The oil emulsion and alhydrogel vaccines were prepared from a strain of enterotoxigenic Escherichia coli isolated from calves with diarrhea and their protective efficacy and immunogenicity were tested in Guinea-pigs. Enterotoxigenic Escherichia coli, isolated from calves with diarrhea, has K99 and F4l antigen as 46.2% and 50.9% with 48 and 53 strains respectively out of 104 strains. The protective efficacy of the gel and oil vaccines were 60% and 80% respectively. Agglutinin titers to sera of Guinea-pigs vaccinated with experimental gel and oil vaccines peaked at 5 and 6 weeks after vaccination.
Kim, Jong-man;Yoon, Young-dhuk;Park, Jeung-moon;Kim, Bong-hwan
Korean Journal of Veterinary Research
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v.26
no.1
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pp.97-102
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1986
The prevalence of diarrhea caused by enterotoxigenic Escherichia coli was surveyed on 445 calves in 6 farms which were located in the central part of Korea. The incidence of enterotoxigenic Escherichia coli in calves with diarrhea was investigated by detecting the K99 and F41 antigens from the isolated strains of Escherichia coli The incidence of colibacillosis in calves was 23.3%. Of 238 strains of Escherichia coli isolated from calves with diarrhea, 73 strains(30.6%) were proved possessing the K99 antigen by mannose-resistant hemagglutination(MRHA) using horse red blood cells and 79(33.1%) possessing F41 antigens by MRHA using guinea-pig red blood cells. The minca medium, nutrient broth, tryptic soy broth and brain heart infusion were tested for yield of K99 and F41 pili. The production of pili was greatest in minea medium. The best detachment method of the K99 and F41 pili from the cells was heat treatment for 20 minutes at $60^{\circ}C$ and concentration by precipitation with ammonium sulfate. The purified antigens of K99 and F41 were polypeptides with molecular weights of 18,500 and 29,500, respectively by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis.
Yoo, Anna;Cha, Seung Bin;Shin, Min Kyoung;Park, Hong Tae;Seo, Hyo Sil;Kim, Jae Won;Yoo, Han Sang
Korean Journal of Veterinary Research
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v.53
no.2
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pp.83-88
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2013
Field efficacy of enterotoxigenic Escherichia coli-specific phage (${\Phi}CJ19$) as a feed additive was evaluated in weaning piglets. Fifty-four piglets at 3-4 weeks old were allocated in three different groups and two of them were fed with bacteriophage at different concentrations ($10^6PFU/kg$ feed and $10^8PFU/kg$ feed, respectively) for 30 days. Body weight and feed intake were measured at 10 days interval and body condition and fecal score were inspected every day. Based on the measurement, feed conversion rate (FCR) and average daily gain (ADG) of each group during 30 days were analyzed. The analysis suggests that the bacteriophage may help the improvement of FCR and ADG at $10^8PFU/kg$ of bacteriophage feeding group in 30 days. A result from analysis of fecal score indicates that the bacteriophage also may help to relieve the intermittent diarrhea in post-weaning stage. Those results suggest that bacteriophage might help the growth of piglets in post-weaning stage.
독소원성 대장균(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC, EC81, serotype O148:H28)이 생산하는 heat labile enterotoxin(LT)를 검색해 본 결과, reversed passive latex agglutination(RPLA)법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서까지 양성반응을 보였으며 polymerase chain reaction (PCR)기법에 있어서는 10 ng으로부터 1 pg희석용액에서까지 147-base pair(bp)의 LT DNA fragment가 확인되었다. Clostridium perfringens A형 (NCTC8238, Hobbs serotype 2)이 생산한는 장독소를 검색해 본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서 까지 양성반응을 보여 독소원성대장균이 생산하는 LT와 일치하였으나, PCR기법에 있어서는 10ng로부터 10 pg 희석용액에서 까지 354-bp의 DNA fragment가 확인되어 독소원성대장균이 생산하는 LT보다 1/10의 낮은 감도를 보였다. PCR기법은 RPLA법에 비하여 훨씬 신속하고 소량의 sample로 장독소를 확인할 수 있었다.
To construct a novel vaccine candidate against bovine enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), FanC, the major subunit of K99 fimbriae adhesion, was inserted into secretion plasmid pYA3560 containing a ${\beta}-lactamase$ secretion system. This was then transformed into ${\Delta}asd$${\Delta}crp$ Salmonella (S.) Typhimurium and designated as JOL950. Secretion of recombinant fanC fimbrial antigens was confirmed by immunoblot analysis. Groups of mice were inoculated with single or double doses of JOL950. Another group was used as a negative control. Compared to control mice, all immunized mice had significantly higher levels (p < 0.05) of serum immunoglobulin (Ig)G, and secretory IgA against FanC. The IgG2a and IgG1 titer assays revealed that immunization highly induced IgG2a compared to that of IgG1, indicating that T helper-1- related cell-mediated immune responses may be elicited by JOL950. The results show that both systemic and mucosal immunities against selected fimbrial antigens of bovine ETEC expressed by a live attenuated S. Typhimurium strain are prominently produced in mice immunized with JOL950 via an oral route.
Kim, Jong-man;Yoon, Young-dhuk;Park, Jeung-moon;Kim, Bong-hwan
Korean Journal of Veterinary Research
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v.26
no.1
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pp.103-108
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1986
The oil emulsion and alhydrogel pilli vaccines were prepared from a strain(O9: K35, K99, F41) of enterotoxigenic Escherichia coli isolated from calves with diarrhea and their immunogenicity was tested in guinea-pigs, pregnant goats and cows. Serum antibody responses to K99 and F41 antigens in guinea-pigs given experimental oil and gel vaccines peaked at 4 and 6 weeks after vaccinations. At that time, the mean hemagglutination inhibition titers to K99 and F41 antigens in guinea-pigs given oil vaccine were 1:25 and 1:1, 218 and those given gel vaccine were 1:54 and 1:724 respectively. Agglutinin titers in pregnant goats given the oil vaccine were significantly higher(mean 1:2,347) compared to those of control group(mean 1:160). Less than 12.5% of goatlings from vaccinated goats developed scours compared to nearly 100% in control group after oral challenge with enterotoxigenic Escherichia coil within 24 hours after birth. The highest agglutinin titers of cow serum and colostrum and of the serum of calves 48 hours after birth from cows given oil vaccine were 1:256, 1:512 and 1:64 respectively. On the other hand, those titers of serum and colostrum and of the serum of nursing calves from nonvaccinated cows were 1:8, 1:16 and 1:20 respectively. The protective efficacy of the oil emulsion vaccine was 72.1% under field conditions. These results strongly indicated that the vaccine could be applied for protection of diarrhea caused by enterotoxigenic Escherichia coli in calves.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.22
no.2
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pp.131-137
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1987
The incidnce of enterotoxigenic Esherichia coli(ETEC) was investigated in E. coli strains isolated from Korean infants less than two years old. Over a period of 12 months, ETEC strains have been isolated from 45(45.0%) of 100 children with acute diarrhea and from 9(20.5%) of 44 children without diarrhea. In the group with diarrhea, 41(41.0%) strains produced heat-stable toxin, 3(3.1%) produced heat-labile toxin, and 1(1.0%) produced both heat-stable and heat-labile toxins. In the control group, 7(15.9%) released heat-stable toxin, 2(4.5%) released heat-labile toxin and none released both. A statistical association of strains releasing heat-stable toxin was significant(P<0.025).
Kim, Gyeong-Hwuii;Kim, Jae-Won;Kim, Jaegon;Chae, Jong Pyo;Lee, Jin-Sun;Yoon, Sung-Sik
Food Science of Animal Resources
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v.40
no.5
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pp.746-757
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2020
Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is the major pathogenic E. coli that causes diarrhea and edema in post-weaning piglets. In this study, we describe the morphology and characteristics of ØCJ19, a bacteriophage that infects ETEC, and performed genetic analysis. Phage ØCJ19 belongs to the family Myoviridae. One-step growth curve showed a latent phase of 5 min and burst size of approximately 20 phage particles/infected cell. Phage infectivity was stable for 2 h between 4℃ and 55℃, and the phage was stable between pH 3 and 11. Genetic analysis revealed that phage ØCJ19 has a total of 49,567 bases and 79 open reading frames (ORFs). The full genomic sequence of phage ØCJ19 showed the most similarity to an Escherichia phage, vB_EcoS_ESCO41. There were no genes encoding lysogeny, toxins, virulence factors, or antibiotic resistance in this phage, suggesting that this phage can be used safely as a biological agent to control ETEC. Comparative genomic analysis in terms of the tail fiber proteins could provide genetic insight into host recognition and the relationship with other coliphages. These results showed the possibility to improve food safety by applying phage ØCJ19 to foods of animal origin contaminated with ETEC and suggests that it could be the basis for establishing a safety management system in the animal husbandry.
Detection for heat-labile enterotoxin(LT) of enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC, EC81, O148:H28) and enterotoxin of enterotoxigentic Clostridium perfringents type A(CP, NCTC8238, Hobbs serotype 2) by use of a polymerase chain reaction (PCR) assay were positive reaction, which using LT gene-specific primers of ETEC with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 1 pg of a DNA fragment of 417-bp in EC81 and enterotoxin gene-specific primers of CP with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 10pg of a DNA fragment of 364-bp in NCTC8238. Detection for a LT gene of ETEC highly appeared 10-fold sensitivity than an enterotoxin gene of CP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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