Egbe, Alexander C.;Nguyen, Khanh;Mittnacht, Alexander J.C.;Joashi, Umesh
Journal of Chest Surgery
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제47권3호
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pp.211-219
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2014
Background: Our objectives were to review our institutional early and midterm experience with primary tetralogy of Fallot (TOF) repair, and identify predictors of intensive care unit (ICU) morbidity. Methods: We analyzed perioperative and midterm follow-up data for all cases of primary TOF repair from 2001 to 2012. The primary endpoint was early mortality and morbidity, and the secondary endpoint was survival and functional status at follow-up. Results: Ninety-seven patients underwent primary repair. The median age was 4.9 months (range, 1 to 9 months), and the median weight was 5.3 kg (range, 3.1 to 9.8 kg). There was no early surgical mortality. The incidence of junctional ectopic tachycardia and persistent complete heart block was 2% and 1%, respectively. The median length of ICU stay was 6 days (range, 2 to 21 days), and the median duration of mechanical ventilation was 19 hours (range, 0 to 136 hours). By multiple regression analysis, age and weight were independent predictors of the length of ICU stay, while the surgical era was an independent predictor of the duration of mechanical ventilation. At the 8-year follow-up, freedom from death and re-intervention was 97% and 90%, respectively. Conclusion: Primary TOF repair is a safe procedure with low mortality and morbidity in a medium-sized program with outcomes comparable to national standards. Age and weight at the time of surgery remain significant predictors of morbidity.
Kim, Kabsun;Kim, Jung Ha;Kim, Inyoung;Lee, Jongwon;Seong, Semun;Park, Yong-Wook;Kim, Nacksung
Molecules and Cells
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제38권1호
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pp.75-80
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2015
Osteoclasts are unique cells responsible for the resorption of bone matrix. MicroRNAs (miRNAs) are involved in the regulation of a wide range of physiological processes. Here, we examined the role of miR-26a in RANKL-induced osteoclastogenesis. The expression of miR-26a was upregulated by RANKL at the late stage of osteoclastogenesis. Ectopic expression of an miR-26a mimic in osteoclast precursor cells attenuated osteoclast formation, actin-ring formation, and bone resorption by suppressing the expression of connective tissue growth factor/CCN family 2 (CTGF/CCN2), which can promote osteoclast formation via upregulation of dendritic cell-specific transmembrane protein (DC-STAMP). On the other hand, overexpression of miR-26a inhibitor enhanced RANKL-induced osteoclast formation and function as well as CTGF expression. In addition, the inhibitory effect of miR-26a on osteoclast formation and function was prevented by treatment with recombinant CTGF. Collectively, our results suggest that miR-26a modulates osteoclast formation and function through the regulation of CTGF.
Kim, Il-Sup;Shin, Sun-Young;Kim, Young-Saeng;Kim, Hyun-Young;Yoon, Ho-Sung
Molecules and Cells
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제28권5호
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pp.479-487
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2009
Glutathione reductase (GR) is an enzyme that recycles a key cellular antioxidant molecule glutathione (GSH) from its oxidized form (GSSG) thus maintaining cellular redox homeostasis. A recombinant plasmid to overexpress a GR of Brassica rapa subsp. pekinensis (BrGR) in E. coli BL21 (DE3) was constructed using an expression vector pKM260. Expression of the introduced gene was confirmed by semi-quantitative RT-PCR, immunoblotting and enzyme assays. Purification of the BrGR protein was performed by IMAC method and indicated that the BrGR was a dimmer. The BrGR required NADPH as a cofactor and specific activity was approximately 458 U. The BrGR-expressing E. coli cells showed increased GR activity and tolerance to $H_2O_2$, menadione, and heavy metal ($CdCl_2$, $ZnCl_2$ and $AlCl_2$)-mediated growth inhibition. The ectopic expression of BrGR provoked the co-regulation of a variety of antioxidant enzymes including catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and glucose-6-phosphate dehydrogenase. Consequently, the transformed cells showed decreased hydroperoxide levels when exposed to stressful conditions. A proteomic analysis demonstrated the higher level of induction of proteins involved in glycolysis, detoxification/oxidative stress response, protein folding, transport/binding proteins, cell envelope/porins, and protein translation and modification when exposed to $H_2O_2$ stress. Taken together, these results indicate that the plant GR protein is functional in a cooperative way in the E. coli system to protect cells against oxidative stress.
Kim, Soo-Jin;Lee, Sang-Choon;Hong, Soon Kwan;An, Kyungsook;An, Gynheung;Kim, Seong-Ryong
Molecules and Cells
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제27권4호
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pp.449-458
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2009
The OsAsr1 cDNA clone was isolated from a cDNA library prepared from developing seed coats of rice (Oryza sativa L.). Low-temperature stress increased mRNA levels of OsAsr1 in both vegetative and reproductive organs. In situ analysis showed that OsAsr1 transcript was preferentially accumulated in the leaf mesophyll tissues and parenchyma cells of the palea and lemma. For transgenic rice plants that over-expressed full-length OsAsr1 cDNA in the sense orientation, the Fv/Fm values for photosynthetic efficiency were about 2-fold higher than those of wild type-segregating plants after a 24-h cold treatment. Seedlings exposed to prolonged low temperatures were more tolerant of cold stress, as demonstrated during wilting and regrowth tests. Interestingly, OsAsr1 was highly expressed in transgenic rice plants expressing the C-repeat/dehyhdration responsive element binding factor 1 (CBF1), suggesting the regulation of OsAsr1 by CBF1. Taken together, we suggest that OsAsr1 gene play an important role during temperature stress, and that this gene can be used for generating plants with enhanced cold tolerance.
Suppression of bone morphogenetic protein (BMP) signaling induces neural induction in the ectoderm of developing embryos. BMP signaling inhibits neural induction via the expression of various neural suppressors. Previous research has demonstrated that the ectopic expression of dominant negative BMP receptors (DNBR) reduces the expression of target genes down-stream of BMP and leads to neural induction. Additionally, gain-of-function experiments have shown that BMP downstream target genes such as MSX1, GATA1b and Vent are involved in the suppression of neural induction. For example, the Vent1/2 genes are involved in the suppression of Geminin and Sox3 expression in the neural ectodermal region of embryos. In this paper, we investigated whether PV.1, a BMP downstream target gene, negatively regulates the expression of FoxD5b, which plays a role in maintaining a neural progenitor population. A promoter assay and a cyclohexamide experiment demonstrated that PV.1 negatively regulates FoxD5b expression.
Kim, Ji Soo;Kim, Won Kon;Oh, Kyoung-Jin;Lee, Eun-Woo;Han, Baek Soo;Lee, Sang Chul;Bae, Kwang-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권4호
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pp.645-650
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2019
Brown adipocytes have an important role in the regulation of energy balance through uncoupling protein-1 (UCP-1)-mediated nonshivering thermogenesis. Although brown adipocytes have been highlighted as a new therapeutic target for the treatment of metabolic diseases, such as obesity and type II diabetes in adult humans, the molecular mechanism underlying brown adipogenesis is not fully understood. We recently found that protein tyrosine phosphatase receptor type B (PTPRB) expression dramatically decreased during brown adipogenic differentiation. In this study, we investigated the functional roles of PTPRB and its regulatory mechanism during brown adipocyte differentiation. Ectopic expression of PTPRB led to a reduced brown adipocyte differentiation by suppressing the tyrosine phosphorylation of VEGFR2, whereas a catalytic inactive PTPRB mutant showed no effects on differentiation and phosphorylation. Consistently, the expression of brown adipocyte-related genes, such as UCP-1, $PGC-1{\alpha}$, PRDM16, $PPAR-{\gamma}$, and CIDEA, were significantly inhibited by PTPRB overexpression. Overall, these results suggest that PTPRB functions as a negative regulator of brown adipocyte differentiation through its phosphatase activity-dependent mechanism and may be used as a target protein for the regulation of obesity and type II diabetes.
Lee, Soomin;Kim, Jeong-Ah;Kim, Hee-Dae;Chung, Sooyoung;Kim, Kyungjin;Choe, Han Kyoung
Molecules and Cells
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제42권5호
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pp.418-425
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2019
Multicistronic elements, such as the internal ribosome entry site (IRES) and 2A-like cleavage sequence, serve crucial roles in the eukaryotic ectopic expression of exogenous genes. For utilization of multicistronic elements, the cleavage efficiency and order of elements in multicistronic vectors have been investigated; however, the dynamics of multicistronic element-mediated expression remains unclear. Here, we investigated the dynamics of encephalomyocarditis virus (EMCV) IRES- and porcine teschovirus-1 2A (p2A)-mediated expression. By utilizing real-time fluorescent imaging at a minute-level resolution, we monitored the expression of fluorescent reporters bridged by either EMCV IRES or p2A in two independent cultured cell lines, HEK293 and Neuro2a. We observed significant correlations for the two fluorescent reporters in both multicistronic elements, with a higher correlation coefficient for p2A in HEK293 but similar coefficients for IRES-mediated expression and p2A-mediated expression in Neuro2a. We further analyzed the causal relationship of multicistronic elements by convergent cross mapping (CCM). CCM revealed that in all four conditions examined, the expression of the preceding gene causally affected the dynamics of the subsequent gene. As with the cross correlation, the predictive skill of p2A was higher than that of IRES in HEK293, while the predictive skills of the two multicistronic elements were indistinguishable in Neuro2a. To summarize, we report a significant temporal correlation in both EMCV IRES- and p2A-mediated expression based on the simple bicistronic vector and real-time fluorescent monitoring. The current system also provides a valuable platform to examine the dynamic aspects of expression mediated by diverse multicistronic elements under various physiological conditions.
Kim, Wonkyong;Choi, Jee Soo;Kim, Daun;Shin, Doohang;Suk, Shinae;Lee, Younghoon
Molecules and Cells
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제42권5호
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pp.426-439
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2019
Many small RNAs (sRNAs) regulate gene expression by base pairing to their target messenger RNAs (mRNAs) with the help of Hfq in Escherichia coli. The sRNA DsrA activates translation of the rpoS mRNA in an Hfq-dependent manner, but this activation ability was found to partially bypass Hfq when DsrA is overproduced. The precise mechanism by which DsrA bypasses Hfq is unknown. In this study, we constructed strains lacking all three rpoS-activating sRNAs (i.e., ArcZ, DsrA, and RprA) in $hfq^+$ and $Hfq^-$ backgrounds, and then artificially regulated the cellular DsrA concentration in these strains by controlling its ectopic expression. We then examined how the expression level of rpoS was altered by a change in the concentration of DsrA. We found that the translation and stability of the rpoS mRNA are both enhanced by physiological concentrations of DsrA regardless of Hfq, but that depletion of Hfq causes a rapid degradation of DsrA and thereby decreases rpoS mRNA stability. These results suggest that the observed Hfq dependency of DsrA-mediated rpoS activation mainly results from the destabilization of DsrA in the absence of Hfq, and that DsrA itself contributes to the translational activation and stability of the rpoS mRNA in an Hfq-independent manner.
Kim, JuHwan;Jung, Euitaek;Ahn, Sung Shin;Yeo, Hyunjin;Lee, Jeong Yeon;Seo, Jeong Kon;Lee, Young Han;Shin, Soon Young
BMB Reports
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제53권12호
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pp.628-633
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2020
WNT11 is a member of the non-canonical Wnt family and plays a crucial role in tumor progression. However, the regulatory mechanisms underlying WNT11 expression are unclear. Tumor necrosis factor-alpha (TNFα) is a major inflammatory cytokine produced in the tumor microenvironment and contributes to processes associated with tumor progression, such as tumor invasion and metastasis. By using site-directed mutagenesis and introducing a serial deletion in the 5'-regulatory region of WNT11, we observed that TNFα activates the early growth response 1 (EGR1)-binding sequence (EBS) in the proximal region of WNT11 and that the transcription factor EGR1 is necessary for the TNFα-induced transcription of WNT11. EGR1 bound directly to the EBSs within the proximal 5'-regulatory region of WNT11 and ectopic expression of EGR1 stimulated WNT11 promoter activity, whereas the knockdown of EGR1 expression by RNA interference reduced TNFα-induced WNT11 expression in T47D breast cancer cells. We also observed that mitogen-activated protein kinases (MAPK), extracellular signal-regulated kinase (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK), and p38 kinase mediated TNFα-induced transcription of WNT11 via EGR1. Our results suggest that EGR1 directly targets WNT11 in response to TNFα stimulation in breast cancer cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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