• 농업생명과학연구
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• 제46권2호
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• pp.107-114
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• 2012

The present study evaluated the potential use of immunoglobulin prepared from egg yolk of chickens immunized with Escherichia coli K88 (IgY-Ec) in the control of E. coli K88 infection in RAW 264.7 murine macrophage. The binding activity of IgY-Ec against E. coli K88 surface protein was more specific and increased than control IgY. In infection assay of E. coli in macrophage, the specific IgY-Ec to E. coli K88 remarkably inhibited the phagocytic activity comparing to nonspecific IgY (p<0.001). In adherence assay, bacterial adhesion on macrophage cells was definitely reduced by preincubation of IgY-Ec compared with nonspecific IgY (p<0.05). These findings suggested that IgY-Ec have the protective effects against pathogens and IgY-based diets may have potential benefits for preventing or treating various infections in domestic animals.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권4호
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• pp.299-306
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• 2008

사람 췌장 리파아제는 췌장에서 합성되어 소장으로 분비된 후, 음식물속의 지방을 가수분해하는 소화효소이다. 췌장 리파아제 단백질은 촉매활성도메인과 코리파아제 결합도메인의 2개의 도메인으로 구성되어 있다 본 연구에서는 리파아제 전체단백질과 촉매활성도메인 및 코리파아제 결함도메인 유전자를 PCR 방법으로 증폭하여 발현벡터에 넣은 후, 대장균에서 발현시켜 얻은 3가지 재조합 단백질을 산란계에 3차례 주사하여 면역반응을 유도하였다. 난황단백질을 분리하여 항체가를 측정한 결과, 코리파아제 결합도메인의 항원성이 가장 높은 것으로 밝혀졌다. 또한, 돼지 췌장 리파아제의 활성저해 실험에서도 코리파아제 결합도메인에 의해 만들어진 난황항체가 지방분해활성 저해작용이 가장 큰 것으로 밝혀졌다. 코리파아제 결합도메인 난황항체가 첨가된 지방을 실험동물에게 급여하고 혈중 주요 성분을 분석한 결과, 코리파아제 결합도메인에 의한 난황항체를 섭취한 경우에 혈중 중성지방의 수치가 대조군에 비해서 유의적으로 감소했음을 화인하였다. 결론적으로 코리파아제 결합도메인을 항원단백질로 사용하여 얻은 난황항체가 생체 내에서 췌장 리파아제의 활성을 억제할 수 있으며 비만억제제로의 개발 가능성이 있음을 보여주었다.

• 한국가금학회지
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• 제41권1호
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• pp.15-20
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• 2014

본 연구는 가금에서 호흡기 질환, 심낭수종, 봉입체 간염, 산란저하증 등을 유발하는 가금 아데노바이러스의 fiber 2 유전자에 대한 특이 난황 항체를 개발하고자 실험을 실시하였다. Fiber 2 유전자를 클로닝한 뒤, 대장균 발현 시스템을 이용하여 약 22 kDa의 재조합 fiber 2 단백질을 생산하였다. 이를 산란계에 3주 간격으로 총 4회 면역하여 혈청 및 난황 내 항체가를 측정한 결과, 면역 후 12주경에 항체가가 최고치에 달하였으며, 산란계로부터 획득한 난황 항체를 이용한 Western blot analysis 결과, 가금 아데노바이러스 내 fiber 2 단백과 특이적으로 반응한다는 것을 규명하였다. 결론적으로, 가금 아데노바이러스 fiber 2에 특이적인 난황 항체 생산에 성공하였으며, 이러한 특이적인 난황 항체는 가금 아데노바이러스로 인한 질병의 예방 및 치료에 활용 가능할 것으로 사료된다.

• 원예과학기술지
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• 제32권4호
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• pp.544-549
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• 2014

Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV), and Cucumber mosaic virus (CMV) are the most prevalent viruses infecting lilies in Korea. Leaf and bulb samples showing characteristic symptoms of virus infection were collected in 2012, and 80 field samples were analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The infection frequencies were 79% for LMoV, 5% for LSV, and 3% for CMV. The LMoV coat protein gene was amplified and cloned into the pET21d(+) expression vector to develop serological diagnostic tools to detect LMoV. The resulting carboxy-terminal His-tagged coat proteins were expressed in Escherichia coli strain BL21 (DE3) by induction with IPTG. The recombinant proteins were purified using Ni-NTA agarose beads and used as an antigen to produce polyclonal antibodies in laying hens. The resulting egg yolk immunoglobulin (IgY) specifically recognized LMoV from infected plant tissues in immunoblotting assays and had comparable sensitivity to that of a mammalian antibody. In addition, method of immunocapture RT-PCR using this IgY was developed for sensitive, efficient, and rapid detection of LMoV. Based on these results, large-scale bulb tests and detection of LMoV in epidemiological studies can be performed routinely using this IgY. This is the first report of production of a polyclonal IgY against a plant virus and its use for diagnosis.

• 약학회지
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• 제49권1호
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• pp.6-10
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• 2005

Immunoglobulin Y (IgY) obtained from chicken as the immunization host brings several advantages to antibody production, such as improved yield, lower cost, longer stability and higher specificity than mammalian immunoglobulin. In the present study, we attempted to produce IgY against a sialic acid-binding lectin, Maackia fauriei agglutinin (MFA), from egg yolk of white Leghorn hens. For the isolation of IgY from egg yolk, we applied a water dilution method. The weekly yield of IgY was determined by enzyme-linked immunosorbent assay, with a final yield of anti-MFA IgY from total IgY of approximately $1\%$. The yielded IgY were used to prepare IgY-affinity column conjugated with CNBr-activated Sepharose 4B, which resulted in the lectin being successfully purified in a single step from Maackia fauriei. This purified lectin exhibited the same hemagglutination activity as lectin purified using conventional purification methods.

• 대한수의학회지
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• 제36권4호
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• pp.895-902
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• 1996

산란계에 불활화 개 파보바이러스 백신을 근육내로 1주 간격으로 4회 접종하여 면역화시키고 최종 접종 2주후에 채란하여 $4^{\circ}C$에 보관하며 사용하였다. 난황항체는 5% HPMCP를 이용하여 분리하였고 0.5% HPMCP 용액은 lipid 침전에 매우 효과적이었으며 희석배수 10배에서 투명한 상층액을 나타내었다. 1차분리한 상층액의 단백질 농도는 2.5mg/ml이었고 최종 단백질 용액의 경우는 26.53mg/ml이었다. SDS-PAGE 전기영동상에서 분자량 60~70 KD 및 30~40 KD의 2 band가 나타났으며 non-reducing 전기영동에서는 닭 혈청 IgG와 같은 120~160 KD의 분자량을 보인 band가 각각의 분리용액에서 나타났다. 난황 항체의 개 파보바이러스에 대한 혈구응집억제반응 항체역가는 혈청의 역가에 비해 1주의 차이를 주며 증가했으며 난황 항체는 1:640에서 1:2560, 혈청은 1:640에서 1:5120을 나타내었다.

• 대한수의학회지
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• 제36권4호
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• pp.903-913
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• 1996

총 15두의 초유를 섭취하지 않은 신생자견을 대상으로 난황항체를 경구투여한 후 개 파보바이러스를 경구 접종하여 실험감염을 유발시켜 난황항체의 수동 면역에 의한 예방효과를 알아보고자 한다. 항체역가는 면역화된 산란계로부터 분리한 난황항체를 투여한 자견이 비면역 난황항체를 투여한 자견에 비해 높았다. 개 파보바이러스 접종 직전의 항체역가는 대조군의 경우 1:40에서 1:80, 실험군의 경우는 1:320에서 1:1280이었다. 모든 대조군의 자견들은 바이러스 접종후 4일에 임상증상을 나타내었고 총 7두중 6두가 폐사된 반면 실험군 자견은 2두만이 증상을 나타내었고 폐사 자견은 없었다(p<0.01). 개 파보바이러스를 경구 접종한 후 전체 자견의 혈구응집억제반응역가는 접종후 6일까지 감소하는 경향을 보였다. 접종후 5일의 분변내 혈구 응집반응역가는 실험군 자견의 경우 < 2에서 64였으며 대조자견은 216에서 2048로 높았다.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제49권6호
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• pp.798-803
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• 2011

난황에 포함된 IgY는 포유동물에 있는 바이러스나 항원에 반응하는 항체와 같은 역할을 한다. IgY 분리를 위해 난황을 전처리한 후 3-zone SMB를 이용하여 지질단백질들로 부터 분리하는 전산모사연구를 수행하였다. 회분식 크로마토그래피와 pulse input method(PIM) 실험을 이용하여 전산모사 매개변수와 흡착 등온식을 얻었다. Aspen simulator를 이용하여 전산모사를 수행하여 IgY를 분리할 수 있는 SMB 운전조건을 다음과 같이 제시할 수 있었다. 삼각형 이론의 $m_2$와 $m_3$ 값은 각각 0.18, 1.0이고 스위칭 타임은 419 초이었다. 전산모사 결과 raffinate의 IgY 순도가 98.39%이고 두번째 싸이클에서 순도가 정상상태에 도달하였다.

• Animal Bioscience
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• 제34권3_spc호
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• pp.449-456
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• 2021

Objective: Seaweeds could be an alternative and functional feed resource. The purpose of this experiment is to investigate the effect of dietary supplementation of Sargassum meal on laying performance and egg quality of layers. Methods: Two hundred 36-wk-old layers were divided into five treatment groups. Each treatment had four replicates with 10 hens per experimental unit. The corn-soybean meal basal diet was formulated as control group. Sargassum meals were included 0%, 1%, 2%, 3%, or 5% to diets for five treatment groups, respectively. Treatment groups were isocaloric-isonitrogenous diets. Laying performance and egg quality were measured for eight weeks. Results: Sargassum meal supplementation did not affect daily feed intake. Supplementation 1% to 3% of Sargassum meal in diets increased daily laying rate and egg mass compared with those from control group (p<0.05). Egg qualities among five groups were all similar. Supplementation of 3% Sargassum meal increased the lightness of egg yolk (p<0.05). Eggs produced from layers fed 1% and 2% Sargassum meal had a higher consumer's acceptability than the control group (p<0.05). In blood characteristics, contents of glucose, nitrogen, triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) increased as the increase of supplementation ratio of Sargassum meal (p<0.05). In serum antibody titers, supplementation of 2% Sargassum meal stimulated a higher immunoglobulin M (IgM) level than that from control group (p<0.05). However, IgM content of layers fed diets with Sargassum meal ≥3% were decreased (p<0.05). There was no difference in IgA and IgG titers among groups. Conclusion: Supplementation of 1% to 3% Sargassum meal has shown to increase egg laying rate and egg mass of Leghorn layers. However, high supplementation (5%) would negatively affect laying performance. In consideration of laying performance, egg quality, consumer responses, and blood antibody, supplementation of Sargassum meal was suggested 2% in the diet for layers.

• 한국축산식품학회지
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• 제32권6호
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• pp.706-712
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• 2012

The present study was aimed to produce a chicken polyclonal antibody against Cronobacter muytjensii and to develop an immunoassay for its detection. Purification of anti-C. muytjensii IgY from egg yolk was accomplished using various methods such as water dilution and salt precipitation. As a result, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis produced two bands around 30 and 66 kDa, corresponding to a light and a heavy chain, respectively. Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (IC-ELISA) was performed to determine the effectiveness of the chicken IgY against C. muytjensii. The optimum conditions for detecting C. muytjensii by indirect ELISA and checkerboard titration of the antigen revealed an optimum average absorbance at the concentration of 18 ${\mu}g/mL$, having ca. $10^8$ coated cells per well. The anti-C. muytjensii IgY antibody had high specificity for C. muytjensii and low cross-reactivity with other tested pathogens. In this assay, no cross-reactivity was observed with the other genera of pathogenic bacteria including Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterobacter aerogenes, Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes. In addition, detection of C. muytjensii in infant formula powder showed a low matrix effect on the detection curve of IC-ELISA for C. muytjensii, with similar detection limit of $10^5$ CFU/mL as shown in standard curve. These findings demonstrate that the developed method is able to detect C. muytjensii in infant formula powder. Due to the stable antibody supply without sacrificing animals, this IgY can have wide applications for the rapid and accurate detection of C. muytjensii in dairy foods samples.