Lecithin-free egg yolk protein (EYP), the by-product of lecithin extraction from egg yolk, which is denatured with an organic solvent, would normally be discarded. In this study, the denatured protein was renatured with alkali, and hydrolyzed with Alcalase in order to utilize by-product. The hydrolysate was separated through a series of ultrafiltration membranes with molecular weight cut-off (MWOO) of 10, 5 and 1 kDa, and the antioxidative activities of the hydrolysates was investigated. The 5K hydrolysate, permeate from 5 kDa membrane, showed stronger antioxidative activity than 10 K and 1 K hydrolysate which were permeated from 10 kDa and 1 kDa membrane, in a linoleic acid autoxidation system. In addition, the optimum concentration of antioxidative activity for 5 K hydrolysate was 1%, and the activity was about 37% higher as compared with α-tocopherol. The synergistic effect was also increased by using the hydrolysates with α-tocopherol.
Normally, aerobic cells are protected from the damage of free radicals by antioxidative enzymes such as catalase, superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH) peroxidase and GSH-S-transferase. In this study, we have investigate the effect of egg yolk protein hydrolysates on antioxidative activity and the activity of antioxidative enzyme in cultured hepatocytes (Chang). Without the pretreatment with hydrolysate, about 50% of the hepatocytes were killed within 2h by 225$\mu$M tert-butyl hydroperoxide (t-BHP). By contrast, fewer than 20% of the 5 K hydrolysate (permeate from 5 kDa membrane and not passed through 1 kDa membrane)-pretreated hepatocytes were killed by the same concentrations of t-BHP. In addition, the activities of catalase, GSH peroxidase and GSH-transferase were significantly increasing with the treatment of 5 K hydrolysate. These results suggest that 5 K hydrolysate exerts antioxidative effect by increasing activity of antioxidative enzymes.
An enzymatic process was developed to produce protein hydrolysater form defatted soya protein. Various unit operations were tried, and the effects of pre- and post-treatments on the product characteristics such as degree of hydroylsis (DH), free amino acid content (%FAA) and average molecular weight (MW) were investigated. The use of acid washes showed no difference in %DH. Increasing pH during pre-cooking gave lower %DH. Alkaline cooking made too much insoluble protein, thus the protein yield was too small. A better hydrolysis with more acceptable taste was obtained when the combination of Neutrase/Alcalase/Flavourzyme was used in place of Alcalase/Flavourzyme combination; Untoasted defatted soya was more effective on the proteolysis than toasted one. The MW of the evaporated and spray dried product was higher than that of undried product, due to precipitation of low-solubility components. When ultrafiltration and the product concentration carried out the product separation by reverse osmosis, the solubility and the taste of the product were improved. The difference between enzyme hydrolysate and acid hydrolysate was significant in free amino acid composition, especially in tyrosine, phenylalanine, glutamine and asparagine.
In the present study, an optimum protease was selected to hydrolyze the egg white liquid protein for the antioxidant peptides. Alcalase treatment yielded the highest amount of ${\alpha}$-amino groups (15.27 mg/mL), while the control (no enzymatic hydrolysis) showed the lowest amount of ${\alpha}$-amino groups (1.53 mg/mL). Alcalase also gave the highest degree of hydrolysis (DH) value (43.2%) and was more efficient for egg white liquid hydrolysis than the other enzymes. The Alcalase hydrolysate had the highest radical-scavenging activity (82.5%) at a concentration of 5.0 mg/mL. The conditions for enzymatic hydrolysis of egg white liquid with Alcalase were selected as substrate : water ratio of 2:1. Five percent Alacalse treatment did not show significant (P>0.05) increases of DH and ${\alpha}$-amino nitrogen content after 24 hhydrolysis. Thirty two hour-hydrolysis with 5% Alcalase is sufficient to make antioxidative egg white liquid hydrolysate from egg white liquid. DPPH and ABTS radical-scavenging activities were significantly (P<0.05) higher after enzymatic digestion. These results suggest that active peptides released from egg-white protein are effective radical-scavengers. Thus, this approach may be useful for the preparation of potent antioxidant products.
Ham, Youn-Kyung;Song, Dong-Heon;Noh, Sin-Woo;Gu, Tae-Wan;Lee, Jae-Hyeok;Kim, Tae-Kyung;Choi, Yun-Sang;Kim, Hyun-Wook
한국축산식품학회지
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제40권6호
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pp.1033-1043
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2020
This study investigated the impacts of gelatin hydrolysate addition on the technological properties and lipid oxidation stability of cooked sausage. Gelatin hydrolysate was prepared from pork and duck skin gelatin, through stepwise hydrolysis using collagenase and pepsin. The cooked sausages were formulated without gelatin (control) or with 1% pork skin gelatin, 1% duck skin gelatin, 1% pork skin gelatin hydrolysate, and 1% duck skin gelatin hydrolysate. The pH, color characteristics, protein solubility, cooking loss, and textural properties of cooked sausages were evaluated, and the 2-thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) value was measured weekly to determine lipid oxidation stability during 4 wk of refrigerated storage. Enzymatic hydrolysis of gelatin decreased protein content and CIE L* but increased redness and yellowness (p<0.05). When 1% gelatin or gelatin hydrolysate was incorporated in cooked sausage, however, little to no impacts on pH value, moisture content, protein content, color characteristics, protein solubility, and cooking loss were found (p>0.05). The addition of 1% duck skin gelatin hydrolysate increased the cohesiveness and chewiness of cooked sausages. The inclusion of 1% duck skin gelatin accelerated lipid oxidation of cooked sausages during refrigerated storage (p<0.05), whereas duck skin gelatin hydrolysate caused a lower TBARS value in cooked sausage compared to duck skin gelatin. The results show comparable effects of gelatin and gelatin hydrolysate addition on the technological properties of cooked sausages; however, the oxidative stability of raw materials for gelatin extraction should be evaluated clearly in further studies.
본 연구에서는 들깨(Perilla frutescens)박으로부터 효소분해물을 제조하기 위한 효소를 선별하여 최적의 반응조건을 확립하였다. Alcalase와 Ceremix의 동시 처리가 들깨박의 단백질과 탄수화물의 가용화에 효과적이었으며, 효소 사용량은 들깨박 중량의 2% (w/w), pH는 7.0, 반응 시간은 2시간이 적당하였다. 최적의 반응조건에서 들깨박을 Alcalase와 Ceremix로 처리한 결과 환원당, 가용성 단백질 및 총 폴리페놀 함량이 크게 증가하였다. 유리 라디칼과 양이온 라디칼에 대한 소거활성으로 확인한 결과 들깨박 효소분해물의 항산화 활성은 대조군에 비해 우수하였다. 또한 젖산균인 Leuconostoc mesenteroides 310-12 균주를 들깨박 효소분해물에서 배양한 결과 대조군에 비해 생육과 산의 생성이 우수하였다. 결론적으로 들깨박 효소분해물은 항산화 생리활성 소재로서뿐만 아니라 유산균 배양 배지로서도 활용 가능성이 있음을 확인하였다.
난황 단백질의 효소에 의한 가수분해에서 에탄올의 농도가 증가할수록 고형물과 단백질의 회수가 증가함을 알 수 있었다. 이것은 유화층을 에탄올의 증가가 감소시켰기 때문이다. 그러나 가수분해물에서 단백질 함량이나 sialic acid의 함량은 에탄을 농도와는 관계없이 일정하였다. 한외여과 후에 retentate에 대한 에탄올의 영향을 조사하였다. 마찬가지로 고형물의 회수는 에탄을 농도의 증가와 함께 증가하였다. 그리고 retentate에서 sialic acid의 함량은 대략 $2.5\%$정도로 일정하고 에탄올의 농도에 영향을 받지 않았다 이상의 결과로부터 난황 단백질의 효소 가수분해를 통해 sialic acid가 함유된 제품을 얻고자 할 때는 원료 난황단백질에 포함된 에탄올의 함량을 증가시킬수록 높은 수율의 제품을 얻을 수 있다. 본 실험에서는 원료 난황 단백질 중에서 $40\%$의 에탄을 함량까지는 제품 수율이 계속 증가하는 경향을 보였다. 난황 단백질 가수분해물의 한외여과에서 농축단계에서는 막 모듈의 MWCO의 차이에도 불구하고 retentate에서 총 고형물의 회수율은 비슷함을 나타내었으며, 투석에서 회수율은 MWCO가 작을수록 높아지지는 않았다. 제품에서의 sialic acid의 함량은 사용한 모듈에서 약 $2.0\%$를 나타내었다. 이것은 단백질 가수분해물에 비해 5배정도 상승한 결과이다. 본 연구에서 사용된 막 모듈 가운데서 Amicon 모듈이 제품의 회수율과 함량면에서 가장 우수한 특성을 보였다. 결론적으로 난황 단백질의 protease에 의한 가수분해에서 한외여과에 의해 순도를 높일 때 MWCO, 막 모듈의 type 그리고 운전조건 등을 잘 고려해 줄 때 최적의 조업조건을 얻을 수 있었다.
In order to utilize marine processing waste which would normally be discarded, cod liver protein was hydrolysed by ${\alpha}$-chymotrysin, and the hydrolysate was investigated for the new angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitor. Thy hydrolysate was separated into three major types, with molecular weight cut-off (MWCO) values less than 10 kDa, 5 kDa and 1 kDa of ultrafiltration membranes, respectively. ACE inhibitory peptides were isolated from the fractions passed through MWCO 1 kDa membrane, and purified by using ion-exchange chromatography on a SP-Sephadex C-25 column, gel filtration on a Sephadex G-15 column, and HPLC on an ODS column. The purity was identified with capillary electrophoresis. The amino acid sequences of two peptides were Met-Ile-Pro-Pro-Tyr-Tyr (IC50=10.9 ${\mu}$M) and Gly-Leu-Arg-Asn-Gly-Ile (IC50=35.0 ${\mu}$M)
The objective of this study was to purify and characterize the ${\beta}-secretase$ inhibitor from enzymatic hydrolysates of blackfin flounder muscle, for development of a novel anti-dementia agent that may be used in the drug or functional food industries. ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide was purified from various enzymatic hydrolysates of blackfin flounder muscle. Among six enzymatic hydrolysates, the Alcalase hydrolysate revealed highest ${\beta}-secretase$ inhibitory activity. Consecutive purification of the blackfin flounder muscle hydrolysate using Sephadex G-25 column chromatography and octadecylsilane C18 reversed phase HPLC techniques were used to isolate a potent ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide composed of 5 amino acids, Leu-Thr-Gln-Asp-Trp (MW: 526.7 Da). The $IC_{50}$ value of purified ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide was $126.93{\mu}M$. Results of this study suggest that peptides derived from blackfin flounder muscle may be beneficial as anti-dementia compounds in functional foods or as pharmaceuticals.
Wang, Juan;Wang, Qunhui;Xu, Zhong;Zhang, Wenyu;Xiang, Juan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권1호
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pp.26-32
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2015
Four types of straw, namely, soybean, wheat, corn, and rice, were investigated for use in lactic acid production. These straws were mainly composed of cellulose, hemicellulose, and lignin. After pretreatment with ammonia, the cellulose content increased, whereas the hemicellulose and lignin contents decreased. Analytical results also showed that the liquid enzymatic hydrolysates were primarily composed of glucose, xylose, and cellobiose. Preliminary experiments showed that a higher lactic acid concentration could be obtained from the wheat and soybean straw. However, soybean straw was chosen as the substrate for lactic acid production owing to its high protein content. The maximum lactic acid yield (0.8 g/g) and lactic acid productivity (0.61 g/(l/h)) were obtained with an initial reducing sugar concentration of 35 g/l at 30℃ when using Lactobacillus casei (10% inoculum) for a 42 h fermentation period. Thus, the experimental results demonstrated the feasibility of using a soybean straw enzymatic hydrolysate as a substrate for lactic acid production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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