This report outlines the development of a rapid, simple, and sensitive detection system for pathogenic bacteria using a capillary electrophoresis-based, single strand conformation polymorphism (CE-SSCP) combined with PCR. We demonstrate that this method, used with primers targeting the V4 region of the16S rRNA gene, is capable of the simultaneous detection of 10 microbes that could be associated with foodborne illness, caused by animal-derived foods: Salmonella enterica, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, Campylobacter jejuni, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Yersinia enterocolitica, Vibrio parahaemolyticus, and Enterobacter sakazakii. The traditional detection techniques are time-consuming and labor-intensive, due to the necessary task of separate cultivation of each target species. As such, the CE-SSCP-PCR method, that we have developed, has the potential to diagnose pathogens rapidly, unlike the traditional technique, in order to prevent foodborne illness in a much more efficient manner.
Gonzalez-Perez, C.J.;Vargas-Arispuro, I.;Aispuro-Hernandez, E.;Aguilar-Gil, C.L.;Aguirre-Guzman, Y.E.;Castillo, A.;Hernandez-Mendoza, A.;Ayala-Zavala, J.F.;Martinez-Tellez, M.A.
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.2
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pp.183-194
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2019
The consumption of fresh vegetables has been related to recurrent outbreaks of foodborne diseases (FBD) worldwide. Therefore, the development of effective alternative technologies is necessary to improve the safety of these products. This study aimed to isolate and identify epiphytic lactic acid bacteria (LAB) from fresh fruits and leafy vegetables and characterize their antagonistic capacity due to their ability to produce bacteriocins or antibacterial compounds. For this, 92 LAB isolates from fruits and leafy vegetables were screened for antagonistic activity. Two strains with the highest and broadest antagonistic activities were selected for further characterization; one from cantaloupe melon (strain CM175) and one from cilantro leaves (strain C15). The cell-free supernatants (CFS) of CM175 and C15 were found to exhibit antagonistic activity against FBD-causing pathogens. The CM175 and C15 strains were identified as Pediococcus pentosaceus and Lactobacillus graminis, respectively. Notably, the P. pentosaceus CM175 CFS stopped the growth of Salmonella Typhimurium, Salmonella Saintpaul, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytogenes, and delayed Escherichia coli O157:H7 growth. Moreover, L. graminis C15 CFS delayed the growth of all indicator pathogens, but did not completely stop it. Organic acids and bacteriocin-like molecules were determined to be possibly exerting the observed antagonistic activity of the identified LAB strains. Thus, application of the antagonistic compounds produced by Pediococcus pentosaceus and Lactobacillus graminis could be a novel and ecological strategy in developing antimicrobial biopreservatives for the food industry and mitigating FBD by reducing the biological contamination in fruit and vegetable orchards, mainly via their potential in controlling both gram-negative and gram-positive pathogenic bacteria.
Purpose: Community-acquired bacterial enteritis (CABE) is a common problem in developed countries. It is important to understand the epidemiologic changes in bacterial pathogens for prevention and treatment. Therefore, we studied the epidemiologic changes in CABE in Korean children. Methods: A total of 197 hospitalized pediatric patients aged <19 years that presented with dysentery symptoms and showed positive polymerase chain reaction results for bacterial species in stool samples, were enrolled in this study for 10 years (June 2010 to June 2020). We classified patients in phase I (06, 2010-06, 2015) and phase II (07, 2015-06, 2020) and analyzed their epidemiologic and clinical characteristics. Results: The most common pathogens were Campylobacter species (42.6%) and Salmonella species were the second most common pathogens (23.9%). The abundance of pathogens decreased in the following order: Clostridium difficile (9.6%), Shigella (5.6%), and Clostridium perfringens (5.6%). Escherichia coli O157:H7 was found to be the rarest pathogen (2.0%). Campylobacter species showed an increase in the infection rate from 32.1% in phase I to 49.6% in phase II (p=0.0011). Shigella species showed a decline in the infection rate in phase I from 14.1% to 0.0% in phase II (p<0.001). C. difficile and C. perfringens showed an increase in infection rate in phase II compared to phase I, but the difference was not statistically significant. Conclusion: The infection rate of Campylobacter species in CABE has been rising more recently, reaching almost 50%. This study may help establish policies for prevention and treatment of CABE in Korean children.
Hyejin Choi;Daye Mun;Sangdon Ryu;Min-jin Kwak;Bum-Keun Kim;Dong-Jun Park;Sangnam Oh;Younghoon Kim
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.3
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pp.652-663
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2023
The rumen fluids contain a wide range of bacteria, protozoa, fungi, and viruses. The various ruminal microorganisms in the rumen provide nutrients by fermenting the forage they eat. During metabolic processes, microorganisms present in the rumen release diverse vesicles during the fermentation process. Therefore, in this study, we confirmed the function of rumen extracellular vesicles (EVs) and their interaction with the host. We confirmed the structure of the rumen EVs by transmission electron microscope (TEM) and the size of the particles using nanoparticle tracking analysis (NTA). Rumen EVs range in size from 100 nm to 400 nm and are composed of microvesicles, microparticles, and ectosomes. Using the Caenorhabditis elegans smart animal model, we verified the interaction between the host and rumen EVs. Exposure of C. elegans to rumen EVs did not significantly enhance longevity, whereas exposure to the pathogenic bacteria Escherichia coli O157:H7 and Staphylococcus aureus significantly increased lifespan. Furthermore, transcriptome analysis showed gene expression alterations in C. elegans exposed to rumen EVs, with significant changes in the metabolic pathway, fatty acid degradation, and biosynthesis of cofactors. Our study describes the effect of rumen EV interactions with the host and provides novel insights for discovering biotherapeutic agents in the animal industry.
The antimicrobial effects of metabolites from isolated strains from feces of Korean newborn baby and from Dongchimi against six food-borne microorganisms, and characteristics of the metabolites were investigated.. The metabolites from isolated strains adjusted pH to 3.5, 4.0, and 4.5 showed strong growth inhibition against S. Typhimurium, and S. Enteritidis. The metabolites has kept its inhibition activities to the pathogens after catalase, trypsin or pepsin treatment. In addition, antimicrobial activity of metabolites was not decreased by heat treatment at $121^{\circ}C$ for 15 min. D2 and F35-2 strains were confirmed homofermentative and F20-3 was heterofermentative bacteria identified by final organic acid and gas production. The amount of lactic acid produced by D2 and F35-2 strains after 24 h of incubation was 1.84 and 1.85% respectively, but F20-3 strain produced acetic acid (0.22%) and lactic acid (0.91%).
There is a burgeoning number of products on the market that contain probiotics, but do they do you any good? What exactly are probiotics? They have been defined as living organisms that, when ingested in sufficient quantities, provide health benefits beyond basic nutrition. They are often referred to as "friendly bacteria" or "good bacteria." Probiotics have been claimed, amongst other things, to (i) reduce the incidence of colon cancer and other diseases of the colon, such as IBS, (ii) stimulate the immune system, (iii) have anti-hypertensive and anti-cholesterolemic properties, (iv) mitigate against the effect of antibiotics on the intestinal microbiota, and (v) protect against gastrointestinal infections. However, the scientific basis for many of these claims is not well-established. Indeed, the European Food Safety Authority has denied the use of several health claims associated with probiotics, particularly those related to mitigation of diarrhea following consumption of antibiotics. Thus, there is a need for research on the mechanisms of action of probiotics. We have been mainly interested in the use of probiotics to control enteric infections. There are several possible modes of action to explain how probiotics may protect the host from enteric pathogens, including competitive exclusion and immunomodulation. We have shown that probiotics produce bioactive molecules that interfere with bacterial cell-cell communication (also called quorum sensing), and this results in a down-regulation of virulence genes that are responsible for attachment of the pathogen to the gastrointestinal epithelium. These bioactive molecules act on a variety of bacteria, including enterohemorrhagic and enterotoxigenic Escherichia coli, Salmonella, Clostridium difficile and Clostridium perfringens, and there is evidence that they can inhibit the formation of biofilms by Listeria monocytogenes. These bioactive molecules, which are peptidic in nature, can exert their effects not only in vitro but also in vivo, and we have shown that they mitigate against E. coli O157:H7 and Salmonella in mice and Salmonella and E. coli K88 infections in pigs. They can be delivered in foods such as yoghurt and maintain their activity.
Atmospheric pressure plasma (APP) was applied to examine microbial safety and qualities of commercial Sunsik. APP was generated in a square-shaped plastic container (250 W, 15 kHz, ambient air) and dielectric barrier discharge plasma treatment was applied for periods of 0, 5, 10, and 20 minutes. The total aerobic bacterial count in the control was 4.44 log CFU/g. Under plasma treatment for 20 minutes, Sunsik samples inoculated with Bacillus cereus, B. subtilis, and Escherichia coli O157:H7 resulted in a reduction of bacterial counts by approximately 2.20, 2.22, and 2.52 log CFU/g, respectively. The pH of the sample was found to decrease after APP treatment. Although hunter color $L^*$ of Sunsik increased, $a^*$ and $b^*$ value decreased as a result of APP. Increasing the APP time also enhanced the peroxide value. Further, sensory evaluation revealed that APP decreased color, flavor, taste and overall acceptability. The results of this study indicated that APP treatment improved the microbial quality of Sunsik, although further studies should be conducted to reduce the deterioration of sensory quality induced by APP.
To analyze the hazards associated with cucumber and hot pepper cultivation areas, a total of 72 samples were obtained and tested to detect the presence of biological (sanitary indicative, pathogenic bacteria and fungi) and chemical hazards (heavy metals and pesticide residues). The levels of sanitary indicative bacteria (aerobic plate counts and coliforms) and fungi were ND-7.2 and ND-4.8 log CFU/(g, mL, hand, or $100cm^2$) in cucumber cultivation areas, and ND-6.8 and 0.4-5.3 log CFU/(g, mL, hand, or $100cm^2$) in hot pepper cultivation areas. More specifically, the soil of hot pepper cultivation areas was contaminated with coliforms at a maximum level of 5.6 log CFU/g. Staphylococcus aureus was detected only in glove samples at a level of 1.4 log CFU/$100cm^2$ and Bacillus cereus was detected in the majority of samples at a level of ND-4.8 log CFU/(g, mL, hand, or $100cm^2$). Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, and Salmonella spp. were not detected. Heavy metal (Zn, Cu, Ni, Pb, and Hg) chemical hazards were detected at levels lower than the regulation limit. Residual insecticides were not detected in cucumbers; however, hexaconazole was detected at a level of 0.016 mg/kg (maximum residue limit: 0.3 mg/kg) in hot peppers.
Jo, Se Jin;Park, Mi-Jin;Guo, Rui Hong;Park, Jung Up;Yang, Ji Yoon;Kim, Jae-Woo;Lee, Sung-Suk;Kim, Young Ran
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.50
no.5
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pp.535-542
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2018
The current study investigated the beneficial effects of 15 essential oils isolated from tree branches, leaves, and flowers. Among these oils, clove bud and Illicium anisatum oils showed the most potent anti-oxidant effects on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl and 2,2'azinbis-(3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid) radical scavenging activities. Next, we evaluated the antibacterial effects of 15 essential oils on Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, Salmonella typhimurium, and Streptococcus mutans. Clove bud significantly decreased growth of 5 bacterial strains. In addition, clove bud, Magnolia kobus, Picea abies and Chamaecyparis obtuse significantly reduced growth of the fungi, Aspergillus fumigatus, Aspergillus ochraceus, Candida albicans and Trichophyton rubrum. Additionally, clove bud also remarkably reduced the expression of cyclooxygenase-2 and inducible NO synthase in lipopolysaccharide-activated RAW264.7 cells. These results indicate that essential oils isolated from trees, which exhibit antioxidant, antibacterial, antifungal and anti-inflammatory properties, may be potentially useful in the development of cosmetic ingredients.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.8
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pp.967-972
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2006
The antioxidative and antimicrobial activities were determined on the mushroom (Sarcodon aspratus) extracts in order to find out new food functional components. The antioxidative activities of water and ethanol extracts from the Sarcodon aspratus were measured by peroxide values (POV), electron-donating ability (EDA) using 1,1-diphenyl-2-picryl hydroxyl (DPPH), nitrite-scavenging ability and superoxide dismutase-like activity (SODA) by pyrogallol. The antioxidative activity of the ethanol extract measured by POV was higher than those of the water extract, BHT, and ${\alpha}-tocopherol$. The EDA of the water extract and ethanol extract using DPPH showed the highest values of 76.94% and 73.06%, respectively. The nitrite-scavenging abilities (pH 1.2, 1,000 ppm) of the water and ethanol extracts were 72.61% and 62.69%, respectively, and the nitrite-scavenging ability of the water extract was higher than that of the ethanol extract in all pH values. The SODA of the ethanol extract was higher than that of the water extract. The Sarcodon aspratus extracts had antimicrobial effects on Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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