The detection properties of gamma-irradiated (0~10 kGy) dried seaweed, dried shrimp, and seasoned dried filefish were investigated by photo-stimulated luminescence (PSL) and electron spin resonance (ESR). PSL could be used as a detection method on irradiated dried seaweed and dried shrimp as they showed photon counts greater than 5,000 counts/60 s (positive) in the irradiated samples with doses above l kGy. However, PSL could not be applied to detect irradiated seasoned dried filefish, because gamma-irradiated sample at 10 kGy even yielded photon counts less than 700 counts/60 s (negative). The ESR spectroscopy for only dried shrimp revealed specific signals derived from free radicals captured in the shell of shrimp. As a result, it is considered that PSL or ESR methods for detection of gamma-irradiated dried shrimp and only PSL can be used to detect gamma-irradiated seaweed. Furthermore, it is considered that hydrocarbon analysis of seasoned dried filefish containing fat by GC/MS and Thermo Luminance (TL) analysis of dried seaweed should be studied for detection of irradiation.
The antioxidative effect of Ecklonia cava, a brown marine alga, was investigated on radical scavenging, including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and hydroxyl and alkyl radicals, using an electron spin resonance (ESR) technique, and on the inhibition of $H_2O_2$-induced DNA damage using comet assay. E. cava was enzymatically hydrolyzed with five food industrial proteases (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex) to prepare water-soluble extracts. All the proteolytic hydrolysates exhibited strong dose-dependent radical scavenging activities (above 80%) at a concentration of $2.5\;{\mu}g/mL$. Kojizyme extract (obtained by proteolytic hydrolysation of E. cava with Kojizyme) showed the highest hydroxyl radical scavenging activity of around 98%. In addition, the $H_2O_2$-induced DNA damage was determined using a comet assay, which was quantified by measuring the tail length. Reduction of DNA damage increased with increasing concentrations of Kojizyme extract from E. cava. These results indicated that E. cava has a potential as a valuable natural antioxidative source.
Tabarestani, Sanaz;Ghaderian, Sayyed Mohammad Hossein;Rezvani, Hamid
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권17호
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pp.7997-8002
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2015
Gene amplification is an important mechanism in the development and progression of cancer. Currently, gene amplification status is generally determined by in situ hybridization (ISH). Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) is a PCR-based method that allows copy number detection of up to 50 nucleic acid sequences in one reaction. The aim of the present study was to compare results for HER2, CCND1, MYC and ESR1 gene amplification detected by MLPA with fluorescent in situ hybridization (FISH) and chromogenic in situ hybridization (CISH) as clinically approved methods. Tissue samples of 170 invasive breast cancers were collected. All were ER positive. Tissue samples had previously been tested for HER2 using immunohistochemistry. Amplification of the selected genes were assessed using MLPA, FISH and CISH and results were compared. HER2 MLPA and ISH results were also compared with HER2 immunohistochemistry (IHC) which detects protein overexpression. Amplification of HER2, CCND1, MYC and ESR1 by MLPA were found in 9%, 19%, 20% and 2% of samples, respectively. Amplification of HER2, CCND1, MYC and ESR1 by FISH was noted in 7%, 16%, 16% and 1% of samples, respectively. A high level of concordance was found between MLPA/FISH (HER2: 88%, CCND1: 88%, MYC: 86%, ESR1: 92%) and MLPA/CISH (HER2: 84%). Of all IHC 3+ cases, 91% were amplified by MLPA. In IHC 2+ group, 31% were MLPA amplified. In IHC 1+ group, 2% were MLPA amplified. None of the IHC 0 cases were amplified by MLPA. Our results indicate that there is a good correlation between MLPA, IHC and ISH results. Therefore, MLPA can serve as an alternative to ISH for detection of gene amplification.
Three physical methods, photostimulated luminescence (PSL), thermoluminescence (TL), and electron spin resonance (ESR), have been applied to detect the irradiation treatment for the non- and steamed sesame seed samples. PSL successfully screened the irradiated samples from the non-irradiated control by comparing their photon counts (PCs) with the lower (less than 700 count/60 sec) and upper threshold values (higher than 5,000 count/60 sec). TL signals were still detected in all irradiated samples even after steaming, which was reconfirmed with TL ratios [integrated area of $TL_1$ (the first glow)/$TL_2$ (the second glow)] through re-irradiation step. ESR spectrometry showed that radiation-induced cellulose radicals were detected in all the irradiated samples irrespective of steaming treatment. Identification of the irradiated sesame seeds was possible even after steaming by analyzing PSL, TL, and ESR.
현재 사용되고 있는 물리적 확인시험법인 광자극발광법(PSL), 열발광분석법(TL), 전자스핀공명법(ESR)을 이용하여 4종의 시료에 대해 감마선과 전자선에 의한 확인시험법의 판별 특성을 확인하였다. PSL 측정 결과 고춧가루, 바질, 파슬리 시료는 선원 및 선량에 관계없이 조사된 시료는 photon count 값(PCs)이 5,000 이상인 7,004-70,519의 PCs로 측정되어 조사여부의 판정이 가능하였다. 하지만 조사된 후춧가루에서는 선원에 관계없이 threshold value가 5,000 이하인 442-1,572 PCs로 중간값 및 음성값을 나타냄에 따라 조사여부 확인이 어려웠다. TL 측정 결과에서는 고춧가루, 바질, 파슬리, 후춧가루 4종 모두 선원 및 선량에 관계없이 조사된 시료는 $150-250^{\circ}C$ 사이에서 최대 glow curve peak가 나타났다. 또한 TL ratio값이 0.1 이상인 0.101-0.889을 나타내어 조사여부 판정이 가능하였다. ESR 측정 결과에서는 고춧가루만이 cellulose 유래의 signal을 보이면서 방사선 조사여부를 판정할 수 있었다. 다른 3종 시료에서는 single line signal을 나타내어 ESR 판정이 어렵다는 것이 확인되었다. 따라서 전자선조사 향신료에서도 현행 물리적 판별방법으로 조사 여부 확인이 가능하였으며, false 값에 대한 이유를 밝히는 연구가 추가적으로 수행되어야 할 것으로 사료된다.
ESR spectroscopy를 이용하여 방사선 조사된 국내산 참깨와 들깨, 수단산 참깨에서 생성된 라디칼 농도에 조사선량과 저장기간이 미치는 영향을 조사하였다. 시료를 50 g씩 pyrex tube에 넣고 밀봉하여 0, 1, 5 및 10 kGy의 Co-60 감마선을 조사하고 각각의 시료를 직경 4 mm의 ESR 석영튜브에 120 mg씩 넣은 후 상온에서 4주간 보관하면서 일정기간에 따라 Bruker-EPR spectrometer를 이용하여 ESR 신호를 측정하였다. 실험결과 조사 직후 감마선 조사된 국내산 참깨와 들깨, 수단산 참깨는 비조사시료와 비교하여 조사시료의 신호 크기가 매우 커서 비조사시료와 쉽게 구별할 수 있었다. 적용선량의 범위에서$(1{\sim}10\;kGy)$ 조사선량이 증가함에 따라 라디칼 농도는 비례적으로 증가하였으며, 선량의 증가에 따른 라디칼 농도의 증가를 나타낸 $R^2$는 $0.9926{\sim}0.9994$의 높은 값을 나타내었다. 국내산 참깨와 들깨, 수단산 참깨의 라디칼 신호는 4주간의 저장 후에도 관찰할 수 있어 ESR spectroscopy를 이용한 국내산 참깨와 들깨, 수단산 참깨의 방사선 조사여부 판별은 4주간의 저장 후에도 측정 가능한 방법임을 알 수 있었다.
건고추의 방사선 조사 여부 판별법을 연구하고자 부위별(분말, 과피, 씨, 줄기) 전자스핀공명(ESR)을 분석한 결과, 조사시료에서는 비조사 시료에서 볼 수 없었던 cellulose radical에 의해 생성되는 한 쌍의 peak가 6 mT의 간격을 두고 signal을 보여주었다(g=2.024, 2.006, 1.987). ESR signal은 조사 선량의 증가에 따라 크기가 비례적으로 증가하였다. ESR signal은 실온 저장 12주 후에도 측정이 가능하였다. GCMS에 의해 고춧가루 지방질로부터 hydrocarbon류를 검출한 결과, 조사 시료에서는 비조사 시료에서 검출되지 않은 1-tetradecene(14:1), 1,7,10-hexadecatriene(16:3), 1,7-hexadecadiene(16:2), 1-hexadecene(16:1), 6,9-heptadecadiene (17:2), 8-heptadecene(17:1) 등의 hydrocarbon류가 검출되었고 저장 8개월까지도 검출이 가능하여 방사선 조사 marker로써의 활용가능성을 확인하였다.
곡류 및 전분류, 채소 및 과일류, 생선, 육류 및 콩류 및 향신류 등의 시료에 대한 감마선 조사에 의한 검지 특성을 물리적 검지 방법인 photostimulated luminescence (PSL), electron spin resonance (ESR) 및 thermoluminescence (TL) 분석을 통하여 검지 가능성을 확인하였다. PSL 분석 결과 곡류 및 전분류 시료군 가운데 옥수수 전분, 소맥분과 채소 과일류 시료군의 미역 등의 시료는 비 조사군(negative, ${\leq}700$)으로 판정되었으며, 생선, 육류 및 콩류 시료군의 흰 강낭콩 추출분말 및 향신료 시료군의 칠리 파우더를 포함한 9종의 시료는 감마선 조사군(positive, ${\geq}5000$)으로 판정되었다(전체 시료의 3.2%). 이외에 39종의 시료군에서는 방사선 조사 가능성이 있는 700~5,000 범위의 photon counts (intermediate)를 나타내었다(전체 시료의 15.6%). 이들 시료에 대한 TL 분석 결과, 칠리 파우더를 비롯한 미네랄이 분리된 5종의 시료에서는 $150{\sim}250^{\circ}C$ 전후에서 TL glow curve ($TL_1$)을 나타내어 감마선 조사 여부의 확인이 가능하였다. ESR 분석 결과 2차 검증 시료군에서 방사선 유래 특이적인 signal이 관찰되지 않아서 추출물 시료에는 ESR 분석법의 적용이 불가능한 것으로 나타났다.
직류 ESR(Electro Slag Remelting)장치를 이용하여 타이타늄 스크랩의 재용해 및 정련에 관한 기초연구를 수행하였다. 비소모성 양극으로는 흑연봉을, 슬래그로는 $CaF_2-TiO_2$계를 사용하였다. 재용해한 타이타늄 잉곳의 형상 및 산소 함량에 미치는 슬래그 조성의 영향을 검토하였다. $CaF_2-TiO_2$계 슬래그에서는 잉곳 내부에 슬래그의 혼입이 없는 매우 양호한 형상의 타이타늄 잉곳이 형성되었으며, 산소 함량도 타이타늄스크랩보다 낮은 값을 나타내었다. $CaF_2-TiO_2$계 슬래그에 CaO를 첨가한 경우 잉곳 내부에 슬래그가 혼입되었으며, 산소 농도도 Ti 스크랩 보다 높은 값을 나타내었다.
Two redox processes of methyl viologen (+2/+, +/0) in acetonitrile were investigated by using channel electrode voltammetric and in situ electrochemical ESR methods. Two separated unequal plateau currents of the first (+2/+) and second (+/0) redox processes of the viologen were observed in the channel electrode voltammograms and showed a cube-root depedndence on the electrolyte flow rate, respectively. The simple Levich analysis resulted in two different diffusion coefficients of $D_{+2}=2.2{\times}10^{-5}\;cm^2/s$ and $D_+=3.0{\times}10^{-5}cm^2/s$ from the limiting currents. In situ electrochemical ESR studies were performed for the monocation radicals generated at the potentials of the two plateau currents in the electrolyte flow range $1.3{\times}10^{-1}{\geq}v_f{\geq}2.7{\times}10^{-3}\;cm^3/s$. Backward implicitfinite difference method was employed to simulate the electrochemical kinetic problem of two sequential electron transfers ($MV^{+2}+e{\leftrightarrows}MV^+,\;MV^{+}+e{\leftrightarrows}MV^0$) coupled with reversible comproportionation ($MV^{2+}+MV^0{{\leftrightarrows}^{k_f}_{k_b}}2MV^+$). $k_f$ was found to be greater than ($10^6M^{-1}s^{-1}.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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