• 제목/요약/키워드: EpH4

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EpH4 세포에서 TGF-β에 의한 세포사멸시 Smad 단백질에 의존한 Gadd45b 유전자의 발현 변화 (Smad-dependent Expression of Gadd45b Gene during TGF-β-induced Apoptosis in EpH4 Cells.)

  • 조희준;유지윤
    • 생명과학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.461-466
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    • 2008
  • Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$)에 의해 유도되는 세포사멸 과정은 정상 조직에서 손상 받은 조직이나 비정상 적인 조직을 제거하는데 중요한 역할을 담당한다. Gadd45b는 p38 kinase를 활성화시킴으로 $TGF-{\beta}$에 의해 유도되는 세포사멸 과정을 매개한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 $TGF-{\beta}$에 의해 세포사멸이 일어나는 EpH4 세포에서 Gadd45b 유전자의 발현이 $TGF-{\beta}$에 의해 촉진됨을 보여주었다. 어떠한 기작으로 $TGF-{\beta}$에 의해 Gadd45b 유전자의 발현이 촉진되는지 알아보기 위해 Gadd45g 유전자의 5'-flanking region을 cloning하였으며, EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의해 그 promoter activity가 증가함을 확인하였다. 여러 가지 deletion mutants를 제조하여 promoter activity를 조사한 결과 전사 개시점으로부터 220 bp upstream 부위 에 promoter activity에 필수적인 sequence가 존재함을 확인하였다. 또한 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 promoter activity에 Smad2, Smad3, 그리고 Smad4가 중요한 기능을 담당함도 확인하였다. 마지막으로 ras 유전자가 도입되어 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸이 억제되어있는 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현을 확인한 결과 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현이 억제됨을 확인하였다. 이러한 결과는 Gadd45b 유전자가 EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸을 유도하는데 중요한 기능을 담당할 가능성이 높음을 의미하는 것이다.

Biochemical characterization of a novel extracellular pullulan 6-glucanohydrolase from Bacillus circulans S-1

  • Lee, Moon-Jo;Park, Cheon;Park, Joon-Ho;Chung, Kang-Hyun;Nam, Kyung-Soo;Park, Jin-Woo;Kim, Cheorl-Ho
    • 생명과학회지
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    • 제10권3호
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    • pp.307-316
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    • 2000
  • Bacillus circualans S-1으로부터 새로운 균체외 pullulan 6-glucanohydrolase(EP)를 정제하였다. 정 제된 EP는 SDS하에서 140kDa의 분자량을 나타내었으며, pI는 5.5이었다. SDS-PAGE에 의해 분석된 이 EP는 Schiff staining에 대하여 negative이었으며, 또한 아미노 말단기 순서는 P-L-N-M-S-Q-P이었 다. 정제된 EP는 6$0^{\circ}C$ 부근의 최적온도와 pH 9.0 부근에서 최적 pH를 나타내었으며, pH 4.0에서 pH 11 까지 4$^{\circ}C$에서 24시간동안 반응에서도 안정하였다. 또한 기질로 사용된 Pullulan은 열불안정화로부터 효 소를 보호하였으며, 그 범위는 기질 농도에 의존하였다. 이 EP의 활성은 Mn2+, Ca2+ 이온 에 의하여 활성화되었으며, amylopectin, glycogen, $\alpha$,$\beta$-limited dextrin 및 pullulan의 $\alpha$-1,6-linkage를 가수분해 하였다. 정제된 EP는 pH 9.0 및 5$0^{\circ}C$에서 측정하였을 때 pullulan의 경우는 7.92mg/ml의 Km값을 각각 나타내었다. 또한 정제된 EP는 pullulan을 maltotriose까지 완전히 가수분해하였다. 그리고 Mouse anti-serum과 함께 western blotting 분석결과 정제된 EP는 배양과정중 단일 형태로 생산되는 것으로 나타났다.

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Postprandial Ammonia Excretion and Oxygen Consumption Rates in Olive Flounder Paralichthys olivaceus Fed Two Different Feed Types According to Water Temperature Change

  • Lee, Jinhwan
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제18권4호
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    • pp.373-378
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    • 2015
  • Postprandial ammonia excretion and oxygen consumption in olive flounder Paralichthys olivaceus fed two different feed types, moist pellet (MP) and expanded pellet (EP) diets, to satiation were determined at $12^{\circ}C$, $15^{\circ}C$, $20^{\circ}C$, and $25^{\circ}C$ for 48 h. The ammonia excretion and oxygen consumption rates increased with increasing water temperature. However, the postprandial times for the maximum rates of ammonia excretion and oxygen consumption were shortened from 12 h to 6 h after feeding with increasing water temperature. The ammonia excretion and oxygen consumption rates of the fish fed EP were significantly higher (P < 0.05) than those fed MP at 12 h post-feeding both for $12^{\circ}C$ and $15^{\circ}C$. The highest (P < 0.05) weight-specific ammonia excretion rates at $12^{\circ}C$ were observed in the fish fed EP and MP at $12.1mg\;NH_3-N\;kg^{-1}h^{-1}$ and $8.7mg\;NH_3-N\;kg^{-1}h^{-1}$, respectively, for 12 h and 9 h after feeding. The highest (P < 0.05) weight-specific oxygen consumption rates at $12^{\circ}C$ were observed in fish fed EP and MP at $116.4mg\;kg^{-1}h^{-1}$ and $101.0mg\;kg^{-1}h^{-1}$, respectively, for 12 h after feeding. The highest ammonia excretion rates at $25^{\circ}C$ in the fish fed EP and MP increased to $16.9mg\;NH_3-N\;kg^{-1}h^{-1}$ and $18.3mg\;NH_3-N\;kg^{-1}h^{-1}$, respectively, for 6 h after feeding. The highest (P < 0.05) weight-specific oxygen consumption rates at $25^{\circ}C$ were observed in fish fed EP and MP at $184.3mg\;O_2kg^{-1}h^{-1}$ and $197.3mg\;O_2kg^{-1}h^{-1}$, respectively. These data are valuable for the design of biofilters and development of effluent treatment technologies for the land-based flounder farms.

Purification and Characterization of Two Extracellular Proteases from Oligotropha carboxydovorans DSM 1227

  • Kang, Beom-Sik;Jeon, Sang-Jun;Kim, Young-Min
    • Journal of Microbiology
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    • 제37권1호
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    • pp.14-20
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    • 1999
  • Two extracellular proteases, EP I and EP II, from cells of Oligotropha carboxydovorans (formerly Pseudomonas carboxydovorans) DSM 1227 grown in nutrient broth were purified to greater than 95% homogeneity in five steps using azocasein as a substrate. The final specific activities of EPs I and II were 214.9 and 667.4 units per mg of protein. The molecular weights of native EPs I and II were determined to be 23,000. Sodium dodecyl sulfate-gel electrophoresis revealed the two enzymes to be monomers. The enzymes were found to be serine-type proteases. The activity of EP I was stimulated by Ca2+, Mg2+, and Ba2+, but that of EP II was not. The enzymes were completely inhibited by Fe2+, Hg2+, Co2+, Zn2+, and Cd2+. EDTA and EGTA exhibited a strong inhibitory effect on EP I. The optimal pH for the two enzymes was pH 9.0. The optimal temperatures for EP I and II were 60 and 50$^{\circ}C$, respectively. The enzymes were stable under alkaline conditions. The thermal stability of EP I was higher than that of EP II. Cell-free extracts did not inhibit the purified enzymes. The enzymes were active on casein, azocasein, azocoll, and carbon monoxide dehydrogenase, but weakly active with bovine serum albumin.

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전기자극 후 Cycloheximide 처리가 돼지난자의 활성화에 미치는 효과 (Effects of Cycloheximide on Development of In Vitro Matured Porcine Oocytes Activated following Eelectric Pulse)

  • 송상현;정기화;조헌조;박충생
    • 한국가축번식학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.79-85
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    • 2002
  • 본 연구에서는 전기자극 후 cycloheximide의 적정농도와 배양시간이 체외성숙된 돼지난자의 활성화에 미치는 영향을 조사하고자 실험을 수행하였다. 42~44시간 동안 체외성숙 된 난자는 0.1%의 hyaluronidase에서 pipetting으로 난구세포를 제거한 후, 1.2 KV/cm의 전압으로 전기자극만 하거나, 전기자극 후 cycloheximide 1, 5 및 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 각각 3, 5 및 7시간 동안 배양하는 구로 나누어 활성화를 유도하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 난자의 분할율 cycloheximide 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 처리군이 86.8%로 1 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 처리군의 74.4%보다 유의적(P<0.05)으로 높았다. 배반포기 발달율은 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 처리구보다 5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 처리구에서 유의적(P<0.05)으로 높았다. 2. 전기자극 후 cycloheximide에서 배양시간의 비교에 있어서 5시간 처리한 돼지난자의 분할율(86.6%)이 3시간 동안 처리한 난자보다 유의적(P<0.05)으로 높게 나타났다. 상실배의 발달율은 5시간과 7시간 동안 처리구(26.7%와 16.4%)에서 3시간 처리구(14.5%)보다 유의적(P<0.05)으로 높은 발달율을 나타났다. 3. 전기자극을 단독처리하거나 전기 자극 후 cyclohiximide를 복합처리한 돼지난자를 8일 동안 배양하였다. 전기자극 후 cycioheximide를 복합처리한 난자의 분할율(80.1%) 및 배반포기 발달율(11.6%)은 전기자극 단독처리한 난자의 분할율(77.2%) 및 배반포기 발달율(6.6%)과는 유의적인 차이가 없었다. 4. 체외성숙된 돼지난자를 전기자극 단독 또는 전기자극 후 cycloheximide 복합처리한 후 체외 발달한 배반포기 수정란의 핵 수는 각각 18.67$\pm$5.53개와 20.71$\pm$6.16개로써 유의적인 차이가 없었다. 이상의 결과를 요약하면, 전기자극을 단독처리 하거나 전기 자극 후 cyclohiximide를 복합처리한 돼지난자 발생율은 유의적인 차이가 없었으나, 전기자극 후 cycloheximide를 복합처리 할 경우에는 5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도로 5시간 동안 배양하는 것이 효과적으로 돼지난자의 activation을 유기할 수 있을 것으로 사료된다.

Phytoncide 처리가 신선편이 양상추의 저장 중 이화학적, 미생물학적 및 관능적 특성에 미치는 영향 (Effects of Phytoncide Treatment on the Physicochemical, Microbiological, and Sensory Characteristics of Fresh-cut Lettuce)

  • 김도희;김한빛;문광덕
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제20권2호
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    • pp.166-172
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    • 2013
  • 본 연구는 솔잎 유래의 phytoncide essential oil을 증류수에 희석한 것(1%, v/v, DP)과 식용 에탄올에 희석한 것(1%, v/v, EP), 증류수(DW) 및 식용 에탄올(EE)을 침지액으로 이용하였다. pH는 DW 처리구에서 가장 높고 EP 처리구에서 가장 낮았으며, 증류수보다는 에탄올 포함 처리구에서, 대조구보다는 phytoncide 성분이 포함된 처리구에서 낮은 pH인 것으로 나타났다. 적정산도는 EP 처리구가 가장 높고, DW 처리구가 가장 낮은 것으로 나타나 pH의 결과와 잘 일치하는 경향이었다. 총 가용성 고형분 함량은 1.60~2.23의 범위로, 에탄올이 포함된 EE 및 EP 처리구에서 유의적으로 높은 함량으로 나타났으며, 포장필름 내 기체조성 분석결과, EP 처리구가 modified atmosphere packaging (MAP)의 원리인 저산소 및 고이산화탄소 조건인 것으로 나타났다. 관능검사 결과, 외관, 색 및 갈변 정도에서 EP 처리구가 유의적으로 높은 점수를 얻었으며, DW 처리구가 가장 낮은 점수를 얻어 갈변 저해에 뛰어난 효과가 있음을 알 수 있었다. 총균수는 저장 중 꾸준히 증가하는 경향이었으며, EP 처리구가 가장 완만한 증가율을 보여 항갈변뿐만 아니라 항균에도 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들로 보아 EP 처리구는 갈변 저해 및 항균에도 효과가 뛰어나 품질 유지에 긍정적인 영향을 미치므로, 고품질 신선편이 양상추의 가공 및 유통에 있어 효과적인 방법으로 이용될 수 있을 것이라 기대된다.

캡슐화된 소화약제의 물성에 대한 고분자 매트릭스의 효과 (The Effect of Epoxy Resin on the Properties of Encapsulated Fire Extinguishing Agent)

  • 세르초바 알렉산드라;크라실니콥 세르게이;이상섭;김종상
    • 한국화재소방학회논문지
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    • 제33권5호
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    • pp.19-27
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    • 2019
  • 저점도 에폭시 수지(EP)를 기본으로하고 캡슐화된 소화약제(EFA)를 50 wt%의 함유한 소화복합재료가 얻어졌다. 탈캡슐화된 EFA의 동역학 및 온도에 대한 EP의 긍정적인 효과가 확립되었다. EP는 EFA의 탈캡슐화 온도를 130 ℃에서 155 ℃로 증가시키고 캡슐화의 역학을 변화시킨다. 에폭시 매트릭스는 순수한 EFA와 비교하여 EFA의 열 안정성을 3.9배 이상 증가시킨다. EFA의 저장 안정성에 대한 EP의 보호 효과가 발견되었다. 60 ℃ 및 80% 습도에서 96시간 동안 EFA를 함유하는 EP의 질량 손실은 0.4%이고, 동일한 조건에서 순수한 EFA의 질량 손실은 15%이다. 자외선의 영향 아래에서 EP의 동일한 효과: 순수한 EFA가 6%인 경우 EFA를 함유한 EP는 0.8% 손실된다. 대안의 중합체 매트릭스의 시험이 고려되었다.

저장중면양근육내(貯藏中緬羊筋肉內)에서의 보수성(保水性), 단백질추출성(蛋白質抽出性) 및 pH의 변화(變化) (Changes in the Water-Holding Capacity Extractability of Proteins and pH Value of Ovine Muscle During Storage)

  • 채영석
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제21권2호
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    • pp.109-111
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    • 1978
  • 본실험(本實驗)에서는 저장중(貯藏中)에 면양근육내(績羊筋肉內)의 보수성(保水性), 단백질(蛋白質) 추출성(抽出性) 및 pH에 대(對)한 변화(變化)의 차이(差異)를 관찰(觀察)하였다. 보수성(保水性)은 pH치(値)와 같이 도살후(屠殺後) 서서히 저하(低下)되어 약(約) 2-4시간후(時間後) 최소치(最少値)에 도달(到達)하였다가 그 후(後) 저장(貯藏)의 진행(進行)과 더불어 회복(回復)되였다. 단백질추출성(蛋白質抽出性)도 같은 경향(傾向)을 보였으나 도살후(屠殺後) 6시간(時間)까지 pH치(値)의 변화(變化)는 보수성(保水性) 및 단백질(蛋白質) 추출성(抽出性)의 변화(變化)보다 더 빨랐다. 10일간저장중(日間貯藏中) 보수성(保水性), 단백질추출성(蛋白質抽出性) 및 pH치(値)의 회복(回復)의 속도(速度)도 같은 양상(樣相)을 보였다.

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1H, 15N and 13C Backbone Assignments and Secondary Structures of C-ter100 Domain of Vibrio Extracellular Metalloprotease Derived from Vibrio vulnificus

  • Yun, Ji-Hye;Kim, Hee-Youn;Park, Jung-Eun;Cheong, Hae-Kap;Cheong, Chae-Joon;Lee, Jung-Sup;Lee, Weon-Tae
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제33권10호
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    • pp.3248-3252
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    • 2012
  • Vibrio extracellular metalloprotease (vEP), secreted from Vibrio vulnificus, shows various proteolytic function such as prothrombin activation and fibrinolytic activities. Premature form of vEP has an N-terminal (nPP) and a C-terminal (C-ter100) region. The nPP and C-ter100 regions are autocleaved for the matured metalloprotease activity. It has been proposed that two regions play a key role in regulating enzymatic activity of vEP. Especially, C-ter100 has a regulatory function on proteolytic activity of vEP. C-ter100 domain has been cloned into the E. coli expression vectors, pET32a and pGEX 4T-1 with TEV protease cleavage site and purified using gel-filtration chromatography followed by affinity chromatography. To understand how C-ter100 modulates proteolytic activity of vEP, structural studies were performed by heteronuclar multi-dimensional NMR spectroscopy. Backbone $^1H$, $^{15}N$ and $^{13}C$ resonances were assigned by data from standard triple resonance and HCCH-TOCSY experiments. The secondary structures of vEP C-ter100 were determined by TALOS+ and CSI software based on hydrogen/deuterium exchange. NMR data show that C-ter100 of vEP forms a ${\beta}$-barrel structure consisting of eight ${\beta}$-strands.

Antioxidant Activities of Eggplant (Solanum melongena) Powder with Different Drying Methods and Addition Levels to Pork Sausages

  • Sembring, Hanna Seprina br;Chin, Koo Bok
    • 한국축산식품학회지
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    • 제41권4호
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    • pp.715-730
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    • 2021
  • The objective of this study was to evaluate antioxidant activities of eggplant (EP) powder with different drying methods and addition levels to pork sausages to improve product quality. Antioxidant activities of EP with different drying methods, particle sizes, and solvents of extraction were determined. Freeze dried (FD) EP extracted with 100% ethanol had higher 2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl radical-scavenging activities (DPPH-RSA) and total phenolic content (TPC) values than other drying methods. FD500 had the highest iron chelating ability (ICA) value. Oven-dried (OD) EP at 60℃ had the highest reducing power. Dried EP was added to sausages of six groups: control without EP, reference added with ascorbic acid, O1 and O2 added with 0.25% and 0.5% OD EP, respectively, and F1 and F2 added with 0.25% and 0.5% FD EP, respectively. Pork sausages added with O2 had the lowest TBARS and TPC values. These values increased during storage. Purge loss (%), lightness (L*), and redness (a*) values of F2 were lower than those of other groups, whereas sausages containing F2 had the highest yellowness (b*). pH values of sausages added with EP were increased regardless of the level of EP added. Hardness values of F2 were higher. However, there were no significant differences in other textural characteristics. Sausages added with EP had higher moisture and protein contents (%), but lower fat contents (%). These results indicate that EP powder could be used to retard lipid oxidation and inhibit microbial counts during storage time.