expression of intracellular anti-HBx Ab in eukaryotic cells. H7 scFv may be a good tool to study the function of HBx in HBV infection.