본 연구는 쌀 배아를 활용한 만성 대사성질환 예방용 제품 및 건강기능성 식품 개발의 일환으로써 고콜레스테롤 식이를 급여하여 고지혈증을 유발시킨 흰쥐에서 15%의 배아와 25%의 흑미 미강색소 배아젤리의 첨가가 혈장과 간 조직의 지질 대사와 항산화효소의 환성에 미치는 영향을 살펴보았다. 실험 식이를 6주 간 급여한 결과, 배아와 흑미 미강색소 배아젤리 첨가는 실험동물의 식이섭취에 영향을 미치지 않았다. 배아군과 흑미 미강색소 배아젤리군은 고콜레스테롤 급여 대조군에 비해 혈장의 총 콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤 및 간의 중성지방과 총 콜레스테롤 농도를 감소시키고, HDL-콜레스테롤 농도와 HDL-C/TC 비는 증가시켰으며, 동맥경화지수는 감소시켜 체내 지질대사의 개선 효과가 있었다. 혈장 GOT와 GPT 수치는 배아와 흑미 미강색소 배아젤리를 첨가하였을 때 감소하여 고콜레스테롤혈증 상태에서 간 기능 보호에 긍정적인 효과가 있었다. 또한 배아와 흑미 미강색소 배아젤리는 고콜레스테롤 급여로 인해 증가된 혈장과 간 내의 지질과산화를 억제시키는 효과가 있었다. 반면, 항산화 효소인 간 조직의 SOD와 CAT활성은 배아와 배아젤리 첨가에 따라 증가하였다. 이상의 결과로 볼 때 배아와 흑미 미강색소 배아젤리는 고콜레스테롤 식이 흰쥐의 간 조직에서의 항산화 활성을 강화시키고 산화적 손상을 억제시키는 자용이 있으며 현장과 간조직의 지질대사를 개선하여 심혈관계 질환을 예방 및 감소시킬 수 있을 것으로 사료된다.
The effect of different compositions of organic acids on the flavor profile of 10% sugar solution was investigated by the response surface methodology, and the results were used to evaluate the flavor characteristics of lactic acid fermented cereal beverages. A mixture of extruded rice flour (10%) and soymilk (7.8% dry matter) was fermented with Leuconostoc mesenteroides (Sikhae). Depending on the substrate pretreatments, for example, the malt or amylase digestion and the proteolytic enzyme hydrolysis, the sugar and organic acid composition of the product varied. The organic acid composition of the fermented beverages was in the ranges of 0.44-0.55% lactic acid, 0.05-0.09% acetic acid and 0.07-0.09% citric acid, while that of commercial apple juice was 1.59% malic acid and 0.49% acetic acid. The flavor profiles of fermented beverages added with 10% sucrose were compared to those of apple juice and a model mixture containing 0.48% citric acid, 0.39% lactic acid and 0.12% acetic acid in 10% sugar solution. The QDA diagram of fermented beverages approached to that of apple juice, when the substrate was digested by amylase but not by protease.
Metabolic effects of ten daily doses of standardized extract of Andrographis paniculata leaves (AP) rich in andrographolide were evaluated in a rat model of type-2 diabetes and in diet induced obese rats. AP was administered per-orally as suspension in 0.3% carboxymethylcellulose at doses of 50, 100 and 200 mg/kg/day for 10 consecutive days. Blood glucose, insulin and lipid profile of rats were measured by using enzyme kits. In addition, effects of such treatments on anti-oxidant enzymes activity and histopathological changes in various organs of diabetic rats were assessed. AP treatments reversed body weight losses and increased plasma insulin level in diabetic rats. The anti-oxidant enzymes activity became normal and histopathological changes observed in pancreas, liver, kidney and spleen of diabetic animals were less severe in extract treated groups. On the other hand, hyperinsulinemia and increased body weight gains observed in high fat or fructose fed rats were less severe in the extract treated groups. These observations revealed therapeutic potentials of the extract for treatments of diabesity associated metabolic disorders, and suggest that the effects of the extract on insulin homeostasis depend on the metabolic status of animals. Activation of cytoprotective mechanisms could be involved in its mode of action.
hFSH is a glycoprotein secreted from anterior pituitary and consists of ${\alpha}$ and ${\beta}$ subunits. Because of its major biological functions including sperm formation in the male and for follicular growth, FSH is used to cure woman's sterility. In this study we tried to produce recombinant hFSH in vitro using a retrovirus expression vector. Two major components of the vector we constructed are: ( i ) a DNA fragment containing ${\alpha}$ and ${\beta}$ genes fused by a DNA sequence coding carboxyl terminal peptide (CTP) of human chorionic gonadotropin, (ii) a DNA fragment corresponding woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element (WPRE). Evaluation of expression profile of the recombinant FSH using reverse transcription PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Among three cell lines tested, HeLa cells were the best for hFSH expression (5,395 mIU/ml), then followed by chicken embryonic fibroblast (CEF) cells and Chinese hamster ovary (CHO) cells in the order of hFSH production. In addition to the amount, the FSH produced from HeLa cells was highest in terms of biological activity which was determined by measuring cAMP.
Although the blockage of a cell cycle by specific inhibitors of $Ca^{2+}/$calmodulin-dependent protein kinase II (CaMK-II) is well known, the activity profile of CaMK-II during the cell cycle in the absence of any direct effectors of the enzyme is unclear. The activity of native CaMK-II in NIH 3T3 cells was examined by the use of cell cycle-specific arresting and synchronizing methods. The total catalytic activity of CaMK-II in arrested cells was decreased about 30% in the M phase, whereas the $Ca^{2+}$-independent autonomous activity increased about 1.5-fold in the M phase and decreased about 50% at the G1/S transition. The in vivo phosphorylation level of CaMK-II was lowest at G1/S and highest in M. The CaMK-II protein level was unchanged during the cell cycle. When the cells were synchronized, the autonomous activity was increased only in M. These results indicate that the physiologically relevant portion of CaMK-II is activated only in M, and that the net activation of CaMK-II is required in mitosis.
Embryonic stem cells (ESCs), representing a population of undifferentiated pluripotent cells with both self-renewal and multilineage differentiation characteristics, are capable of spontaneous differentiation into cardiomyocytes. The present study sought to define the kinetic characterization of lactate dehydrogenase (LDH) and creatine kinase (CK) of ESC- and neonatal-derived cardiomyocytes. Spontaneously differentiated cardiomyocytes from embryoid bodies (EBs) derived from mouse ESC line (Royan B1) and neonatal cardiomyocytes were dispersed in a buffer solution. Enzymes were extracted by sonication and centrifugation for kinetic evaluation of LDH and CK with spectrophotometric methods. While a comparison between the kinetic properties of the LDH and CK of both groups revealed not only different Michaelis constants and optimum temperatures for LDH but also different Michaelis constants and optimum pH for CK, the pH profile of LDH and optimum temperature of CK were similar. In defining some kinetic properties of cardiac metabolic enzymes of ESC-derived cardiomyocytes, our results are expected to further facilitate the use of ESCs as an experimental model.
This study investigated the effect of vitamin $B_6$ deficiency on antioxidant enzyme activities and lipid profile in rats with exercise-induced oxidative stress. Forty eight rats were fed either a vitamin $B_6$ deficient diet (B6-) or a control diet (control) for 4 weeks and then subdivided into 3 groups: pre-exercise (PreE); post-exercise (PostE); recess after exercise (recessE). Compared to those of control group, plasma catalase and hepatic cytosol superoxide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1) activities of B6- group were lower regardless of exercise. The ratio of reduced glutathione/oxidized glutathione (GSH/GSSG) of B6 - group was lower in PreE and there was no difference between PostE and recessE. The level of malondialdehyde (MDA) of B6- was significantly higher in PreE and PostE. High-density lipoprotein-cholesterol (HDL-C) level of B6- group was lower regardless of exercise. Atherosclerotic index of $B_6$- group was higher in PreE and there was no difference between PostE and recessE. It is suggested that a reduction in antioxidative status caused by vitamin $B_6$ deficiency may be aggravated under exercise-induced oxidative stress.
The metabolic profile of doxylamine, N,N-dimethyl-2-[1-phenyl-1-(2-pyridinyl)ethoxy] ethanamine, was determined in the human urine. The free fractions of extracts were obtained without hydrolysis, and the conjugated fractions of extracts were obtained with enzyme hydrolysis using ${\beta}-glucuronidase/arylsulfatase$ from Helix pomatia. The mixture of acetic anhydride/pyridine (10 : 1, v : v) was used to derivatize the urinary extracts and then analyzed by gas chromatography and mass selective detector. N-desmethyldoxylamine, doxylamine carboxylic acid, desaminohydroxydoxylamine, N, N-didesmethyldoxylamine, N-acetyl conjugates of N-desmethyl and N, N-didesmethyldoxylamine, quarternary ammonium N-glucuronide of doxylamine, N-desmethyldoxylamine N-glucuronide and unchanged doxylamine were detected in the human urine obtained after oral treatment with doxylamine succinate. $N-methyl-{\alpha}-hydroxy-2-[1-phenyl-1-(2-pyridinyl)$ ethoxy] ethanamine, which can be a key intermediate of this metabolism, was tentatively identified by the interpretation of its mass spectrum. In this study, we proposed the metabolic pathway of doxylamine in the human on the basis of our data of the identified metabolites of doxylamine.
D-Ribose is a five-carbon sugar used for the commercial synthesis of riboflavin, antiviral agents, and flavor enhancers. Batch fermentations with transketolase-deficient B. subtilis JY1 were carried out to optimize the production of D-ribose from xylose. The best results for the fermentation were obtained with a temperature of $37^{\circ}C$ and an initial pH of 7.0. Among various sugars and sugar alcohols tested, glucose and sucrose were found to be the most effective for both cell growth and D-ribose production. The addition of 15 g/l xylose and 15 g/l glucose improved the fermentation performance, presumably due to the adequate supply of ATP in the xylose metabolism from D-xylulose to D-xylulose-5-phosphate. A batch culture in a 3.7-1 jar fermentor with 14.9 g/l xylose and 13.1 g/l glucose resulted in 10.1 g/l D-ribose concentration with a yield of 0.62 g D-ribose/g sugar consumed, and 0.25 g/l-h of productivity. Furthermore, the sugar utilization profile, indicating the simultaneous consumption of xylose and glucose, and respiratory parameters for the glucose and sucrose media suggested that the transketolase-deficient B. subtilis JY1 lost the glucose-specific enzyme II of the phosphoenolpyruvate transferase system.
[ ${\alpha}-Naphthylisothiocyanate$ ] (ANIT) induces intrahepatic cholestasis, involving damage to biliary epitheial cells. This study investigates hepatic gene expression and histopathological alterations in response to ANIT treatment in order to elucidate early time response of ANIT-induced hepatotoxicity. ANIT was treated with single dose (3, 6, and 60 mg/kg) in corn oil by oral gavage. Serum biochemical and histopathological observation were performed for evaluation of hepatotoxicity level. Affymetrix oligo DNA chips were used for gene expression profile by ANIT-induced hetpatoxicity. Hepatic enzyme levels (ALT, AST, and ALP) were increased in 24 hr high dose group. In microscopic observations, moderate hepatocellular necrosis, were confirmed 24 hr high dose groups. We found that gene expression patterns were dependent on time and dose. Our selected genes were related inflammation and immunomodulation. In this study, ANIT-induced hepatotoxicity was involved in acute phase responses and provides evidence for role of neutrophil could be mechanism associated with ANIT-mediated hepatotoxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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