Chae, Jong Pyo;Pajarillo, Edward Alain;Hwang, In-Chan;Kang, Dae-Kyung
Food Science of Animal Resources
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제39권1호
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pp.13-22
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2019
This study aimed to develop a bile-responsive expression system for lactobacilli. The promoters of four genes, encoding phosphoenolpyruvate-dependent sugar phosphotransferase (mannose-specific), L-lactate dehydrogenase (LDH), HPr kinase, and D-alanine-D-alanine ligase, respectively, which were highly expressed by bile addition in Lactobacillus johnsonii PF01, were chosen. Each promoter was amplified by polymerase chain reaction and fused upstream of the ${\beta}$-glucuronidase gene as a reporter, respectively. Then, these constructs were cloned into E. coli-Lactobacillus shuttle vector pULP2, which was generated by the fusion of pUC19 with the L. plantarum plasmid pLP27. Finally, the constructed vectors were introduced into L. plantarum for a promoter activity assay. The LDH promoter showed the highest activity and its activity increased 1.8-fold by bile addition. The constructed vector maintained in L. plantarum until 80 generations without selection pressure. A bile-responsive expression vector, $pULP3-P_{LDH}$, for Lactobacillus spp. can be an effective tool for the bile-inducible expression of bioactive proteins in intestine after intake in the form of fermented dairy foods.
International Journal of Internet, Broadcasting and Communication
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제13권4호
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pp.11-21
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2021
The causes of noise generation according to the classification of indoor spaces are very diverse. Individual happiness is infringed by this noise. In this paper, We tried to visualize the spatial sound characteristics of public places using sound color to express them so that anyone can sympathize. The noise inside a conference room of a medical device company was measured for 100 minutes, and the frequency band was divided into three different types of existing sound pressure expression units. Because the size of the noise is expressed differently depending on the situation, There are cases where there is a difference of opinion between the measurer and the researcher. This noise measurement experiment was conducted, and the sound color was applied to classify it on a log scale considering auditory characteristics. As a result of comparing this with the result expression for different loudness expression units, A specific table in different units yielded almost similar results. In addition, the sound source section for 100 minutes was divided into three analysis sections, the analysis sections were different, and the size of the energy ratio for each analysis section was divided in the form of an envelope. The characteristics of the low-frequency region of the space have a high energy ratio, and the decrease in the energy ratio according to the increase in frequency is constant and regular. You can see that conversations are possible.
KSII Transactions on Internet and Information Systems (TIIS)
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제15권6호
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pp.1981-1995
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2021
When a person tries to conceal emotions, real emotions will manifest themselves in the form of micro-expressions. Research on facial micro-expression recognition is still extremely challenging in the field of pattern recognition. This is because it is difficult to implement the best feature extraction method to cope with micro-expressions with small changes and short duration. Most methods are based on hand-crafted features to extract subtle facial movements. In this study, we introduce a method that incorporates optical flow and deep learning. First, we take out the onset frame and the apex frame from each video sequence. Then, the motion features between these two frames are extracted using the optical flow method. Finally, the features are inputted into an improved MobileNetV2 model, where SVM is applied to classify expressions. In order to evaluate the effectiveness of the method, we conduct experiments on the public spontaneous micro-expression database CASME II. Under the condition of applying the leave-one-subject-out cross-validation method, the recognition accuracy rate reaches 53.01%, and the F-score reaches 0.5231. The results show that the proposed method can significantly improve the micro-expression recognition performance.
Melanosomes are specific melanin-containing intracellular organelles of epidermal melanocytes. In epidermal melanocytes, there are three kinds of key player proteins. Rab27a, melanophilin or Slac2-a and Myosin 5a form a tripartite complex connects the melanosome. Mature melanosomes make movements through the tripartite protein complex along actin filaments.In this study, we found that the haplamine (6-Methoxyflindersine) induced melanosome aggregation around the nucleus in epidermal melanocyte. In an attempt to elucidate the inhibitory effect of haplamine on melanosome transport, effect of haplamineon the expression level of Rab27a, melanophilin and Myosin 5a was measured. The results indicated that haplamine up to 5M effectively suppressed mRNA and protein expression level of melanophilin.To determine the upstream regulator of melanophilin regulated by haplamine, we checked the level of MITF, c-JUN and USF1. Those are possible transcription factor of melanophilin. Among them,treatment of USF1 siRNA decreased mRNA and protein expression level of USF1 as well as melanophilin. Also, treatment of haplamine decreased mRNA and protein expression level of melanophilin as well as USF1 in a dose-dependent manner. Consequently, we found the inhibitory effect of haplamine on melanosome transport in melan-a melanocyte. Treatment of haplamine reduced melanophilin expression level which is a key protein of melanosome transport. We identified that USF1 could be a major transcription factor of melanophilin regulated by haplamine.
Kim, Tae-Ik;Yoon, Ju-Yong;Choi, Byung-Keol;Park, Yong-Kyu;Lee, Dae Seek;Yoon, Gi-Won
Proceedings of the Korean Institute of Building Construction Conference
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한국건축시공학회 2021년도 가을 학술논문 발표대회
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pp.154-155
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2021
Appearance finish is important for amorphous buildings to maximize amorphousness, and GFRC, glass, and metal are mostly used as exterior materials for amorphous buildings currently applied. However, the existing exterior materials showed limitations in amorphous expression, texture, and color expression. In this study, a 3D stereoscopic panel mold was manufactured using the FDM method, one of the 3D printing technologies, and 3D stereoscopic panel production was reviewed using Ultra High Performance Concrete (UHPC), which has excellent physical and mechanical performance and expression. In order to overcome the limitations of unstructured expression, a UHPC 3D stereoscopic panel using the FDM method, one of the 3D printing technologies, was manufactured. Unlike steel molds, FRP molds, and EPS molds, the FDM method can be applied to various materials, and complex shapes are implemented. If it is used using recyclable materials as well as PLA filaments used in the FDM method, it will overcome the limitations of amorphous expression and activate the production of 3D stereoscopic panels that have secured eco-friendliness.
cDNA of human thrombopoietin (hTPO) amplified by polymerase chain reaction from a cDNA library of human fetal liver was cloned. EPO-like domains ($hTPO_{153} \;or\; hTPO_{l63})\; of\; hTPO(hTPO_{332}$) were expressed in Escherichin coli using several kinds of expression systems, such as ompA secretion, thioredoxin fusion, and the $P_L$ and T7 expression systems. To obtain $hTPO_{153}$ in soluble form, $hTPO_{153}$ cDNA was fused in-frame behind the gene encoding ompA signal sequence and thioredoxin protein. When fused with either of the genes, $hTPO_{153}$ was not expressed to the detectable level. However, a high level expression of the EPO-like domain of hTPO was obtained using the PL and T7 expression system. $hTPO_{153} \;or\; hTPO_{l63} cDNA were subcloned into the pLex and pET-28a(+) vectors under the control of the inducible$ P_L\;T_7$ promoter, respectively. Proteins expressed using pl.ex vector and pET-28a(+) detected in insoluble forms with an expression level of about 14% and 9% of total cellular proteins, respectively, and the level of expression was rapidly diminished in 2 h after the maximum level of expression was reached.
By both in vitro hydroxylamine mutagenesis of the wild type 3-phosphoglycerate kinase gene (PGK) promoter DNA and insertion of the leu2-d gene, we have created yeast expression vectors potentially useful for production of eukaryotic genes in yeast. The guanine (G) to adenine (A) change at the -3 position from the ATG start codon of the PGK promoter-based vector rendered a 6~7 times elevated expression of the adjacent eukaryotic gene, and insertion of the leu2-d gene in the vector containing the mutated PGK promoter further enhanced the expression of the gene. When expression of the AIDS virus HIV1-gagP17 gene in a lacZ fusion form was examined with this new vector, a 15 times higher level of expression than that from the original PGK promoter was observed. Northern and Southern analysis showed that this elevated expression is due to the production of a high copy number of mRNA by leu2-d gene functioning and by efficient translation of the produced mRNA. Thus, the vector that contained the A at the -3 position from the ATG start codon in the promoter region and the leu2-d gene shows increased expression capability and will be potentially useful for production of eukaryotic genes in yeast.
Although little information is available on the underlying mechanisms, various genetic factors have been associated with tissue-specific responses to radiation. In the present study, we explored the possibility whether organ specific gene expression is associated with radiosensitivity using samples from brain, lung and spleen. We examined intrinsic expression pattern of 23 genes in the organs by semi-quantitative RT-PCR method using both male and female C57BL/6 mice. Expression of p53 and p21, well known factors for governing sensitivity to radiation or chemotherapeutic agents, was not different among the organ types. Both higher expression of sialyltransferase, delta7-sterol reductase, leptin receptor splice variant form 12.1, and Cu/Zn superoxide dismutase (SOD) and lower expression of alphaB crystalline were specific for spleen tissue. Expression level of glutathione peroxidase and APO-1 cell surface antigen gene in lung tissue was high, while that of Na, K-ATPase alpha-subunit, Cu/ZnSOD, and cyclin G was low. Brain, radioresistant organ, showed higher expressions of Na, K-ATPase-subunit, cyclin G, and nucleolar protein hNop56 and lower expression of delta7-sterol reductase. The result revealed a potential correlation between gene expression patterns and organ sensitivity, and Identified genes which might be responsible for organ sensitivity.
Luteolin is a flavonoid that exists in a glycosylated form in celery and green pepper. Flavonoids possess antioxidant and anti-inflammatory properties and can reduce the expression of key inflammatory molecules in macrophages and monocytes. It has been reported also that some flavonoids have effects on bone metabolism. The effects of luteolin on the function of osteoblasts were investigated by measuring cell viability, alkaline phosphatase activity, type I collagen production, osteoprotegerin secretion, Wnt promoter activity, BMP-2 and Runx2 expression and calcified nodule formation. Luteolin has no effects upon osteoblast viability but induced an increase in alkaline phosphatase activity, type I collagen production and a decrease in osteoprotegerin secretion in these cells. Luteolin treatment also upregulated BMP-2 mRNA expression. These results suggest that luteolin may be a regulatory molecule that facilitates the differentiation of osteoblasts.
Park, Ki-Won;Kim, Tong-Soo;Na, Byoung-Kuk;Song, Chul-Yong
BMB Reports
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제31권3호
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pp.303-306
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1998
Serine proteinase cDNA fragment from protozoan parasite Acanthamoeba culbertsoni was amplified by the reverse transcription-polymerase chain reaction (RTPCR) using degenerate oligonucleotide primers derived from conserved serine proteinase sequences. The amplified DNA fragment was subcloned and sequenced. The sequence analysis and alignment showed significant sequence similarity to other eukaryotic serine proteinases and conservation of the His, Asp, and Ser residues that form the catalytic triad. The cDNA fragment was cloned into the pGEMEX-1 expression vector and expressed in Escherichia coli. A resulting fusion protein of 56 kDa had proteolytic activity. The fusion protein reacted with sera of mice immunized with purified serine proteinase of A. culbertsoni in Western blot. Immune recognition of the fusion protein by mouse antisera suggested that the fusion protein may be valuable as a diagnostic reagent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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