To investigate the antigenicity and protective immunity of outer membrane protein H (OmpH) in Pasteurella multocida D:4, the recombinant OmpH protein was produced in Escherichia coli. The truncated and Trx-fused form of recombinant OmpH (53 kDa) was purified, and used as an antigen in the immunization and challenge experiment. The immunized mice with the recombinant OmpH produced a high-titer antibody, and had protective immunity against P. multocida as same level as the mice immunized with formalin-killed whole cell.
Kim, Hye Jin;Jang, Ha Na;Bae, Jeong Yun;Ha, Ji Hoon;Park, Soo Nam
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.42
no.4
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pp.386-392
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2014
The present study was aimed at investigating the antimicrobial activities of licorice's active ingredients. Four samples of licorice ingredients (glycyrrhizin, liquiritin, liquiritigenin, and isoliquiritigenin) were evaluated for their antimicrobial activities against six skin microorganisms. The bioassay applied for determining the antimicrobial effects employed a disc diffusion assay, the minimum inhibitory concentration, and the challenge test. The ingredients showed antibacterial activities. Especially, isoliquiritigenin has significant antimicrobial activities against two Gram-positive (Bacillus subtilis, Propionobacterium acnes) and two Gramnegative (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa) bacteria. These samples had much higher antimicrobial activities than synthetic preservatives. Our results reveal that liquiritigenin and isoliquiritigenin could be useful compounds for the development of antibacterial agents for the preservation of cosmetics and foods. The two flavonoids, liquiritigenin and isoliquiritigenin, sourced from Korea, China, Uzbekistan, were quantified using HPLC. The results demonstrated that Korean licorice has two flavonoids (liquiritigenin, isoliquiritigenin) in much higher quantities than was observed in the licorice obtained from the two other countries. Thus, isoliquiritigenin and Korean licorice extract represent new candidates for antimicrobial agents.
The present study was evaluated the antibacterial effect of the combination of $Coptidis$$rhizoma$, $Glycyrrhiza$$uralensis$ Fischet, $Schizandra$$chinensis$ and $Corni$$Fructus$(1:1:1) extracts(CGSC10). Furthermore, the effectiveness of CGSC10, sodium chlorate, and the combination of CGSC10 and sodium chlorate(CGSCS10) against $E.$$coli$ O157:H7 infection was studied using ICR female mice. During the incubation period, the dose of 5, 10, and 20% CGSC10 was inhibited the growth of $E.$$coli$ O157:H7 by 34.7, 60.2, and 76.4%, respectively. For 7 days after single challenge with $E.$$coli$ O157:H7, forty female ICR mice were divided into four experimental groups which were administered in drinking water with saline, 10% CGSC10, 15 mM sodium chlorate, and CGSCS10, respectively. On the 3rd day, the number of $E.$$coli$ O157:H7 in mouse feces was significantly decreased by administration of CGSC10, 15 mM sodium chlorate, and CGSCS10 ($p$ < 0.001). On the 7th day-after administration, CGSC10, sodium chlorate, and CGSCS10 were decreased the number of $E.$$coli$ O157:H7 by 27.1, 67.7, and 83.3%, respectively. According to the results of the present study, administration of CGSCS10 to mice can reduce the severity of $E.$$coli$ O157:H7 infection. In addition, it is suggested that CGSCS10 represents a good candidate for the treatment of enteric infections in domestic animals.
FaeG is the key factor in the infection process of K88ad enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) fimbrial adhesin. In an attempt to determine the possibility of expressing recombinant FaeG with immunogenicity for a new safe and high-production vaccine in E. coli, we constructed the recombinant strain, BL21 (DE3+K88), which harbors an expression vector with a DNA fragment of faeG, without a signal peptide. Results of 15% SDS-polyacrylamide slab gel analysis showed that FaeG can be stably over-expressed in BL21 (DE3+K88) as inclusion bodies without FaeE. Immunoglobulin G (IgG) and M (IgM) responses in pregnant pigs, with boost injections of the purified recombinant FaeG, were detected 4 weeks later in the sera and colostrum. An in vitro villius-adhesion assay verified that the elicited antibodies in the sera of vaccinated pigs were capable of preventing the adhesion of K88ad ETEC to porcine intestinal receptors. The protective effect on the mortality rates of suckling piglets born to vaccinated mothers was also observed one week after oral challenge with the virulent ETEC strain, $C_{83907}$ (K88ad, $CT^+,\;ST^+$). The results of this study proved that the adhesin of proteinaceous bacterial fimbriae or pili could be overexpressed in engineered E. coli strains, with protective immune responses to the pathogen.
Background : Activation of neutrophil is critical for the clearance of microorganisms and toxic host mediators during sepsis. Unfortunately the activated neutrophil and its toxic byproducts can produce tissue injury and organ dysfunction. The leucocyte CD11/18 adhesion complex regulates neutrophil-endothelial cell adhesion, the first step in neutrophil migration to sites of injection and inflammation. To investigate the potential of neutrophil inhibition as a treatment strategy for sepsis, we evaluated the effects of monoclonal antibody against CD11b (MAb 1B6) in rats intrabronchial challenged with Escherichia coli. Methods : Animals were randomly assigned to receive monoclonal antibody against CD11b (1 mg/kg, sc) and bovine serum albumin(BSA, 1 mg/kg, sc) 6 hr before, at 0 and 6 hr after intrabronchial challenge of $20x10^9$ CFU/kg E. coli 0111. Animals were randomized to treat either 24, 60 or 90% oxygen after bacterial challenge and begining 4 hr after inoculation, all animals were received 100 mg/kg ceftriaxone qd for 3 days. Peripheral and alveolar neutrophil(by bronchoalveolar lavage) counts and lung injury parameters such as alveolar-arte rial $PO_2$ difference, wet to dry lung weight ratio and protein concentration of alveolar fluid were measured in survived rats at 12 hr and 96 hr. Results : Monoclonal antibody against CD11b decreased circulating and alveolar neutrophil especially more in 12 hr than in 96 hr The lung injury parameters of antibody-treated animals were not different from those of BSA-treated animals. but It was meaningless due to small number of survived animals. The early(6 hr) mortality rate was significantly increased in antibody-treated group(51%) compared to BSA-treated group(31%) (P=0.02) but late(from 12 hr to 72 hr) mortality rate was not different in antibody-treated group(44%) from BSA-treated group(36%) (P =0.089). Conclusion : Leucocyte CD11b/18 adhesion molecule is known to regulate neutrophil migration to the site of infection and inflammation. The monoclonal antibody against CD11b decreased alveolar neutrophil in rats with pulmonary sepsis and increased early mortality rate. Therefore, we can speculate that monoclonal antibody against CD11b blocks of alveolar recruitment of neutrophils, impairs host defense mechanism and increases early mortality rate of pulmonary sepsis in rat.
This study investigated the effects of chromium propionate on growth performance, serum traits and immune response in weaned pigs. Twenty-four 4 wk-old crossbred weanling pigs (initial body weight about 9.52${\pm}$0.48 kg) were randomly allotted into one of two groups, a control group (basal diet), chromium propionate group (diet supplemented with 200 ${\mu}g$$kg^{-1}$ (ppb) of chromium propionate). This experiment was conducted over nine weeks. Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) 100 ${\mu}g$$kg^{-1}$ BW was used as the stress-inducing agent in the middle (4 wks) and final (8 wks) periods. The experimental results indicated that chromium propionate had no effect on growth performance (p>0.05). Chromium propionate supplementation reduced the percentage of LDL+VLDL (low and very low-density lipoprotein) and increased HDL (high-density lipoprotein), but did not affect other serum traits. Pigs supplemented with chromium propionate had higher antibody titers specific for sheep red blood cells (SRBC) and serum total globulin relative to the control during the final period (p<0.05). A challenge with LPS increased white blood cells in the chromium propionate group in both experimental periods (p<0.05). The chromium propionate group exhibited higher IgG and $\gamma$-globulin than the control during the middle experimental period (p<0.05). Moreover, the PHA (phytohemagglutinin) challenge result in the chromium propionate group was better than the control group (p=0.056). Greater neutrophil activity was displayed than in the control (p<0.05). This suggests that chromium propionate supplementation benefited the weaned pigs in lipoprotein and immune response.
Kim, Hyun Woo;Jo, Ha Neul;Yoo, Byoung Wan;Kim, Ji Hyo;Lee, Tae Bum
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.26
no.4
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pp.308-316
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2018
Background: The Rosa multiflora, a well-known plant belonging to Rosacea, is widely used in orthodox medicine in worldwide. However, its biological activity and cosmetic preservative efficacy have not yet been studied. Thus, this species is yet to be defined as a functional cosmetic material. Accordingly, an investigation of the above mentioned atrributes was performed on a 50% ethanol extract of Rosa multiflora. Methods and Results: The antioxidant activity was assessed through free radical scavenging assays with 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). Additionally, the contents of total phenols and flavonoids were analyzed. The phenolic compounds were detected using HPLC. The antimicrobial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Candida albicans was assessed using the disc diffusion assay. The preservative effect (challenge test) on a formulation of soothing gel was performed for 28days. The DPPH radical scavenging ability, denoted by the $SC_{50}$ (half maximal inhibitory concentration for DPPH radical scavenging) value was found to be $131.63{\mu}g/m{\ell}$. The content of total polyphenol and flavonoid content were 202 mg/g and 86.77 mg/g, respectively. In additon, astragalin and gallic acid were identified in the extract. The antimicrobial activity of the extract against S. aureus and E. coli was observed to be 5 - 0.5%, and no significant activity was noted against C. albicans. The ethanol extracts (5% and 10%) met the preservation standards of the Cosmetics, Toiletry, and Fragrance Association (CTFA). Conclusions: Thus the ethanol extract of R. multiflora can be used in cosmetics as a natural preservative and antioxidant.
Kim, Hye Jin;Bae, Jeong Yun;Jang, Ha Na;Park, Soo Nam
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.41
no.3
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pp.358-366
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2013
The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activities of Glycyrrhiza uralensis and Glycyrrhiza glabra extracts with various countries of origin. Three samples of licorice with various origins (Korea, China, and Uzbekistan) were evaluated for their antimicrobial activities against six skin microflora. The bioassay applied for determining the antimicrobial effects included the disc diffusion assay, minimum inhibitory concentration, and challenge test. The ethyl acetate fractions of G. uralensis and G. glabra extracts showed significant antimicrobial activities against two gram-positive (Bacillus subtilis, Propionibacterium acnes) and two gram-negative (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa) bacteria. These samples had much more intensive antimicrobial activities than synthetic preservatives on B. subtilis, P. acnes, and P. aeruginosa, especially. Korean licorice showed the highest antimicrobial activity amongst the samples tested. In view of the observed inhibitory features of these G. uralensis and G. glabra extracts, it is suggested that they could be used as natural antiseptics against bacterial contamination in cosmetics and foods, instead of the common synthetic preservatives currently employed.
The present study was evaluated the antibacterial effect of the combination of Coptidis rhizoma, Lonicerae Flos, and Paeonia japonica (1:1:1) extracts (CLP1000). Also, the effectiveness of CLP1000, dioctahedral smectite (DHS), and the combination of CLP1000 and DHS (CLPS1000) against E. coli O157:H7 infection was studied using ICR female mice. During the incubation period, the dose of 10% and 20% CLP1000 were inhibited the growth of E. coli O157:H7 by 30% and 47%, respectively. For 7 days after single challenge with E. coli O157:H7, forty female ICR mice were divided into four experimental groups which were orally administered with saline, 10% CLP1000, 10% DHS, and 10% CLPS1000, respectively. On the 3rd day, the number of E. coli O157:H7 in mouse feces was significantly decreased by administration of CLP1000 (p < 0.05), DHS (p < 0.05) and CLPS1000 (p < 0.001). On the 7th day, CLP1000 (p < 0.05) and CLPS1000 p < 0.001) administration significantly decreased the number of E. coli O157:H7. According to the results of the present study, administration of CLPS1000 to mice can reduce the severity of E. coli O157:H7 infection. Also, it is suggested that CLPS100 represents a good candidate for the treatment of enteric infections in domestic animals.
In our previous studies, we have identified several in vivo-induced antigens and evaluated their potential as subunit vaccine candidates in a murine model, in which the recombinant protein GalT showed the most potent immunogenicity and immunoprotective efficacy against Actinobacillus pleuropneumoniae. To exploit a more efficient way of delivering GalT proteins, in this study, we employed the widely studied E. coli outer membrane vesicles (OMVs) as a platform to deliver GalT protein and performed the vaccine trial using the recombinant GalT-OMVs in the murine model. Results revealed that GalT-OMVs could elicit a highly-specific, IgG antibody titer that was comparable with the adjuvant GalT group. Significantly higher lymphocyte proliferation and cytokines secretion levels were observed in the GalT-OMVs group. 87.5% and 50% of mice were protected from a lethal dose challenge using A. pleuropneumoniae in active or passive immunization, respectively. Histopathologic and immunohistochemical analyses showed remarkably reduced pathological changes and infiltration of neutrophils in the lungs of mice immunized with GalT-OMVs after the challenge. Taken together, these findings confirm that OMVs can be used as a platform to deliver GalT protein and enhance its immunogenicity to induce both humoral and cellular immune responses in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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