본 시험은 국내 사육 돼지 분변에서 분리, 동정한 E. duran LP44의 생균제로서의 효과 및 습식급이 형태로 생균제를 급여하였을 경우, 생균제 급여 이후 자돈의 성장에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 돈분으로부터 180균주의 혐기성 세균을 분리한 후, 내산성 및 내담즙성이 있는 E. duran LP44균주를 선발하였다 E. durans LP44 배양물을 이유자돈에게 급여한 사양시험에서, 전체사양 시험기간 동안, 일당증체량 및 일당식이 섭취량에 있어서는 WF 처리군이 DF 처리구와 비교하여 높게 평가되었으나, 통계적으로 유의적인 차이를 보이지 않았다. 또한, 식이효율에 있어서도 처리구간에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 또한, 영양소 소화율에 있어서는 사양시험 개시 후 5일째 되는 날에 건물과 질소 소화율은 WF+SED군과 WF+10ED군이 DF군과 WF군과 비교하여 통계적으로 높게 평가되었다(p<0.05). 또한, 14일째 되는 날, 건물 소화율에 있어서는 WF+10ED군이 DF군과 비교하여 유의적으로 높게 평가되었으며, 질소 소화율에 있어서는 WF+10ED군이 다른 처리군과 비교하여 통계적으로 높게 평가되었다(p<0.05). 결론적으로 국내 사육 돼지 분변에서 분리, 동정한 E. duran LP44 배양물을 습식급이 형태로 급여한 후 자돈 성장에 미치는 영향에 대한 시험에서,E. durans LP44 배양물을 급여하였을 경우 자돈 시기에 성장 및 영양소 소화율을 향상시키는 것으로 사료된다.
A total of 1,780 isolates of Enterococcus spp. were isolated from 63,133 clinical specimens from Dec 1, 2005 to Nov 1, 2006 in "C" hospital. Isolation frequencies of Enterococcus spp. were 50.9% for E. faecalis, 41.7% for E. faecium, and 7.4% for other Enterococcus spp. containing E. avium, E. gallinarum, E. casseliflavus, E. durans, E. hirae, and E. raffinosus. There were no significant difference between gender, but according to the age group analysis, Enterococcus spp. were more frequently isolated in patients over 50 years old (20.0~24.6%) than those isolated from the patients under the age of 0~49 (1.3~9.4%). In monthly analysis, Enterococcus spp. were the most frequently isolated in April (11.9%), but presented at lowest frequency in February (5.2%). Seasonal analysis did not show a significant difference. Over half of enterococci were isolated from random urine (44.9%) and catherterized urine (15.7%). Frequencies of vancomycin resistant E. faecalis and E. faecium were 0.1% and 31.0%, respectively. Teicoplanin resistant Enterococcus was 13.3% in E. faecalis, 17.6 % in E. faecium. The Enterococcus species showing over 80% susceptibility against antimicrobial agents were E. faecalis, E. durans and E. hirae in vancomycin; E. faecalis, E. gallinarum, E. casseliflavus, E. durans and E. hirae in ampicillin. The antimicrobial agent showing susceptibility against whole group of Enterococcus species was only linezolid (95.9%), and a selection of antimicrobial agent is necessary to do essential performance identification and susceptibility tests.
Alshammari, Eyad;Patel, Mitesh;Sachidanandan, Manojkumar;Kumar, Prashant;Adnan, Mohd
한국축산식품학회지
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제39권5호
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pp.844-861
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2019
Over the last few years, marine environment was found to be a source of surplus natural products and microorganisms with new bioactive secondary metabolites of interest which can divulge nutritional and biological impact on the host. This study aims to assess the possible, inherent and functional probiotic properties of a novel probiotic strain Enterococcus durans F3 (E. durans F3) isolated from the gut of fresh water fish Catla catla. Parameters for evaluating and describing the probiotics described in FAD/WHO guidelines were followed. E. durans F3 demonstrated affirmative results including simulated bile, acid and gastric juice tolerance with exhibited significant bactericidal effect against pathogens Staphylococcus aureus, Salmonella Typhi, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. This can be due to the enterocin produced by E. durans F3 strain, which was resolute by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) gel with amplification of the anticipated fragment of a structural gene; enterocin A, followed by antibiotic susceptibility assessment. Effective antioxidant potentiality against ${\alpha}$-diphenyl-${\alpha}$-picrylhydrazyl free radicals including lipase, bile salt hydrolase activity with auto-aggregation and cell surface hydrophobicity was similarly observed. Results are proving the potentiality of E. durans F3, which can also be used as probiotic starter culture in dairy industries for manufacturing new products that imparts health benefits to the host. Finding the potent and novel probiotic strains will also satisfy the current developing market demand for probiotics.
소아의 구강으로부터 분리한 비수용성 글루캔 형성 억제세균의 Streptococcus mutans 치태 형성에 대한 억제 정도와 분리 세균속의 타액내 농도가 타액내 전체 세균의 농도에 미치는 영향을 본 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 구강으로부터 분리한 비수용성 글루캔 형성 억제세균의 효과를 비커 와이어 검사로 본 결과, 교정용 와이어상에 형성된 치태의 무게가 Streptococcus mutans 단독배양시 152mg에서 Enterococcus durans, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus oralis와의 혼합배양시 각각 4mg, 78mg, 72mg으로 감소되었다. Streptococcus mutans의 생균수는 단독배양시 ml당 $3.6{\times}10^8$ 개에서 Enterococcus durans, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus oralis와의 혼합배양시 각각 ml당 $1.4{\times}10^6,\;5.6{\times}10^6,\;3.8{\times}10^6$으로 감소하였다. 소아로부터 얻은 타액을 BHI agar에 접종하였을 때의 생균수는 $4.8{\times}10^6$에서 $1.3{\times}10^9$이었으나, 이러한 전체 세균의 농도는 타액내 Enterococcus, Lactobacillus, Streptococcus mutans를 억제하는 Streptococcus의 농도와 관련이 없었다. 이상의 결과를 종합하면 소아의 구강으로부터 분리한 비수용성 글루캔 형성 억제 세균의 Streptococcus mutans 치태형성에 대한 억제는 Streptococcus mutans의 증식을 억제하여 일어났으며, Enterococcus, Lactobacillus, Streptococcus mutans를 억제하는 Streptococcus의 구강내 농도는 구강 즉 타액내 전체 세균의 농도에 영향을 미치지 않았다.
장구균은 사람의 구강, 질, 장내 등에 정상적으로 존재하는 세균이다. 본 연구에서는 구강에서 분리된 장구균중 Enterococcus durans로 동정된 분리균주 4주의 특성과 구강내 주요 세균인 Streptococcus mutans와 Streptococcus oralis와의 관계를 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 분리균주에 대한 당 발효 검사와 생화학적 검사 결과, 비슷한 양상을 보였다. 2. 분리균주 모두 erythromycin, penicillin, tobramycin, ampicillin, teicoplanin, ciprofloxacin, vancomycin. gentamicin, kanamycin 및 streptomycin에 대해 감수성을 보였다. 3. S. mutans를 일회용 큐벧에서 단독 배양시 550 nm에서의 흡광도가 1.405이었으나. S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시에는 각각의 흡광도가 0.855, 0.867, 0.797, 1.083으로 감소되었다. 4. 비커 와이어 검사 결과, S. mutans 단독 배양시 형성된 인공치태의 평균 무게는 $1566{\pm}103mg$이었다. S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시에는 각각 $44{\pm}5mg,\;41{\pm}12mg,\;34{\pm}7mg,\;38{\pm}12mg$으로 현저히 감소되었다. 배양후 생균수는 S. mutans 단독 배양시 ml당 $2.0\times10^9$ 이었으나, S. mutans와 4주의 분리균주 혼합 배양시 S. mutans는 $2.0\times10^7$ 내지 $6.0\times10^7$으로 감소되었다. 5. S. oralis 단독 배양시 ml당 $2.1\times10^8$ 이었으나, S. oralis와 4주의 분리균주 혼합 배양시 S. oralis는 $1.4\times10^7$ 내지 $7.0\times10^7$으로 감소되었다. 6. 3주의 분리균주로 부터 약 60 kb의 plasmid를 분리 할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하면 구강에서 분리된 E. durans는 S. mutans의 증식을 억제하여 인공치태 형성을 저지하였고, S. oralis의 증식은 약간 억제하였다.
분변오염의 지표가 되는 장구균을 검출하기 위하여 장구균 선택 배지를 개발하였다. 기존에 알려진 여러 장구균 검출배지 중 총 9종류(Enterococci Confirmatory agar, Azide dextrose agar, Bromocresol-purple azide agar, Esculin bile agar, Citrate azide tween carbonate agar, KF Streptococcus agar, BROLACIN agar, Kanamycin esculin azide agar, Membrane filter Enterococcus selective agar)의 배지를 선별하였고, 배지 성분을 적절히 조합하여 새로운 배지 Enterococcus Mixed medium을 개발하였다. 배지의 효과를 검증하기 위하여 장구균 6종류(Enterococcus avium KACC 10788, Enterococcus faecium KACC 11954, Enterococcus saccharolyticus KACC 10783, Enterococcus durans KACC 10787, Enterococcus faecalis KACC 11304, Enterococcus hirae KACC 10779)와 비장구균 3종류(Escherichia coli KACC 10005, Staphylococcus aureus subsp. aureus KACC 10768, Bacillus subtilis KACC 10111)를 사용하였다. 그 결과 새롭게 개발된 장구균 검출배지에서 비장구균의 생장이 억제된 반면에 장구균 6종류는 모두 생장하는 것을 확인하였다. 또 환경시료에서 장구균을 분리할 수 있는지 확인하기 위해 하천과 바다에서 채취해온 시료를 이용하여 실험한 결과 장구균의 생장을 확인하였다. 따라서 이 배지를 이용하면 수질 분변오염의 지표가 되는 장구균을 효과적으로 검출할 수 있음을 확인하였다.
원유시료에서 분리한 장알균속 세균 245균주의 항생제 내성에 관여하는 다중약물 유출 펌프 유전자 분포도와 항생제 내성 패턴을 연구하였다. 그 결과 245 장알균속 균주의 ampicillin에 대한 내성률은 44.1%, erythromycin에 대한 내성률은 79.2%, tetracycline에 대한 내성률은 76.3%, chloramphenicol에 대한 내성률은 36.3%였으며 vancomycin과 ciprofloxacin에 대해서는 모두 감수성임을 알 수 있었다. 내성 관련 유전자 중 MFS타입의 eme(A)는 82.1%의 장알균에 분포하였으며, ABC 타입의 유전자인 efr(A)는 72.7%, efr(B)는 77.1%, lsa는 71.8%의 장알균에 분포하였다. 특히 이러한 유전자의 기원 세균인 Enterococcus faecalis의 경우 eme(A)는 92.5%, efr(A)는 87.4%, efr(B)는 88.4%, lsa는 88.4%의 분포도를 나타내었다. 한편 동일한 장알균속이지만 종이 다른 장알균에서 eme(A)는 E. faecium 4균주, E. avium 7균주, E. durans 4균주 및 E. raffinosus 2균주에 분포하고 있었다. efr(A)는 E. faecium 2균주와 E. durans 2균주에 분포하였으며, efr(B)는 E. faecium 4균주, E. avium 5균주 및 E. durans 4균주에 분포하였다. 본 연구는 우리나라 원유시료에서 분리한 장알균속의 여러 종의 세균에서 동일한 다중약물 유출 펌프(multidrug efflux pump)의 분포에 대한 첫 번째 보고라 사료되며 E. faecalis 이외의 장알균속에서 이러한 유전자의 분포는 서로 다른 종간의 유전자의 수평적인 이동의 가능성을 시사한다.
This study aimed to detect Enterococcus spp. strain, a fecal contamination indicator, by PCR assay from short neck clams Venerupis philippinarum in Cheonsu Bay area, Chu Island area and Wonsan Island area, the west coast of Korea, from November 2022 to February 2023 of Enterococcus spp. strain was detected in 19 (79.2%) among 24 samples, and its concentration ranged from <18 to 33,000 MPN (most probable number)/100 g. The 269 isolated Enterococcus spp. strains were identified by PCR assay, and Enterococcus spp. distribution in short neck clams were E. faecium (39.8%), E. faecalis (23.0%), E. hirae (21.9%), E. gallinarum (10.4%), E. casseliflavus (1.5%), E. durans (1.5%) and unidentified strains (1.9%). Thus, E. faecium was the most dominant strain followed by E. faecalis. Overall, these results provide novel insight into the necessity for shellfish sanitation in the sea and could help reduce the fecal contamination risk.
The aim of this study was to explore the accuracy and feasibility of matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) in identifying bacteria from environmental sources, as compared with rpoA gene sequencing, and to evaluate the occurrence of bacteria of the genus Enterococcus in wild birds. In addition, a phyloproteomic analysis of certain Enterococcus species with spectral relationships was performed. The enterococci were isolated from 25 species of wild birds in central Europe (Poland). Proteomic (MALDI-TOF MS) and genomic (rpoA gene sequencing) methods were used to identify all the isolates. Using MALDI-TOF MS, all 54 (100%) isolates were identified as Enterococcus spp. Among these, 51 (94.4%) isolates were identified to the species level (log(score) ${\geq}2.0$), and three isolates (5.6%) were identified at a level of probable genus identification (log(score) 1.88-1.927). Phylogenetic analysis based on rpoA sequences confirmed that all enterococci had been correctly identified. Enterococcus faecalis was the most prevalent enterococcal species (50%) and Enterococcus faecium (33.3%) the second most frequent species, followed by Enterococcus hirae (9.3%), Enterococcus durans (3.7%), and Enterococcus casseliflavus (3.7%). The phyloproteomic analysis of the spectral profiles of the isolates showed that MALDI-TOF MS is able to differentiate among similar species of the genus Enterococcus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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