Detailed structures of ectomycorrhizae formed in Pinus roots were observed with various microscopes: light, fluorescence, and scanning electron microscopes. The mantles and Hartig nets commonly found in the structure of ectomycorrhiza were newly observed according to developmental stage by various staining. The mycelia were observed to be composed of coiled types on the surface of epidermal root during early stage and fused to form mantles of smooth fungal layers, loosing mycelia with some viscous liquid secreted. The ectomycorrhizal hyphae in anatomical roots penetrated the cortical layer and formed obviously mantle and Hartig net. The round spots of ectomycorrhizal mycelia were observed morphological distribution from the cortical layer to vascular bundle of stele in the ectomycorrhizal roots of Pinus species and especially scattered at the area of meristem at the root tip as longitudinal sections. Those mycelia penetrated seemed to move into other roots by means of vascular bundle of ectomycorrhizal roots and newly form ectomycorrhizal roots of dichotomous branches.
The ectomycorrhizal roots were collected from the soils around the bases of basidiocarps of the four edible mushrooms in the stands of Pinus densiflora or Querus acutissima communities (Mt. Wol-Ak in Eastern Chung-Puk): The basidiocarps of Tricholoma matsutake (TM), Sarcodon asparatus (SA), S. imbricatum (SI), and Polyozellus multiplex (PM) are usually collected. The ectomycorrhizal roots of TM, PM and SI were related to the roots of P. densiflora, but the other to the roots of Q. acutissima in Korea. Particularly, the basidiocarps of PM were collected in the mixed stand of both P. densiflora and Q. acutissima. The morphologies of the ectomycorrhizal roots were observed to be the yellowish brown coral (dichromatous) or pyramid types in the roots of the pine, but dark brown un-branched sticks (roots) in the ends of ectomycorrhizal roots of Querus plants. The un-branched roots were covered with the dark mycelia (rhizomorph) around them. Therefore, the ectomyorrhizal roots of PM were observed to have two kinds of types; The single blackish un-branched roots were observed to be attached to the yellowish coral type roots. The bundles of TM mycelia were filled with cortical cells (in the roots of P. densiflora), but the mycelia of the other fungi (Aphylloporales) were massed between the cortical cells of P. densiflora or Q. acutissima. Their anatomical and gross features were considered to be simailar but very important in the ectomycorrhizal roots for these edible mushrooms.
We investigated whether cadmium (Cd) toxicity affects phosphorus (P) concentration and growth of poplar, which might be related to the ectomycorrhizal associations. Populus ${\times}$tomentoglandulosa cuttings were treated with 0.1 mM and 0.4 mM $CdSO_4$ and inoculated with ectomycorrhizal fungus, Pisolithus tinctorius (Pt) and grown in autoclaved peat vermiculite mixture for five months under greenhouse conditions. Ectomycorrhizal plants showed significantly higher Cd concentration in leaves, stems and roots than in non-mycorrhizal plants. Likewise, P contents in leaves and roots of ectomycorrhizal plants were higher than those of non-mycorrhizal plants. Acid phosphatase activity in leaves of ectomycorrhizal plants, however, was significantly lower than that of non-mycorrhizal plants. 0.1 mM Cd significantly increased P content in leaves and stems of non-mycorrhizal plants. In spite of high P concentration, which is accompanied by lower acid phosphatase activity, plant growth was not improved by inoculation with P. tinctorius. Total plant dry weight was lower than the non-mycorrhizal counterpart. The results imply that this might be caused by the large amount of energy consumption to alleviate Cd toxicity resulted from high Cd accumulation in their tissues.
This study was conducted to investigate colonization of ectomycorrhizal fungi(ECM) in roots of Abies koreana which is an endemic and endangered species in Korea. Roots of A. koreana were collected at Mt. Halla. ECM root tips were classified using morphotyping and identified using sequences of internal transcribed spacer (ITS) region of the fungal rDNA. Total 8 species of ECM fungi were identified from roots of 11 seedlings of A. koreana : Cenococum geophilum, Russula brevipes, 2 species of Russula, 2 species of Thelephora, Cortinarius camphorates and 2 species of Helotiales. These species were known to be typical ectomycorrhizal fungi found in coniferous mature forests.
In this study, the roots and rhizosphere soil of Abies koreana and Taxus cuspidata were collected from sites at two different altitudes on Mt. Halla. Ectomycorrhizal fungi (EMF) were identified by Illumina MiSeq sequencing. The proportion of EMF from the roots was 89% in A. koreana and 69% in T. cuspidata. Among EMF in rhizosphere soils, the genus Russula was the most abundant in roots of A. koreana (p < 0.05). The altitude did not affect the biodiversity of EMF communities but influenced fungal community composition. However, the host plants had the most significant effect on EMF communities. The result of the EMF community analysis showed that even if the EMF were isolated from the same altitudes, the EMF communities differed according to the host plant. The community similarity index of EMF in the roots of A. koreana was higher than that of T. cuspidata (p < 0.05). The results show that both altitude and host plants influenced the structure of EMF communities. Conifers inhabiting harsh sub-alpine environments rely strongly on symbiotic relationships with EMF. A. koreana is an endangered species with a higher host specificity of EMF and climate change vulnerability than T. cuspidata. This study provides insights into the EMF communities, which are symbionts of A. koreana, and our critical findings may be used to restore A. koreana.
In this study, the effect of soil ameliorators on ectomycorrhizal (ECM) fungal communities in coal mine spoils was investigated. Organic fertilizers and slaked lime were applied as soil ameliorators in 3 abandoned coal mine spoils. One year after the initial treatment, roots of Pinus densiflora seedlings were collected and the number of ECM species, colonization rate, and species diversity were assessed. The results showed that the soil ameliorators significantly increased ECM colonization on the roots of P. densiflora. The results suggest that soil ameliorators can have a positive effect on ECM fungi in terms of growth of host plants and show the potential use of soil ameliorator treatment for revegetation with ECM-colonized pine seedlings in the coal mine spoils.
The mycelia were directly isolated from eight species of fungal basidiocarps, confirmed to the ectomycorrhiza in the roots from the fields(forestry); Suillus bovinus, Paxillus involutus, Lactarius hysginus, Russula fragilis, Lepista nuda, Lyophyllum shimeji, Tricholoma matsutake, and Russula integra. The mycelia were pure-cultured with several transferring in various agars, and inoculated to the roots of pine(Pinus densiflora) seedling by in vitro method. After ten months growth under artificially aseptic conditions, all pine seedlings inoculated were stimulated at the growth-height, whereas those not inoculated were nearly dead. Also, the ramifications of ectomycorrhizal pine roots formed in the synthetic in vitro systems and were various according to the different mycelia. Synthesis of ectomycorrhiza were clearly confirmed in ten months growth, but not distinguished at this moment. It was clearly proved that the mycelia isolated caused the ectomycorrhizae in the roots of pine seedlings.
Ectomycorrhizal fungi are associated with plants roots and acquire significant amounts of nitrogen sources from the soil. For artificial cultivation, mass production of ectomycorrhizal fungi in liquid media is required. We studied the edible ectomycorrhizal mushrooms Hygrophorus russula, Ramaria fumigata, Sarcodon aspratus, and Tricholoma matsutake. All strains except S. aspratus NIFoS 2031 grew generally well on modified Melin-Norkran's (MMN) medium compared to on other media. All strains analyzed in this study showed significantly higher growth on organic nitrogen. Specifically, two strains of H. russula significantly responded to both tryptone and neopeptone media. Among different species and strains, there were clear differences in the capacity to grow on animal-based organic nitrogen sources.
A very reliable and specific method for the identification of fungi in ectotrophic mycorrhizal symbiosis was developed using a specific PCR assay based on the amplification of the ITS1 region. To obtain specific data, an ITS-diagnostic assay was carried out that reveals genera and species specific sequences. Here, an application of one method is presented, which covers the identification of pure mycelia, basidiocarps as well as mixed samples such as ectomycorrhizal roots that were mingled with remains of the host plant. For this purpose a protocol was established that allowed the extraction of DNA from single mycorrhizal roots. In order to perform a specific ITS analysis we generated a new ITS-primer(ITS8) by a multiple alignment of five different genera and species of mycorrhizal fungi. The utilization of ITS1 and ITS8 resulted in specific PCR amplicons, which were characterized by sequencing without purification steps, even when the template DNA was associated with roots.
균근성 버섯은 나무의 뿌리에 외생균근을 형성하는 공생균류로서 인류에게 맛있는 버섯을 제공하고 있다. 국립산림과학원에서는 이러한 균근성 버섯류의 인공재배뿐만 아니라 이들의 순수분리 배양과 보존, 기초 배양 특성 조사등에 집중하여 연구를 진행하고 있다. 본 총설은 국립산림과학원에 보존된 많은 균근성 버섯들의 배양특성을 소개한 것으로 차후 균근성 버섯을 연구하고자 하는 이들이 유용한 산림자원을 발굴하는 데에 도움이 되는 기본 정보가 되길 바란다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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