Bioassay-guided fractionation of the aerial parts of Pilea mongolica(Urticaceae) afforded two cytotoxic triterpenoids, epi-oleanolic acid (I) and oxo-oleanolic acid (II). The structures of the compounds were confirmed by spectral and synthetic evidences. Compound I and compound II exhibited cytotoxicity against cultured human tumor cell lines, A549 (non small cell lung adenocarcinoma), SK-OV-3 (ovarian), SK-MEL-2 (skin melanoma), XF498 (CNS) and HCT15 (colon) with $ED_{50}$ values of $3.2-8.1{\mu}g/ml$ and $0.7-6.8 {\mu}g/ml$, respectively.
The local irritation studies of DA-3285, recombinant human erytropoietin(rHu-EPO), were carried out in rabbits after the following treatment; single application into the conjunctival sac of the eye, single subcutaneous injection, 7-day repeated subcutaneous injection and 8-day repeated infusion into the ear vein. Also, the local irritancy of DA-3285 leaked around vein was studied in mice by single perivascular injection. The results obtained were as follows. In the result of ocular irritation test, DA-3285 could be considered as a non-irritating material. In single and 7-day repeated subcutaneous irritation test, the irritancy of DA-3285 was not so much different from that of saline. The vascular irritancy of DA3285 by 8-day repeated infusion was negligible and similar to that of saline. And the irritancy of DA3285 by perivascular injection was comparable to that of saline. These results indicate that DA-3285 has no irritating activity when injected through subcutaneous or intravenous route for clinical practice as 3.5% solution.
Platelet production in blood is regulated by a lineage specific humoral factor called thrombopoietin (TPO). The amino terminal domain of TPO (TPO-N) has a sequence homology to erythropoietin (EPO) and is responsible for the signal transduction mediated by the TPO receptor, c-mpl.(omitted)
Kim, C.;Kim, Y. T.;Lee, J. H.;H. K. Ha;J. Y. Ma;W. K. Jeon
한국응용약물학회:학술대회논문집
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한국응용약물학회 1996년도 춘계학술대회
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pp.244-244
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1996
In previous studies we reported that the levels of RBC, hemoglobulin and hematocrit in SAM Rl and SAM P6 were increased significantly from 7 day after oral administration of the pilose antler extract, 5g/kg/day, and were lasted during the study. Therefore, this study was performed to elucidate mechanism of erythropoietic action by the extract administration. SAM Rl and SAM P6 were chosen as experimental animals. At age of 12 weeks, pilose antler extract were given 0.3 and 5 g/kg/day (p.o.) each for 0, 7 and 14 days in both animals. Complete blood cells (CBC) such as WBC, lymphocytes, monocytes, granulocytes, RBC, hemoglobulin, and hematocrit were counted. And plasma concentration of erythropoietin (EPO) which is the major regulator of erythropoiesis was measured using $\^$125/I-antierythropoietin IgG. Ferritin concentration in plasma was also analyzed.
청자 투각고리문 의자는 4점 일괄유물로 경기도 개성에서 출토된 것으로 전해진다. 청자 의자는 고려시대 당시 청자 제작기술의 우수성과 화려한 생활상을 보여주는 등 미술사적으로 가치가 높아 보물로 지정 관리되어 왔다. 그러나 일괄유물 중 1점의 경우 과거 수리 복원된 것으로, 처리 재료의 열화, 처리자의 미숙함 등으로 인해 미적가치가 하락되었고, 구조적으로 불안하여 재처리의 필요성이 제기되었다. 처리 전 보존상태를 조사한 결과, 물리적 손상은 전반적으로 제조상 결함부위를 중심으로 인위적 손상이 가중되어 구조적으로 취약한 상태를 보였다. 균열부위 및 탈락된 편은 접합면이 맞지 않고 접착제가 청자 표면에 흐른 자국과 접착제 표면에 분진 등 2차적 오염물이 생겨 변질된 상태였다. 수리복원 상태를 조사하기 위해 자외선과 확대현미경을 이용하여 균열부의 접합 부위의 위치와 범위, 상태를 파악하였다. 적외선분광 분석(FT-IR)과 휴대용 X-선 형광분석을 실시하여 보존처리에 사용한 재료를 분석한 결과, 접착제로 셀룰로오스계 수지와 에폭시계 수지가 사용된 것을 확인하였다. 또한 일부 힘을 받는 접합부위에서는 접합강도를 높이기 위해 접착제에 석고(CaSO4·2H2O) 또는 골분(Ca10 (PO4)6(OH)2)을 첨가한 것을 알 수 있었다. 상태조사 결과를 바탕으로, 유물의 보존처리는 기존 접합된 상태에서 전면 해체하고 물리적으로 취약한 부분을 중심으로 접합·복원을 통해 보강하는데 중점을 두었다. 기존에 사용된 접착제를 제거하고 해체한 결과, 청자 의자는 크게 상부와 하부, 굽다리, 일부 고리 문 등 총 6개 편으로 분리되었다. 해체 후 접합면에 남아 있는 잔류 접착제 및 오염물은 화학적 및 물리적으로 제거하고 스팀세척기로 파단면 세척을 통해 재접합의 효율을 높였다. 유물의 접합은 접합부위와 크기에 따라 접착제를 다르게 적용하였다. 편의 위치만 고정하는 접합부에는 시아노아크릴계 수지 Loctite® 401을 사용하고 구조적으로 안정화시키는 부분에는 가역성을 위해 아크릴계 수지인 Paraloid® B-72 20%(in xylene)로 단면처리한 후 에폭시계 수지 Epo-tek® 301-2를 이용하여 접합하였다. 상·하부 접합 같이 힘을 받는 부위는 Epo-tek® 301-2에 Kaolin을 첨가하여 접합강도를 보강하였다. 연속되는 문양으로 추정 가능한 고리문의 결실 부분은 SN-Sheet로 뼈대를 만들고 Wood epos®로 파손단면을 연결하여 모델링하면서 고리문을 복원하였다. 그 외 접합하면서 생긴 복원 부위는 심미적 및 구조적 안정화를 위해 Wood epos®로 메움처리하였다. 복원부위 및 메움처리한 부분은 추후 전시활용에 있어 이질감이 없도록 색맞춤하였다. 다양한 과학기술을 활용한 조사와 처리과정은 체계적으로 기록하여 보존 관리하는데 기초자료로 활용하도록 하였다.
The mechanisms underlying the actions of the antioxidants upon reactive oxygen species (ROS) generation by NADPH oxidase complex have remained uncertain. In this study, we investigated NADPH oxidase activity and the role of antioxidant enzymes upon the generation of ROS during hypoxic stress. ROS generation was found to increase in the mouse kidney under hypoxic stress in a time-dependent manner. Moreover, we found in MCT cells that hypoxia-induced hydrogen peroxide production was decreased by NAC pretreatment. We further analyzed HIF-$1{\alpha}$, PHD2 and VHL expression in the NAC-pretreated MCT cells and assessed the response of antioxidant enzymes at the transcriptional and translational levels. SOD3 and Prdx2 were significantly increased during hypoxia in the mouse kidney. We also confirmed in hypoxic $Prdx2^{-/-}$ and SOD3 transgenic mice that erythropoietin (EPO) is transcriptionally regulated by HIF-$1{\alpha}$. In addition, although EPO protein was found to be expressed in a HIF-$1{\alpha}$ independent manner in three mouse lines, its activity differed markedly between normal and $Prdx2^{-/-}$/SOD3 transgenic mice during hypoxic stress. In conclusion, our current results indicate that NADPH oxidase-mediated ROS generation is associated with hypoxic stress in the mouse kidney and that SOD3 and Prdx2 cooperate to regulate cellular redox reactions during hypoxia.
The main goal of this study was to produce transgenic piglets by the method of injection of sperm-mediated exogenous DNA. Spermatozoa (1$\times$106 sperm of final concentration) obtained from caudal epididymis were mixed with pBC1-hEPO (20 ng/${mu}ell$) or pcDNA3 LAC Z (20 ng/${mu}ell$), and followed by electroporation (500 V, 25 ㎌). Matured oocytes having the first polar body and dense cytoplasm were selected and centrifuged at 12,000g for 6 min. After sperm injection, the oocytes were activated electrically (1.7 ㎸/cm, 30 $\mu$ sec, single pulse) in 0.3 M mannitol solution. Eggs injected sperm were cultured in NCSU 23 medium (0.4% BSA) at 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air for 192 h. This study were comprised 3 experiments. Experiment 1 compared the developmental efficiencies between the sperm-injected oocytes (Group 1) and further activated electrically (Group 2). Experiment 2 compared the expression of pcDNA3 LAC Z in the embryos produced by Group 1 and Group 2. Finally, experiment 3 carried out transfer of embryos (1-8 cell stage) transfected with pBC1 -hEPO into surrogate recipients synchronized by injection of combination of PG600 with hCG. The rates of cleavage and development into blastocyst stage in Group 2 were significantly higher than those of Group 1 (71.3% and 28.1% vs. 43.3% and 10.3%, respectively, p<0.05). Thirty (24.2%) out of 124 embryos analyzed in Group 2 were positive by X-gal. Similarly, in Group 1, 16.3% (8/49) were positive. After transfer of 789 embryos to 7 recipient gilts, three out of them examined by ultrasound became pregnant. One recipient is in day 50 pregnancy. On day 54 of gestation, two were carried out uterotomy in order to confirm the pregnancy One had 7 and another had 2 fetuses. We conclude that injection of sperm-mediated gene transfer will be used as a valuable tool for the production of transgenic piglets.
Acute renal injury induced by ischemia is a major cause of high morbidity and mortality in hospitalized patients and a common complication in hospitalized patients. Thus, the work with acute renal failure and renal ischemia has been studied for many years. Although serum creatinine concentration that is widely used as an index of renal function performs fairly well for estimating kidney function in patients with stable chronic kidney disease, it performs poorly in the setting of acute disease. Thus, an ideal biomarker for acute kidney injury would help clinicians and scientists diagnose the most common form of acute kidney injury in hospitalized patients, acute tubular necrosis, early and accurately, and may aid to risk-stratify patients with acute kidney injury by predicting the need for renal replacement therapy, the duration of acute kidney injury, the length of stay and mortality. In this study, renal ischemia and reperfusion were performed by clapming and un-clamping right renal artery in miniature pigs. Plasma blood urea nitrogen (BUN) and creatinine were examined at pre- clamping, after-clamping at 0, 1 and 3 hours. And we searched initial indicators in these samples. Also, renal tissue was collected and searched the initial indicator by PCR and western blotting. As a result, hypoxia inducible factor $1{\alpha}$ ($HIF1{\alpha}$), nuclear factor kappa-B ($NF{\kappa}B$), $I{\kappa}B$, erythropoietin (EPO), erythropoietin receptor (EPOR), angiopoietin-1 and vascular endothelial growth factor (VEGF) were showed significant changes among the renal protein. $HIF1{\alpha}$, EPO, and EPOR were showed significant changes among the renal gene. Thus, these markers will be used as initial diagnosis of acute renal failure.
본 연구는 부위별 녹용 추출물이 PHZ 투여로 용혈성 빈혈을 유도한 흰쥐의 조혈작용에 대한 효과를 검증하고자 하였다. 4주령의 암컷 Sprague-Dawley 흰쥐에 PHZ 10 mg/kg을 4일간 미정맥 주사하여 용혈성 빈혈을 유발한 후 각 부위별 녹용 추출물 200 mg/kg을 일주일간 경구투여 하였다. 용혈성 빈혈 유발군인 PHZ군은 hemoglobin, hematocrit치, 적혈구수가 대조군에 비해 유의적으로 감소하였고, 망상적 혈구수는 유의적으로 증가하였다. 반면, 녹용 추출물 군에서 는 hemoglobin, hematocrit치, 적혈구수가 PHZ 투여군보다 증가하였다. 특히 분골, 상대, 중대 추출물 투여 시 유의성있게 증가하였다. 상대 추출물 투여군에서는 망상적혈구수 증가가 유의적으로 억제되었다. PHZ 투여로 증가된 혈청 EPO 함량은 녹용 추출물 투여군에서 모두 정상적으로 회복 되었다. Hemoglobin 합성에 관여하는 $\delta$-ALAD 활성은 녹용 추출물 투여군에서 활성이 증가되는 결과를 보여주었다. 따라서 녹용 추출물은 PHZ으로 유도한 용혈성 빈혈에 대한 바람직한 조혈효과가 있는 기능성 물질로 사료된다.
본 연구에서는 제대혈 유래의 조혈줄기세포를 효과적으로 배양하기 위한 선행 연구로서 세포 배양 환경에 따른 조혈줄기세포 증식능의 변화를 관찰하였다. 제대혈의 단핵구 세포에서 분리한 $CD34^+$ 세포를 성장인자 조성-I(이하, coc-I) (EPO, GM-CSF, SCF, IL-3) 및 성장인자 조성-II(이하, coc-II) (TPO, G-CSF, SCF, IL-6, Flt3/Flk-2 ligand)가 포함되어 있는 IMDM(Iscove's modified Dulbecco's medium) 및 무혈청 배지(serum free media, SFM)에서 배양하였으며, 우태아혈청(FBS)의 첨가 영향, 2차원 및 3차원 배양 후 각 조건에서의 세포 증식 및 콜로니 형성능을 비교하였다. 일반적으로 coc-I에서의 세포 증식 및 콜로니 증식이 coc-II에서보다 높았다. 3차원 배양(methocult)에서는 가장 높은 세포 증식($2,258{\pm}456$배)을 나타냈으며, 같은 조성의 2차원 배양(IMDM + coc-I + FBS)에서는 가장 높은 콜로니 증식(BFU-E: $652{\pm}19$, CFU-GM: $520{\pm}58$, CFU-GEMM: $339{\pm}100$배)이 나타났다. 배지를 기준으로 보면, coc-II 조성에 우태아혈청이 포함되지 않은 경우를 제외한 모든 경우에서 세포 증식 및 콜로니 증식이 무혈청 배지에서보다 IMDM에서 높았다. 결론적으로, 모든 배양 조건 중에서 'IMDM + coc-I + FBS' 및 'IMDM + coc-I'에서 가장 좋은 콜로니 증식을 보였으며, 우태아혈청의 첨가 및 2차원 배양 조건이 콜로니 증식에 더 효과적인 것으로 확인되었다. 본 연구 결과는 앞으로 조혈줄기세포의 체외 증식에 필요한 공정개발이나 생물반응기 설계에 유용한 정보를 제공할 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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