Wei, Mulan;Liu, Xujie;Cao, Chunyu;Yang, Jianlin;Lv, Yafeng;Huang, Jiaojiao;Wang, Yanlin;Qin, Ye
BMB Reports
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제51권11호
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pp.572-577
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2018
Recent studies showed that the PD-1/PD-L1 checkpoint blockade is a dramatic therapy for melanoma by enhancing antitumor immune activity. Currently, major strategies for the PD-1/PD-L1 blockade have mainly focused on the use of antibodies and compounds. Seeking an alternative approach, others employ endogenous proteins as blocking agents. The extracellular domain of PD-1 (ePD1) includes the binding site with PD-L1. Accordingly, we constructed a PD-1-based recombinantly tailored fusion protein (dFv-ePD1) that consists of bivalent variable fragments (dFv) of an MMP-2/9-targeted antibody and ePD1. The melanoma-binding intensity and antitumor activity were also investigated. We found the intense and selective binding capability of the protein dFv-ePD1 to human melanoma specimens was confirmed by a tissue microarray. In addition, dFv-ePD1 significantly suppressed the migration and invasion of mouse melanoma B16-F1 cells, and displayed cytotoxicity to cancer cells in vitro. Notably, dFv-ePD1 significantly inhibited the growth of mouse melanoma B16-F1 tumor cells in mice and in vivo fluorescence imaging showed that dFv-ePD was gradually accumulated into the B16-F1 tumor. Also the B16-F1 tumor fluorescence intensity at the tumor site was stronger than that of dFv. This study indicates that the recombinant protein dFv-ePD1 has an intensive melanoma-binding capability and exerts potent therapeutic efficacy against melanoma. The novel format of the PD-L1-blocked agent may play an active role in antitumor immunotherapy.
Electroacupuncture (EA) has been reported to increase pain threshold, and to enhance the NK cell activity by up-regulation of IFN-γ and endogenous β-endolphin. For the purpose of understanding the molecular mechanism of EA stimulation, we analyzed the gene expression profile of rat hypothalamus, treated on Zusanli (ST36) with EA, in comparison with control group by oligonucleotide chip microarray (Affymetrix GeneChip Rat Neurobiology U34 Array) and real-time RT-PCR. Sprague-Dawley (S-D) male rats were stimulated at the Zusanli (ST36) acupoint in restriction holder. Simultaneously the control group was given only holder stress without EA stimulation. In order to prove the appropriateness of EA treatment, we measured spleen NK cell activity with standard 51Cr release assay. NK cell activity of EA group was significantly increased comparing to control group. The microarray and PCR results show that EA treatment up-regulates expression of genes associated with 1) nerve growth such as NGF induced factor A and VGF, 2) signal transduction such as 5HT3 receptor subunit, AMPA receptor binding protein and Na-dependent neurotransmitter transporter, and 3) anti-oxidation such as superoxide dismutase and glutathione S-transferase. In addition, the activity of the anti-oxidative enzyme, SOD of hypothalamus, liver and RBC was enhanced compared to that of control. The list of differentially expressed genes may implicate further insight on the mechanism of acupuncture effects.
한국미생물학회 2004년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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pp.141-146
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2004
SPIN90 was identified to farm molecular complex with $\betaPIX$, WASP and Nck. This complex shows that SPIN90 interacts with Nck in a manner dependent upon cell adhesion to extracellular matrix, but $SPIN90{\cdot}{\beta}PIX{\cdot}WASP$ complex was stable even in suspended cells. This suggests that SPIN90 serves as an adaptor molecule to recruit other proteins to Nck at focal adhesions. SPIN90 was phosphorylated by ERK1, which was, itself, activated by cell adhesion and platelet-derived growth factor. Such phosphorylation of SPIN90 likely promotes the interaction of the $SPIN90{\cdot}{\beta}PIX{\cdot}WASP$ complex and Nck. It thus appears that the interaction of the $SPIN90{\cdot}{\beta}PIX{\cdot}WASP$ complex with Nck is crucial for stable cell adhesion and can be dynamically modulated by SPIN90 phosphorylation that is dependent on cell adhesion and ERX activation. SPIN90 directly binds syndapin I, syndapin isoform II-1 and II-s via its PRD region in vitro, in vivo and also associates with endocytosis core components such as clathrin and dynamin. In neuron and fibroblast, SPIN90 colocalizes with syndapins as puntate form, consistent with a role for SPIN90 in clathrin-mediated endocytosis pathway. Overexpression of SPIN90 N-term inhibits receptor-mediated endocytosis. Interestingly, SPIN90 PRD, binding interface of syndapin, significantly blocks internalization of transferrin, demonstrating SPIN90 involvement in endocytosis in vivo by interacting syndapin. Depletion of endogenous SPIN90 by introducing $\alpha-SPIN90$ also blocks receptor-mediated endocytosis. Actin polymerization could generate farce facilitating the pinch-out event in endocytosis, detach newly formed endocytic vesicle from the plasma membrane or push out them via the cytosol on actin tails. Here we found that SPIN90 localizes to high actin turn over cortical area, actin-membrane interface and membrane ruffle in PDGF treated cells. Overexpression of SPIN90 has an effect on cortical actin rearrangement as filopodia induction and it is mediated by the Arp2/3 complex at cell periphery. Consistent with a role in actin organization, CFP-SPIN90 present in actin comet tail generated by PIP5 $kinase\gamma$ overexpression. Therefore this study suggests that SPIN90 is functional linker between endocytosis and actin cytoskeleton.
본 연구의 목적은 제주지역 거시경제 전망모형을 이용하여 제주지역 사회의 중요한 정책에 대한 효과분석을 수행하는 것이다. 이를 위해, 본 연구에서는 기존의 Ko, et al.(2012) 모형을 본 연구의 목적에 맞게 확대·개편하였다. 연구의 주요 결과를 요약하면 다음과 같다. 첫째, 정책효과 분석을 위해, 2017년까지의 관련 통계자료와 데이터베이스를 갱신·점검하고, 새로운 대내외 정책변수들과 모듈(module)을 확대·추가함으로써 모형의 현실 설명력을 향상시켰다. 그리고 제주경제의 산업구조 변화에 따라 모형에서 설정된 산업구조를 보다 세분화시켰으며, 특히 케인즈 이론의 수요측면까지 모형에서 동시에 고려할 수 있도록 모형의 구조를 확장시켰다. 둘째, 모형의 평가에서는 구(舊)모형에 비해 본 연구의 모형에 대한 예측력이 우수한 것으로 평가되었다. 다만, 일부 내생변수에서 향후 지속적인 자료의 보완을 통해 보다 개선된 모형 개발의 시사점을 얻을 수 있었다. 셋째, 제2공항 건설에 따른 정책효과 분석결과, GRDP 1.25배, 고용 1.2배, 민간소비 1.48배, 투자 2.06배 증대되는 효과를 보이는 것으로 분석되었다. 그리고 경제성장률은 제2공항을 건설할 경우가 그렇지 않을 때보다 연평균 1.6%p 높은 것으로 분석되었다. 마지막으로 본 연구의 결과는 제주특별자치도의 정책의 사결정에 있어 직·간접적으로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
Zheng, Chun-Hua;Quan, Yuan;Li, Yi-Yang;Deng, Wei-Guo;Shao, Wen-Jing;Fu, Yan
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권4호
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pp.1589-1595
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2014
Objective: Forkhead box C2 (FOXC2) is a member of the winged helix/forkhead box (Fox) family of transcription factors. It has been suggested to regulate tumor vasculature, growth, invasion and metastasis, although it has not been studied in cervical cancer. Here, we analyzed FOXC2 expression in cervical tissues corresponding to different stages of cervical cancer development and examined its correlation with clinicopathological characteristics. In addition, we examined the effects of targeting FOXC2 on the biological behavior of human cervical cancer cells. Methods: The expression of FOXC2 in normal human cervix, CIN I-III and cervical cancer was examined by immunohistochemistry and compared among the three groups and between cervical cancers with different pathological subtypes. Endogenous expression of FOXC2 was transiently knocked down in human Hela and SiHa cervical cells by siRNA, and cell viability and migration were examined by scratch and CCK8 assays, respectively. Results: In normal cervical tissue the frequency of positive staining was 25% (10/40 cases), with a staining intensity (PI) of $0.297{\pm}0.520$, in CIN was 65% (26/40cases), with a PI of $3.00{\pm}3.29$, and in cancer was 91.8% (68/74 cases), with a PI of $5.568 {\pm}3.449$. The frequency was 100% in adenocarcinoma (5/5 cases) and 91.3% in SCCs (63/69 cases). The FOXC2 positive expression rate was 88.5% in patients with cervical SCC stage I and 100% in stage II, showing significant differences compared with normal cervix and CIN. With age, pathologic differentiation degree and tumor size, FOXC2 expression showed no significant variation. On transient transfection of Hela and SiHa cells, FOXC2-siRNA inhibition rates were 76.2% and 75.7%; CCK8 results showed reduced proliferation and relative migration (in Hela cells from $64.5{\pm}3.16$ to $49.5{\pm}9.24$ and in SiHa cells from $60.1{\pm}3.05$ to $44.3{\pm}3.98$) (P < 0.05). Conclusion: FOXC2 gene expression increases with malignancy, especially with blood vessel hyperplasia and invasion degree. Targeted silencing was associated with reduced cell proliferation as well as invasion potential.
1990년대 중반 국내 유통시장 개방 이후 우리나라 소매업의 가장 큰 변화중의 하나는 외국계 할인점의 등장과 백화점의 급성장이라 할 수 있다. 할인점과 백화점은 우리나라 소매시장의 주류를 이루어온 재래시장이나 슈퍼마켓 중심으로 형성되어 온 유통산업구조 변화를 가지고 왔다. 소매업이 단순히 물건을 구매하는 장소개념에서 즐거움, 행복등 다양한 가치를 제공하는 공간으로 변하고 있다. 따라서 본 연구의 목적은 이론적 실증적 연구를 통해 백화점 쇼핑경험가치가 백화점 브랜드나 이미지에 그리고 충성도에 미치는 영향관계를 파악하는데 있다. 특히 독립변수인 쇼핑 경험가치를 심미성, 유희성, 소비자이익, 서비스 우수성으로 구분하여 내생변수인 브랜드인지도, 브랜드이미지와 최종변수인 점포충성도에 유의적인 영향관계가 있는지를 검증하였다. 국내에 거주하면서 백화점 이용경험이 있는 소비자들을 대상으로 252명을 설문 조사하여, 235명을 분석에 사용하였다. 실증분석은 SPSS 17.0K와 AMOS 17.0을 이용하여 공분산 구조분석을 실시하였다. 그 결과 쇼핑 경험가치중에서 소비자 이익을 제외한 변수에서 인지도와 이미지에 정의 영향관계가 있을 뿐만 아니라, 점포 충성도에 정의 영향을 미치는 것으로 나타났다. 따라서 이 연구를 통해서 백화점 고객들은 단순히 상품을 구매하기 위해서 백화점을 이용하는 것이 아니라, 즐거움과 행복이라는 가치를 얻기 위해서 백화점을 이용하고, 어떤 측면에서 이런 면들이 백화점 이미지나 인지도, 충성도에 더 큰 영향을 준다고 할 수가 있다.
The effects of gibberilin ($GA_3$) on levels of endogenous indole-3-acetic acid (IAA) and zeatin in both fresh and stratified American ginseng (Panax quinquefolium) seeds were investigated. In our first experiment, the fresh seeds were stratified after soaked in 80 ppd $GA_3$ solution for 24 hours. We found that the IAA concentration in embryo increased by 50.7% and 82.1% respectively at the 120th day and the 188th day of stratification, and the zeatin concentration also increased by 3.8% and 51.6% respectively. In our second experiment, we treated the seeds after 134 days stratification with 80 ppm GA3 for 24 hours and then continued to stratify them. We found that the IAA concentration in embryo increased by 32.9% and 17.7% respectively at the 164th day and the 208th day of stratification while zeatin concentration increased by 22.7% and 30.6% respectively In our another experiment, we studied the effects of $GA_3$, abscislc acid (ABA) and GA, plus ABA on germination rate of seeds treated with these plant hormones during stratification. We found that when the stratified seeds whose ratio of embryo had reached 75% were treated with 80 ppm GA3 for 24 hours and then were allowed to be stratified for another 88 days, the weight and length of embryo (p < 0.05), and germination rate (p < 0.01) increased. In contrast, the 25 ppm ABA treated with for 24 hours was found to Inhibit the growth of embryo (p < 0.05) and reduce the germination rate (p < 0.05) . The experiment of combination treatment of $GA_3$ and ABA showed that $GA_3$ could relieve the inhibitory effects of the ABA on the development of the seeds.
이자섬은 이자를 구성하는 외분비조직에 둘러싸여 존재하는 내분비세포의 집단으로, 이자섬에서 분비되는 인슐린은 $\beta$세포에서 분비되는 호르몬이며, 세포질의 리보좀에서 합성되고 골지체를 경유하여 세포질로 방출되는 기작을 가지고 있다. 충분한 양의 이자섬 이식은 인슐린 의존형 당뇨병인 제1형 당뇨병에서 정상혈당을 회복시키고, 당뇨 합병증을 방지할 수 있는 치료방법으로 사용되고 있다. 하지만 당뇨병 환자에게 이식을 위한 이자섬의 양에 비해 공여자로부터 증여된 이자섬의 양은 제한적이다. 이러한 문제점은 이자섬의 증식으로 연구되고 있으나, 배양된 이자섬이 정상 조직내의 이자섬과 형태적 기능적으로 동일한 것인지에 관한 연구는 미비하였다. 따라서 본 연구에서는 분리된 이자섬과 배양된 이자섬을 구성하는 세포들의 내부구조의 변화를 주사전자현미경, 투과전자현미경을 이용하여 세포의 미세구조를 확인하고, 인슐린 항체를 이용한 $\beta$세포 내의 인슐린 분포양상을 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 분리된 이자섬의 $\beta$세포는 일반적인 핵 미토콘드리아, 세포질세망 그리고 인슐린 과립이 분포하고, 배양된 이자섬 $\beta$세포의 경우 분리된 이자섬에 비하여 일반적인 핵의 모습과 부피가 증가한 세포질과 미토콘드리아, 세포질세망 그리고 골지체의 발달이 이루어지는 것으로 관찰되었다. 인슐린 과립의 경우 분리된 이자섬에 비해 감소하며, 세포막 주위에 분포하는 것으로 관찰되었다. 배양된 이자섬에서 관찰되는 인슐린 과립 분포의 변화, 세포질세망의 증가, 골지체의 발달은 배양된 이자섬 $\beta$세포의 인슐린 생성 분비 기능의 향상과 부피의 증가가 이루어지기 위한 세포 내부의 형태적 변화가 이루어지는 것으로 추측된다.
Purpose: DNA in most cell is regularly damaged by endogenous and exogenous mutagens. Unrepaired damage resulted in apoptosis or may lead to unregulated cell growth and cancer. Inheritance of genetic variants at one or more loci results in an reduced DNA repair capacity. These polymorphisms are highly prevalent in the population, and therefore the attributable risks for cancer could be high. Several studies have documented that polymorphisms of XRCC1, XPD and XRCC3 are associated with skin cancer, especially, XRCC1 among of them has been reported frequently. So, this study involves the relationship between mutation of XRCC1 of squamous cell and basal cell cancer of the skin and risk of cancer development in Korean population. Methods: In case control study, study population (n=100, each cancer) is patients who were pathologically diagnosed as skin cancer(squamous cell carcinoma and basal cell carcinoma) in Yonsei Wonju Christian Hospital and Bundang CHA General Hospital between 1998 and 2004. The samples of DNA from whom no history of premalignant skin lesion and other malignant diseases were reported belonged to the control group(n=210). Blood and tissue samples were analyzed for presence of XRCC1 Arg399Glu, Arg280His, Arg194Trp using PCR/ RFLP method. Results: For Korean, there was a significant correlation between XRCC1 Arg399Gln gene mutation and risk of basal cell carcinoma development(Arg 399Gln(GA), p=0.012, OR=2.016, 95% CI; 1.230-3.305) /Arg399Gln (AA), p=0.011, OR=1.864, 95% CI; 1.149-3.026)). And, there was also significant correlation between XRCC1 Arg194Trp and risk of skin squamous cell carcinoma development (Arg194Trp (CT+TT), p=0.041, OR=0.537, 95% CI; 0.301-0.960)). In contrast, there was no significant correlation between XRCC1 Arg280His and risk of either basal cell carcinoma or squamous cell carcinoma development. Conclusions: Our result present that XRCC1 Arg399 Gln in basal cell carcinoma and XRCC1 Arg194Trp in squamous cell carcinoma have possibility of cancer risk and biomarker in Korean population. But XRCC1 Arg280 His known having cancer risk on other studies is not associated with cancer risk to squamous cell carcinoma and basal cell carcinoma in Korean population.
1991년 1월부터 1993년 2월까지 영남대학교 의과대학 부속병원에서 출생하여 신생아 중환자실에서 치료 받았던 12명의 미숙아를 대상으로 무작위로 대조군과 rHuEPO투여군으로 나누어 체중 kg당 100unit의 rHuEPO을 1주간 3회씩 4주동안 피하주사하고 rHuEPO투여 시작과 같이 체중 kg당 3mg의 elemental iron을 매일 경구투여 하였고 출생 후 수유가 가능할 때 부터 25unit씩의 비타민 E를 매일 경구투여 하였다. 망상적혈구, 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, 총 철결합능, erythropoietin농도, 활력징후, 체중, 간기능, 신장기능 및 피하주사부 위의 국소 부작용을 비교해 본 결과 치료 시작전 erythropoietin의 농도는 대조군과 rHuEPO투여군 사이에 차이는 없었으며 모두 정상 범위에 속했고 rHuEPO투여군에서는 치료 1주에서 3주사이에 급격한 망상적혈구의 경향이 관찰되었고 전반적으로 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, TIBC등에서는 차이가 없었다. 그리고 체중증가 및 활력증상, 간기능, 신장기능에서도 대조군과 rHuEPO투여군 사이에서 차이가 없었고 rHuEPO 투여 기간 동안 계속 정상적으로 유지되었다. 결론적으로 우리의 연구에서는 rHuEPO치료로 뚜렷한 혈색소치 및 헤마토크리의 증가를 볼 수 없었지만 망상적혈구가 치료 초기에 증가되는 경향이 관찰되었고 치료로 인한 특이할 만한 부작용이 없었으므로 첫째, 치료 기간 중의 예견할 수 없이 발생하는 패혈증, 무시할 수 없는 채혈량과 spontaneous endogenous erythropoietin생산이 rHuEPO의 반응에 미치는 영향, 둘째. rHuEPO의 가장 높은 효과를 얻기 위한 보다 적절한 투여용량, 기간 및 rHuEPO의 투여를 출생 후부터 바로 예방 목적으로 할 것인지 또는 출생 몇 주 후부터 rescue therapy로 할 것인지 투여 시작 시기, 셋째, 용량의 증가 및 감소에 동반되는 부작용의 정도등을 고려해서 앞으로 더 많은 미숙아를 대상으로 지속적인 연구를 한다면 rHuEPO을 이용해 더욱 더 활발하고 효과적으로 미숙아 빈혈을 치료할 수 있으리라 기대한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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