Adenosine deaminase inhibitor was extracted from culture broth of Streptomyces sp. strain V-8 with ethylacetate. The ethylacetate extract showed the characteristic UV absorption spectrum of actinomycins at 440-450 nm. The ethylacetate extract was compared with respect to inhibitory behavior against adenosine deaminase from calf intestinal mucosa with actinomycin D, -C complex and actinomycin V. The Ki values for actnomycin D, -C complex, and actinomycin V against adenosine deaminase were determined to be 9.9 $\times$ 10$^{-6}$ M, 9.6 $\times$ 10$^{-6}$ M and 9.3 $\times$ 10$^{-6}$ M, respectively. The Ki value for the ethylacetate extract of culture broth against adenosine deaminase was determined to be 5.7 $\times$ 10$^{-6}$ M. The kinetic parameters of actinomycin D, -C complex, -V and ethylacetate extract of culture broth for adenosine deaminase were as follows:I$_{50}$ = 1.5 $\times$ 10$^{-5}$ M (actinomycin D), 2.7 $\times$ 10$^{-5}$ M (actinomycin C complex), 3.5 $\times$ 10$^{-5}$ M (actinomycin V), 8.9 $\times$ 10$^{-6}$ M (ethylacetate extract of culture broth). The adenosine deaminase was inhibited noncompetitively by ethylacetate extract of culture broth as well as by actinomycin D, -C complex and actinomycin V.
The objective of this study was to determine antioxidant effect of ether and ethylacetate fractions of 70% ethanol extract of some food (acid treated or not) on perilla oil. Each fraction of food extract was added to perilla oil and stored for 0,3,6.9,11 days at 60$^{\circ}C$. Then, the peroxide value (POV) of perilla oil samples were analyzed. Perilla oil contained ${\gamma}$-tocopherol 0.6800 $\mu\textrm{g}$/mg, ${\alpha}$-tocopherol 0.3189 $\mu\textrm{g}$/mg. $\delta$-tocopherol 0.0463 $\mu\textrm{g}$/mg, but it was easily oxidized due to high linolenic acid content. To increase yield of ether and ethylacetate fractions from each food extract, the 70% ethanol extract was treated with 0.2% H$_2$SO$_4$ and fractionized by ether and ethylacetate. Among ether and ethylacetate fractions of 70% ethanol extracts of some food, the yield of ethylacetate fraction of acid treated Pueraria thunbergiana extract was 5 times more than that of ethylacetate fraction untreated with acid. Perilla oil which added 100 ppm ethylacetate fraction of acid treated Pueraria thunbergianan extract showed low POV (44.8 meq/kg) compared to POV (80.0 meq/kg) of control.
우리나라 야산에서 손쉽게 구할 수 있는 구황식물인 목단피를 건조시켜 분쇄한 후 methanol과 여러 용매로 추출하여 식품 부패 미생물의 증식 억제 효과를 검색하고 그 항균물질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 목단피의 methanol 추출물은 1500$\mu\textrm{g}$/mL 농도에서 B. subtilis, L. monocytogenes, V parahaemolyticus의 증식을 100% 억제하였으며 S. aureus, E. coli도 같은 농도에서 각각 36.31%와 67.81%의 억제 효과를 보였다. 목단피의 ethylacetate 분획 추출물은 낮은 농도인 500$\mu\textrm{g}$/disc의 농도에서 식품 부패 미생물 5종 모두에 대하여 clear zone을 형성하여 항균력을 나타내었다. 특히 L. monocytogenes, E. coli균에 대해서는 낮은 농도인 500$\mu\textrm{g}$/disc에서 각각 12mm, 11mm의 clear zone을 형성하였다. 목단피의 ethylacetate추출물을 silica gel colum chromatography(7cm${\times}$1.2 cm)한 후 thin layer chromatography(TLC)를 실시하여 항균 실험을 한 결과 B. subtilis의 경우 500 $\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 2nd fra. 1이 21mm, V. parahaemolyticus는 250$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 14mm를 형성하여 목단피의 methanol 추출물로부터 각 용매별로 계통 분획하여 분리한 ethylacetate 분획으로부터 silica gel column chromatograpy와 TLC를 하여 항균성을 보인 2nd fra. 1의 성분을 알아보기 위하여 HPLC로 단일분리하여 얻은 peak Ⅸ에 대한 compound를 GC-MS로 분석한 결과 peak Ⅸ에서는 isobutyl isopentanoate가 있는 것으로 추정되었다.
우리나라 야산에서 쉽게 구할 수 있는 구황 식물인 질경이를 메탄올과 여러 용매로 추출하여 식품 부패 미생물에 대한 항균력을 실험하고 그 항균활성 물질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 질경이의 메탄올 추출물은 2000$\mu\textrm{g}$/ml 농도에서 B. subtilis 및 V. parahaemolyticus의 증식을 100% 억제하였다. 그리고 질경이의 ethylacetate 분획물은 1000$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 5종의 모든 실험 균주에 대하여 8.5~11mm 크기의 clear zone을 형성하여 가장 높은 항균력을 보였다. 질경이의 ethylacetate 분획물을 silica gel column chromatography와 TLC로 분리하여 얻은 fraction을 5가지 실험 균주에 대하여 항균 실험을 한 결과 3rd 분획물 중 4번째 분획물이 250$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 모든 균주에 대하여 10 mm 이상의 clear zone을 나타내었다. 항균력을 보인 질경이의 ethylacetate 3rd fraction No. 4를 HPLC로 단일 분리하여 얻은 peak IV로 부터 $^1$H-NMR 및 GC-MSD로 동정한 결과 hexadecanoic acid로 동정되었다.
The ethanol extract of leaf mustard(Brassica juncea) exhibiting high antimicrobial activities was fractionated in the order of hexane, chloroform, ethylacetate and butanol fractions to test antimicrobial activity. The highest antimicrobial activity for the bacteria tested was found in the ethylacetate fraction, but a lesser extent in the butanol fraction. In contrast to antimicrobial activity for the bacteria, both ethylacetate and butanol fractions showed weak antimicrobial activity for yeasts. Unknown compound A in the ethylacetate fraction which exhibited a strong antimicrobial activity was isolated by silica gel column chromatography and HPLC, and exhibited 9 times more antimicrobial activity than the ethylacetate fraction.
The protective effects of the ethylacetate fraction of persimmon leaves(PEF) against experimentally induced gastric mucosal damage and gastric ulcers were evaluated in ratss. In prophylatic study, 100 mg/kg ethylacetate fraction of persimmon leaves (PEFH) exhibited a total protection of 73.8% and 65.7% against HCl-ethanol and 0.2N NaOH-induced gastric mucosal membrane lesions, respectively, which was superior to cimetidine 50 mg/kg, a commonly used anti-ulcer drug. PEFH showed excellent anti-ulcer effects against pylorus ligation induced gastric ulcers, compared to the control group, however, 50 mg/kg ethylacetate fraction of persimmon leaves (PEFL) and PEFH did not affect ulcers induced by water immersion stress, and that is inferior to cimetidine 50 mg/kg. In conclusion, the results suggest that the ethylacetate fraction of persimmon leaves can be used both in prevention and treatment of experimentally induced gastric mucosal damage and ulcers.
최근 식품 산업의 발달로 장기간 식품 보존을 위하여 합성 보존제의 사용이 크게 증가하고 있는 실정이다. 그러나, 인체에 대한 유해성이 문제로 대두되면서 이를 대체할 천연 보존제의 개발이 절실히 요고되고 있는 실정이다. 따라서 본 연구는 우리나라 야산에서 쉽게 구할 수 있는 구황 식물인 민들레를 메탄올과 여러 용매로 추출하여 식품부패 미생물에 대한 항균력을 실험하고 그 항균 활성 물질을 분석하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 민들레의 메탄올 추출물은 $2000\mu\textrm{g}/ml$ 농도에서 s. aureus를 완전히 억제하였고, L. monocytogenes는 98.43% 억제하였다. 그리고 민들레의 ethylacetate 분획물은 $1000\mu\textrm{g}/disc$ 농도에서 5종의 모든 시험균주에 대하여 clear zone을 형성하여 가장 높은 항균력을 보였다. 민들레의 ethyl-acetate 분획물을 silica gel column chromatography와 TLC를 통해 분리하여 얻은 fraction을 5가지 시험균주에 대한 항균 실험 결과 3번째 3rd fraction의 항균력이 가장 높아 $250\mu\textrm{g}/disc$ 농도에서 E. coli를 제외한 모든 균주에 대하여 14mm 이상의 clear zone을 나타내었다. 항균력을 보인 민들레의 ethylacetate 분획의 3번째 3rd fraction을 먼저 HPLC로 분리하여 얻은 peak II로부터 $^{l}H-NMR$ 및 GC-MS로 분석한 결과 benzoic acid로 동정 되었다.
본 연구에서는 연근의 유용자원으로의 이용 가능성을 알아보기 위하여, 연근 추출물을 제조하여 in vitro 에서 합성항산화제로 널리 알려진 BHT와의 비교 측정하기 위하여 연근 에탄올 추출물의 각 분획별 항산화력 활성을 검토하였다. 연근 분획물의 항산화성을 알아보기 위하여 DPPH radical에 대한 자유기 소거능, Rancimat에 의한 항산화지수, 아질산염 소거능, 지질과산화물 생성 억제효과 등을 측정하였고, 총 polyphenol 함량을 측정하였다. 그 결과 연근 에탄올 추출물의 수율은 9.14% 이었고, 연근 에탄올 추출물의 계통 분획한 수율은 n-butanol이 가장 높았으며, 다음으로는 water, eth-ylacetate, chloroform, n-hexane 순이었다. 연근 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 0.306 mg/ml이었고, 각 분획물 중 ethylacetate 분획물이 0.843 mg/ml로 가장 많이 함유된 것으로 나타났다. DPPH radical에 대한 소거능을 측정한 결과 ethylacetate 분획물이 15.69 ${\mu}g/ ml$로 가장 강한 소거능을 나타내었으며, 합성항산화제 BHT의 15.38 ${\mu}g$/ml 와 유사한 효과를 나타내었다. Rancimat의 지질 산패도 유도기간에 따른 항산화력 비교에서도, ethylacetate 분획물이 가장 길었으나 양성대조군인 BHT의 유도기간에 비하여 짧게 나타났다. 아질산염 소거능은 pH 1.2에서 가장 우수하였으며, pH 1.2에서 ethylacetate 분획물이 88.33%로 합성항산화제인 BHT와 비슷한 아질산염 소거능을 나타내었다. 지질과산화물 생성 억제효과도 ethylacetate 분획물이 87.23%로 가장 우수하였다. 전체적으로 연근 ethylacetate 분획물은 BHT와 유사한 항산화 활성을 나타내었다. 연근 추출물은 in vitro 항산화 실험에서 항산화 활성을 나타내는 생리활성 성분이 존재하는 것으로 볼 수 있으므로 천연 항산화제로서의 가능성을 시사하였다.
This study was performed to define the cytotoxicity and the anti-inflammatory action of Pulsatilla koreana extracts. To analyze cytotoxic effects, gingival and periodontal ligament fibroblasts were used, and anti-inflammatory actions related to reduction of $IL-1{\beta}$ and $PGE_2$ production were performed in vitro, for the suggestion of efficacy and safety on periodontal therapeutic use of Pulsatilla koreana extracts. We extracted ethylacetate and butylalcohol from well-dried and ground Pulsatilla koreana throughout multiple processing, then used different concentration solution(0.1 %, 0.2 %, 0.4 %, 0.01 %, 0.02 %, 0.04 %, 1 %, 2 %) of ethylacetate and butylalcohol extracts to examine eytotoxic effects and anti-inflammatory actions Cytotoxic effects were examined by ELISA reader using MTT(Methyl Thiazol-2-YL-2, 5-diphenyl Tetrazolium bromide)solution following culture of human gingival and periodontal ligament fibroblasts. Synthesis of $IL-1{\beta}$was examined by $IL-1{\beta}$ enzyme-immunoassay(EIA)system after separation and culture of monocyte, and $PGE_2$ was examined by $PGE_2EIA$ system after culture of gingival fibroblasts. The results were as follows: 1. In the MTT test of gingival fibroblasts, the change of optical density was decreased significantly at 2 % of butylalcohol extracts and 0.04 %, 0.1 %, 0.2 %, 0.4 %, 1 %, 2 % of ethylacetate extracts.(p<0.05) 2. In the MTT test of periodontal ligament cells, the change of optical density were not differ significantly. but butylalcohol and ethylacetate extracts except from butylalcohol 0.01 % showed high cell cytotoxity. 3. Both ethylacetate and butylalcohol extracts from Pulsatilla koreana inhibited the synthesis of $IL-1{\beta}$and inhibition effect of ethylacetate extracts were higher than butylalcohol extracts. 4. Both ethylacetate and butylalcohol extracts from Pulsatilla koreana inhibited the synthesis of $PGE_2$, and ethylacetate extracts were higher than butylalcohol extracts. In conclusion, ethylacetate and butylalcohol extracts from Pulsatilla koreana showed little cell cytotoxity for gingival and periodontal ligament fibroblasts, and the inhibition of $IL-1{\beta}$ and $PGE_2$ sysnthesis, therefore it is considered that these extracts can be developed as the therapeutics of the periodontal disease.
약모밀(Houttuynia cordata)의 뿌리에서 추출한 ethanol, chloroform, ethylacetate, butanol 및 수용성 추출물의 항균활성을 9 종의 Gram 양성균과 13 종의 Gram 음성균에 대하여 disc diffusion 방법으로 조사하였다. Ethanol, ethylacetae, butanol 추출물은 B. megaterium C. xerosis, S. aureus, S. epidermidis 및 E.coli 에 대하여 항균활성을 나타내었고, chloroform과 수용성 추출물은 활성이 나타나지 않거나 미약하였다. 그러나 Ethylacetate와 butanol 추출물은 상대적으로 낮은 농도에서 강한 항균활성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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