Bacillus subtilis spore surface display (BSSD) technology is considered to be one of the most promising approaches for expressing heterologous proteins with high activity and stability. Currently, this technology is used for various purposes, such as the production of enzymes, oral vaccines, drugs and multimeric proteins, and the control of environmental pollution. This paper presents an overview of the latest developments in BSSD technology and its application in protein engineering. Finally, the major limitations of this technology and future directions for its research are discussed.
Experiments were carried out to asses the impotance of environmental conditions upon the growth rate, length compositions seedling and spore liberation of a red alga Glacilaric verrucosa. The alga grown in water of low salinity mixed with fresh water shows better growth rate, lager length composition and excellent seedling, whereas the one vegetated in an area of tidal exposure shows a somewhat retarded growth rate and poor seedlings. The rate of growth Increases from August to October and begins to diminish from December continuing to diminish through February. Therefore the spore settling time extends from May to lune. Although the sun-drying method is the most eacient way of inducing spore liberation, further investigations are necessary in oiler to use this method for the application to artificial spore settling.
The alkaliphilic, calcium carbonate precipitating Bacillus sp. strain AK13 can be utilized in concrete for self-repairing. A statistical experimental design was used to develop an economical medium for its mass cultivation and sporulation. Two types of screening experiment were first conducted to identify substrates that promote the growth of the AK13 strain: the first followed a one-factor-at-a-time factorial design and the second a two-level full factorial design. Based on these screening experiments, barley malt powder and mixed grain powder were identified as the substrates that most effectively promoted the growth of the AK13 strain from a range of 21 agricultural products and by-products. A quadratic statistical model was then constructed using a central composite design and the concentration of the two substrates was optimized. The estimated growth and sporulation of Bacillus sp. strain AK13 in the proposed medium were 3.08 ± 0.38 × 108 and 1.25 ± 0.12 × 108 CFU/ml, respectively, which meant that the proposed low-cost medium was approximately 45 times more effective than the commercial medium in terms of the number of cultivatable bacteria per unit price. The spores were then powdered via a spray-drying process to produce a spore powder with a spore count of 2.0 ± 0.7 × 109 CFU/g. The AK13 spore powder was mixed with cement paste, yeast extract, calcium lactate, and water. The yeast extract and calcium lactate generated the highest CFU/ml for AK13 at a 0.4:0.4 ratio compared to 0.4:0.25 (the original ratio of the B4 medium) and 0.4:0.8. Twenty-eight days after the spores were mixed into the mortar, the number of vegetative cells and spores of the AK13 strain had reached 106 CFU/g within the mortar. Cracks in the mortar under 0.29 mm were healed in 14 days. Calcium carbonate precipitation was observed on the crack surface. The mortar containing the spore powder was thus concluded to be effective in terms of healing micro-cracks.
The environmental change during the upper Holocene was restored at Kimpo alluvial plain on the left bank of Han-river near the Yellow Sea according to the results of pollen analysis and carbon dating, based on the sea-level change from Ilsan area. Pollenzone I (5.8~7.0 m.a.s.l.) was the period of AP-dominance, including mostly Alnus. Study area was under the lagoon or swamp environment influenced by Flandrian transgression during 5,000~3,200 BP. Pollenzone II (7.0~7.4 m.a.s.l.) was the period of Spore & NAP-dominance. It represents that the vegetational environment was changed to drier condition by falling underwater surface caused by sea-level regression, and influenced by human activity during 3,200~2,300 BP. Subzone I a represented the characteristics of the climax of transgression. During subzone I b, herbs with the dominant Alnus were increased gradually, and it was correlated to the stagnation of high sea-level. Subzone II a was the dominant period of Spore by the gradual falling of sea-level. After that, the study area in swamp was emerged to the lowland by the fallen sea-level and herbs, especially Gramineae increased suddenly during Subzone II b. The sudden increase of NAP such as Artemisia, Chenopodiaceae and Umbelliferae with Gramineae during this period indicates the beginning of agriculture at this study area.
The marked spread of the cockraches of recent years has raised a great social problem in urban areas. The cockroach have to remove1 because transmit a disease to human as pest insect, but particulars are not yet reported on biological control agent for the cockroach removal. This study was tried for the first time on biological control for the cockroach removal. The obtained results were as follows : 1. The isolated were spore-forming bacillus 1098 strain in soil. The No. 109(TH 109) strain of the among spore-forming bacillus was showed the poisonous against Cockroach. 2. The biological characteristics and flagella antigenicity of the strain is similar to Bacillus thur-ingiensis subsp. indiana. 3. TH 109 strain have the delta-endotoxin of cuboid shap. 4. This delta-endotoxin of product by TH 109 strain was toxic to the cockroach(Blattella gemzanica. L).
For more convenient and rapidly isolation of Bacillus thuringiensis subsp. israelensis(Bti), 1) heat treatment spore forming bacteria, 2) growth in enrichment culture media for Bacillus sp. and 3) selection of bacteria producing a lecithinase for Bacillus thuringiensis subsp. israelensis, were performed. Spore forming bacteria were counted 4.8 $\times $ 10$^{8}$cells/g soil on NAPGCY media, 9.2 $\times $ 10$^{7}$cells/g soil on NA media, and 3.6 $\times $ 10$^{8}$cells/g soil on NAAC media, respectively. Bacteria producing only a lecithinase were reached at 25.2% on medium contained egg york, bacteria only producing a delta-endotoxin were reached at 23.2% by phase contrast microscope, and bacteria producing a lecithinase & a delta-endotoxin simultaneously were reached at 13.7%. Bacillus thuringiensis which producing a lecithinase and a delta-endotoxin simultaneously among bacteria producing a lecithinase, were reached at 56.5%; A half of Bacillus thuringiensis was produced a delta-endotoxin, but not produced a lecithinase. Among 8 isolates of Bacillus thuringiensis, two strain of Bti which has a mosquito-cidal toxin, were detected by PCR using a specific primer of $\delta $-endotoxin gene from Bti.
Antifungal activity of Korean and Chinese lichen-forming fungi(LFF) was evaluated against plant pathogenic fungi of Botryosphaeria dothidea, Botrytis cinerea, Diaporthe actinidiae, Pestalotiopsis longiseta, Pythium sp., Rhizoctonia solani, and Sclerotium cepivorum. The LFF were isolated from Cladonia scabriuscula, Melanelia sp., Nephromopsis asahinae, Nephromopsis pallescens, Parmelia laevior, Pertusaria sp., Ramalina conduplicans, Ramalina sinensis, Ramalina sp., Umbilicaria proboscidea and Vulpicida sp. with discharged spore method. The isolates were deposited in the herbarium of Korean Lichen Research Institute(KoLRI) in Sunchon National University. The LFF of Melanelia sp., P. laevior, Pertusaria sp., R. conduplican and Ramalina sp. exhibited strong antifungal activity against all of the pathogenic fungi examined. Among them, LFF of P. laevior showed more than 90% of inhibition in fungal hyphae growth, compared with control. The results imply that LFF can be served as a promising bioresource to develop novel biofungicides. Mass cultivation of the LFF is now under progress in laboratory conditions for chemical identification of antifungal substances.
Status of Arbuscular Mycorrhizal (AM) colonization in seven tree species (Albizia saman, Acacia auriculiformis A. Cunn. ex Benth., Albizia lebbeck, Chickrassia tabularis A. Juss., Eucalyptus camaldulensis Dehnn., Gmelina arborea (Roxb) DC, Swietenia macrophylla King.) collected from the hilly areas of Chittagong University (CU) was investigated. Roots and rhizosphere soil samples were collected in different seasons (pre-monsoon, monsoon and post monsoon). Percentage of AM colonization in root and number of spores/100 gm dry soil were assessed. The result of the investigation reveals that the intensity and percentage of AM colonization varied in different forest tree species in different seasons. In this study, maximum AM colonization and spore population were found in pre-monsoon and minimum were in monsoon season. The intensity of colonization was maximum in C. tabularis (74.43%) in pre-monsoon, A. lebbeck (69.45%) in monsoon and S. macrophylla (67.8%) in post monsoon seasons and minimum in A. auriculiformis (53.75%) during pre-monsoon, A. saman (24.4%) in monsoon and A. saman (19.36%) in post monsoon. The number of spores found per 100 g dry soil ranged between 164-376 during pre-monsoon, 27-310 during monsoon and 194-299 in post monsoon season. Out of six recognized genera of AM fungi, Glomus, Sclerocystis, Entrophospora, Scutellospora, Acaulospora and other unidentified spores were observed.
In nature, marine mussels (Mytilus edulis) suffer less fouling colonization on the newly formed sides of their shells. Using settlement assays with algal spores of Porphyra suborbiculata, we determined that spore attachment and germination on the periostracum decreased to 36.8 and 3.3 %, respectively. Additionally, the spore settlement was considerably diminished by periostracum dichloromethane extracts containing 19 % oleamide, a major antifouling compound. A scanning electron micrograph of the surface revealed a regular ripple structure with approximately $1.4{\mu}m$ between ripples. Based on these results, mussel periostraca or their associated biomimetic materials may become environmentally friendly, antifouling agents for preventing the settlement of soft foulants.
BACKGROUND: Coleosporium plectranthi, an obligate parasite, which is responsible for the rust disease of Perilla frutescens, a plant in Korea, commonly known as Perilla. All rusts are obligate parasites, meaning that they require a living host to complete their life cycle. They generally do not kill the host plant but can severely reduce growth and yield. Food and feed spoilage fungi cause great economic losses worldwide. It is estimated that between 5 and 10% of the world food production is wasted due to fungal deterioration. Rust disease of Perilla is highly frequent and is widely spread in Korea. The present study was designed to investigate a novel media for the urediniospore germination in vitro and anti-rust activity as well as GC-MS analysis of oak pyroligneous liquor. METHOD AND RESULTS: Urediniospores were collected from the infected leaf of Perilla. Spore suspension was made and the suspension was inoculated in the 2% water agar media with proper humidity, then they were incubated at $26^{\circ}C$ for 56 hrs. The GC-MS analysis of the oak pyroligneous liquor was also done to check the chemical composition. GC-MS analysis of the wood vinegar was found 15 compounds, among them o-mthoxyphenol (25.93%), 2,6-dimethoxyphenol (16.06%), 4-methylenecyclohexanone (10.69%), 2,3-dihydroxytoluene (7.84%), levoglucosane (6.14%) and propanoic acid (5.32%) were the major components. Different concentration of the oak pyroligneous liquor was used, and spore inhibition was recorded on the basis of spore counting. The best results were noted at the concentration of 50% solution where 31.8% spores were inhibited. CONCLUSION: On the basis of the chemical composition of the oak pyroligneous liquor and the activity recorded we can use it as an anti-rust agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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