• 한국식품영양과학회지
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• 제30권5호
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• pp.943-948
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• 2001

마우스 뇌조직에서 지질과산화를 막아주는 것으로 알려진 청겨자채에 대해서 50%MeOH 추출물(2mg/mL)을 사용하여 소 뇌조직의 산화적스트레스를 유발한 ascorbate/Fe$^{3+}$ system에서 항산화 활성을 조사하였다. 청겨자채 추출물의 용매순차추출 후 TBARS 활성을 각각 용매 분획(100)$\mu\textrm{g}$/mL)별로 확인한 결과 각각의 용매 분획 중 n-BiOH 분획 (49%)이 가장 높았고, EtOAc(40%), H$_{2}$O(9%) 및 n-hexane (0%) 순이었다. n-BuOH 분획을 silica gel column chroma-tography를 반복하였으며, CE, TLC를 통해서 sinapic acid와 ferulic acid를 확인하였다. CE를 통하여 그 함량을 정량한 결과, 건조중량(g)당 sinapic acid는 24.3 ppm 이었고 ferulic acid는 42.8 ppm으로 나타났다. 최종 정제활성물질을 $^{1}$J-NMR(CDCL$_{3}$)와 $^{13}$C-NMR(CDCL$_{3}$)로 확인하였으며 sinapic acid methyl ester, ferulic acid acid와 ferulic acid와 RF치가 일치하는지 여부를 TLC상에서 비교하였다. 동일한 50$\mu\textrm{g}$/mL 농도에서 sinapic acid methyl ester는 40%, ferulic acid methyl ester 는 35%의 항산화 활성을 나타내었으며 이것은 시판되는 표준물질은 sinapic acid(22%)와 ferulic acid (18%)에 비해 약간 높게 나타났다. 이것은이 화합물에 라디칼을 소거하는 작용기와 관계가 있는 것으로 여겨진다. 청겨자채 추출물 중에도 항산화 활성이 비교적 널리 분포된 것으로 보아 이 성분들은 체내에서 단독으로 또는 상호작용으로 항산화 작용을 나타낼 것으로 예상된다.

• 대한화장품학회지
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• 제50권1호
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• pp.85-93
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• 2024

본 연구에서는 산해박(Cynanchum paniculatum)을 이용하여 에틸아세테이트로 분획물을 제조하고, 지표물질 페오놀(paeonol)의 구조와 함량을 확인하였다. 산해박은 n-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol, distilled water를 사용해서 순차적 용매 분획을 시행하여 분획물을 획득하였고, 에틸아세테이트(EtOAc)에서 가장 높은 paeonol 함량을 보였다. 산해박 에틸아세테이트 분획물(EA)의 구조는 nuclear magnetic resonance (NMR)을 통해서 확인하였고, 함량은 high performance liquid chromatography (HPLC) 분석을 통해 확인하였다. 산해박 에틸아세테이트 분획물(EA)의 항산화 활성 효과를 검증하기 위해 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline6-sulphonic acid) (ABTS) 소거능을 통해서 확인하였으며, 염증 완화 효과를 검증하기 위해 lipopolysaccharide (LPS)로 염증반응을 유도시킨 RAW 264.7 세포에서 nitric oxide (NO) 생성 억제능을 확인한 결과, 농도 의존적으로 NO 생성을 저해함을 확인하였다. 추가적으로, ultraviolet B (UVB)에 의해 유도된 MMP-1 생성량은 산해박 에틸아세테이트 분획물(EA)의 농도 의존적으로 감소하였고, 프로콜라겐(procollagen type-I) 생성 능력은 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 또한 산해박 에틸아세테이트 분획물(EA)을 함유한 화장품 제형을 이용하여 임상시험을 실시한 결과, 눈가 주름 개선 효과를 확인하였다. 이를 통하여 산해박은 항산화 및 항노화 효과를 가지는 천연 기능성 화장품 소재로 사용이 가능할 것으로 기대된다.

• 한국산림과학회지
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• 제95권4호
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• pp.429-434
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• 2006

독일가문비(Picea ahies Karsten) 잎을 채취하여 건조시킨 후 분쇄하여 1.5 kg을 acetone-$H_2O$(7:3, v/v)로 추출하고 핵산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 물 가용부로 분획하여 동결건조 시켰다. 에틸아세테이트 및 물 가용부를 Sephadex LH-20으로 충진한 칼럼에서 MeOH와 EtOH-n-hexane 혼합액을 용출용매로 사용하여 칼럼크로마토그래피를 실시하였다. 단리된 화합물들은 셀룰로오스 박층크로마토그래피(TLC)로 확인한 후 $^1H$-, $^{13}C$-NMR 등의 스펙트럼을 사용하여 정확한 구조를 규명하였고 FAB 및 El-MS로써 분자량을 측정하였다. 독일가문비 잎의 에틸아세테이트 가용부에는 (+)-catechin(화합물 I), (-)-epicatechin(화합물 II), kaempferol-3-O-${\beta}$-D-glucopyranoside(화합물 III), 4-hydroxyacetophenone(화합물 IV)가 분리되었으며 물 가용부에서는 (+)-catechin(화합물 I)과 protocatechuic acid(화합물 V)가 분리되었다. 각 분획물 및 단리된 화합물들은 DPPH 라디칼 소거법을 이용하여 항산화 시험을 실시하였으며, 분획물중에는 에틸아세테이트 가용부, 그리고 화합물중에는 (T)-catechin과 (-)-epicatechin에서 기준물질과 유사한 우수한 항산화 효능이 있는 것으로 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제51권3호
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• pp.223-227
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• 2008

사자발쑥의 지상부를 80% MeOH용액으로 추출하고, 얻어진 추출물을 EtOAc, H-BuOH 및 $H_2O$로 용매 분획 하였다. 이 중 EtOAc 분획으로부터 silica gel과 octadecyl silica gel(ODS), Sephadex LH-20 column chromatography로 정제하여 4종의 triterpenoid를 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여 wrightial(1), wrightial acetate(2), 27-norcycloart-20(21)-ene-25-al-3${\beta}$-ol acetate(3) 및 ursolic acid(4)로 동정하였다. 이 화합물들은 사자발쑥에서 처음으로 분리 보고 되었으며 특히, 화합물 3은 천연에서 처음으로 분리 보고 되었다. 또한 이번에 분리한 화합물에 대하여 항고지혈증 활성을 측정한 결과 화합물 1은 ACAT1과 ACAT2 효소에 대한 $IC_{50}$ 값이 33 ${\mu}g/ml$와 45 ${\mu}g/ml$로 나타났고, 화합물 2는 ACAT1 효소에 대하여 $IC_{50}$ 값이 12 ${\mu}g/ml$로 나타났다. 화합물 3은 ACATI 효소에 대하여 $IC_{50}$값이 16 ${\mu}g/ml$으로 나타났다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제7권2호
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• pp.83-89
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• 1992

정향의 mathanol 추출물로 HCI-ethanol 위손상 실험을 하여 그 방어 효과를 확인하고 이를 계통 분획한 후 각 분획에 대한 HCI-ethanol 위손상실험, 기초위액 분비실험, indomethancin 위손상실험, acetic acid 궤양 실험을 하여 추출물에 대한 급성독성과 급.만성위염 및 위손상에 대한 실험한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) $LD_{50}$은 경구투여시 3000 mg/Kg 이사이었다. (2)HCL.ethanol 위손상실험에서 EtOAc fr. 165mg/Kg과 BuOH fr. 215mg/Kg에서 손상의 크기를 유의성있게 감소시켰다. (3) Acetic Acid 궤양 실험에서 위궤양의크기가 BuOH 분획 215mg/Kg으로 유의성 있게 감소되었다. 이상의 결과로서 생각은 급만성 위염 및 위손상에 대한 세포보호 작용이 있으며 그 작용기전은 위액분비의 억제작용에 인한 것이며 그 유효성분은 대부분 butanol 분획에 존재하는 것으로 생각된다.

• 생명과학회지
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• 제8권5호
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• pp.473-478
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• 1998

본 연구에서는 된장의 기능성 중에서 대두, 메주, 된장의 발효과정을 거치는 동안 항산화 효과와 아질산염 소거 효과의 변화 추이를 고찰하기 위해 DPPH radical 소거능과 아질산염 소거능을 통한 된장의 활성을 시험하였다. 대두, 메주 및 된장은 methanol extract를 계통 추출법에 의거하여 여러 가지 용매를 사용하여 분획하였으며, 각 분획에 대한 활성실험을 행하였다. MeOH ext.로 본 항산화 효과는 된장〉메주〉대두의 순으로 나타났고, 메주와 대두 간의 효과의 차는 거의 없었다. 아질산염 소거효과는 된장〉대두〉메주의 순을 보였고, 래디칼 소거능보다 아질산염 소거능이 더 효과적으로 나타났다. Ethyl acetate 분획에 있어 항산화 효과가 켰으며, 특히 아질산염의 소거 효과는 L-ascorbic acid의 효과를 상회하였다.이에 된장의 ethyl acetate 분획을 반복 정제하여 genis-tin, daidzein, genistein을 분리하였으며, 이는 된장의 항산화 및 아질산염 소거 효과를 나타내는 활성 물질들은 대두중의 페놀성물질에서 크게 벗어나지 않음을 알 수 있었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권5호
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• pp.1063-1070
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• 2009

Dangyuja (Citrus grandis Osbeck) is a native plant growing only on Jeju Island in Korea. In this study, antiinflammatory effect of dangyuja leaves on a murine macrophage cell line was investigated. RAW 264.7 murine macrophage cells were stimulated with lipopolysaccharide (LPS, $1{\mu}g/mL$) to induce expression of pro-inflammatory markers [interleukin (IL)-6 and inducible nitric oxide synthase (iNOS)]. The crude extract (80% MeOH Ex.) and solvent fractions (hexane, $CHCl_3$, EtOAc, BuOH, and $H_2O$ Ex.) were obtained from dangyuja leaves. The $CHCl_3$ fraction inhibited the nitric oxide (NO) and IL-6 production in a dose-dependent manner. Also, the $CHCl_3$ fraction inhibited mRNA expression and protein levels of iNOS in a dose-dependent manner. Furthermore, the $CHCl_3$ fraction inhibited LPS-induced nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ activation and phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs: ERK, JNK, and p38). These results suggest that dangyuja leaves may inhibit LPS-induced production of inflammatory markers by blocking NF-${\kappa}B$ and MAPKs signaling in RAW 264.7 cells.

• 한국식품영양학회지
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• 제18권4호
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• pp.367-372
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• 2005

밤나무 잎에 함유된 기능성 물질 검색의 일환으로 항미생물 효과를 검정하고 활성물질의 분석을 시도하였다. 예비실험을 통해 추출물의 활성을 확인한 후 시료를 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차 추출하여 정제한 다음 활성이 강한 MeOH 분획의 0.2 g, 0.5 g에 해당하는 추출물로 13종의 미생물에 대해 활성을 측정한 결과, Cram 양성 세균 중에서 S. aureus와 S. epidermidis는 대조구로 사용한 benzoic acid보다 강한 활성이 나타났고, M. luteus와 L. mesenteroides, B. subtilis에서도 활성이 인정되었으며, Gram 음성 세균인 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa에서도 강한 활성이 나타나 밤나무 잎 추출물은 비교적 넓은 항균 spectra와 활성이 있음이 확인되었다. 이에 활성물질을 규명하고자 시료를 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등으로 정제하고 활성이 나타난 산성 획분과 페놀성 획분의 물질을 분리한 후 MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등으로 분석한 결과, 산성 획분에서는 stigmast- 5-en-3-ol($\beta$-sitosterol)이 활성을 갖는 물질로 나타났다.

• 대한한방소아과학회지
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• 제30권3호
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• pp.1-30
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• 2016

Objectives Previous studies have found out that Forsythiae Fructus (FF) extracts have anti-atopic activities by in vitro experiment. In order to understand more about FF extracts' benefit, we subdivided FF extracts depending on systematic fractionation method by using Methylene chloride (MC), Ethyl acetate (EtOAc), n-BuOH and n-hexane (n-Hx). This study is designed to examine the effect of FF fractions on the PMA- ionomycin-induced activation of RBL-2H3 mast cell lines in vitro and on the DNCB-induced activation of NC/Nga mice in vivo. Methods For this study, we examined IL-4, IL-13 production by ELISA analysis, IL-4, IL-13, IL-31, IL-31RA and TNF-${\alpha}$ mRNA expression by real-time PCR and manifestations of AP-1 and MAPKs transcription factors by western blotting in vitro. Through in vitro experiment, we selected FF n-BuOH fraction that seems the best effective in atopic dermatitis then induced it on NC/Nga mice by DNCB. We measured mice's WBC, eosinophil and neutrophil in heart blood, IL-4, IL-5, IFN-${\gamma}$ in the spleenocyte culture supernatant, the absolute cell numbers of CD4+, CD8+, B220+CD23+, CD3+CD69+ and Gr-1+CD11b+ in the PBMCs, ALN and dorsal skin, IL-5, IL-13, IL-31, IL-31RA in the dorsal skin by real-time PCR and the distribution of immune cells by H&E on dorsal skin and ANL and toluidine blue staining on dorsal skin. Results FF n-BuOH fraction suppressed IL-4, IL-13 production and mRNA expression of IL-4, IL-13, IL-31, IL-31RA and TNF-${\alpha}$. Results from the western blot analysis showed that FF n-BuOH fraction reduced the activation of the mast cell specific transduction factors involved in AP-1 by suppressing JNK and ERK phosphorylation. In the gross, atopic dermatitis induced by DNCB in NC/Nga mice were improved by oral administration of FF n-BuOH fraction. Oral FF n-BuOH fraction also decreased the level of IgE in mice's serum and the level of IL-4 and IL-5 in the spleenocyte culture supernatant, cell numbers of CD8+, B220+CD23+ in the PBMCs, CD4+ in the ALN and CD4+, Gr-1+CD11b+ in the dorsal skin and suppressed mRNA expression of IL-5, IL-13, IL-31, IL-31RA in the dorsal skin. Histological examination showed that infiltration levels of immune cells in atopic dermatitis induced NC/Nga mice were improved by FF n-BuOH fraction. Conclusions FF n-BuOH fraction can reduce pruritus by suppressing IL-31, IL-31RA secretion and modulate molecular mediators and immune cells associated with atopic dermatitis induced in NC/Nga mice which may have played a significant role in recovering atopic dermatitis symptoms.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제7권4호
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• pp.371-376
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• 1999

By cytotoxicity screening of the 65 Korean medicinal plants against leukemia L1210 and P388D$_{1}$ cell line using the MTT assay in vitro, Albizzia julibrissin was studied. This plant was extracted with MeOH and MeOH extract was solvent-fractionated with CHCl$_{3}$, EtOAc and n-BuOH in sequence. Each fraction by various solvents system was purified by column chromatography and preparative TLC, and four compounds were isolated. The structure of each compound was deduced from UV, IR, $^{1}$H-HMR, $^{13}$ C-NMR and CI-MS spectral data. The cytotoxic activity ($IC_{50}$/_ of the compounds, quercetin-3-rhamnoside, 4',5,7-trihydroxyfla-van-3-glucoside, spinasterol-3-glucoside and acacic acid lactone, were evaluated as 5 $\mu\textrm{g}$/ml, 2$\mu\textrm{g}$/ml, 1 $\mu\textrm{g}$/ml against L1210 and as 9$\mu\textrm{g}$/ml, 10$\mu\textrm{g}$/ml, 1.5 $\mu\textrm{g}$/ml, 1.5 $\mu\textrm{g}$/ml and 0.9 $\mu\textrm{g}$/ml against P388D$_{1}$, respectively.