Kim, Gye-Won;Hong, Sung-Youl;Shin, Soon-Cheon;Lee, Sung-Hee;Kim, Won-Bae
Archives of Pharmacal Research
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제10권1호
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pp.18-24
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1987
Mouse monocolonal antibodies to Hepatitis B surface antien (HBsAg) were prepared and their functional capabilities tested by the method of solid phase enzyme linked immuno sorbent assay (ELISA). HBsAg binding studies inicated that one monoclonal antibody 6E-1-1 bound more HBsAg at a faster rate than the other monoclonal antibodies. Also, for the binding inhibition studies with the selected monoclonal antibody 6E-1-1, one monoclonal antibody 8D-3-6 didn't exhibit binding inhibition for HBsAg. Then, a simultaneous ELISA method was developed for the immunodiagnosis of HBsAg. Different combinations of two monoclonal antibodies as solid phase and horseradish peroxidase (HRPO) labeled phase were studied. The combination of monoclonal antibody of higher affinity constant (6E-1-1) immobilized in a solid phase and monoclonal antibody of lower affinity constant (8D-3-6) as a HRPO laeled phase was more sensitive when two monoclonal antibodies of different affinity constants for HBsAg were prepared.
본 연구는 우 casein을 신속, 정확하게 분석할 수 있는 특수 면역효소분석법을 개발하였다. Biotin이 연결된 casein과 peroxidase-conjugated avidin을 사용하였으며 면역화시킨 닭의 난황으로부터 추출한 항체를 이용하여 분석하였다. Sulfo-N-hydroxy succinimido biotin을 사용하여 casein에 biotin을 연결시키고 microplate에 고정한 뒤 peroxidase-conjugated avidin을 결합시켰다. 생산된 항체는 $\alpha$-와 $\beta$-casein에 특이적이었으며, 유청단백질, IgG, 우혈청 알부민과 교차반응은 면역효소분석법과 Western blot에서 나타나지 않았다. 본 분석법의 민감도는 2ng에서 20$\mu\textrm{g}$이었으며 Standard와 시료의 분석시 뚜렷한 평행곡선이 형성되었다. Intra-assay와 Inter-assay의 변이계수는 각각 5.5와 5.7%이었다. 그리고 비유 초기의 casein량을 조사한 결과 분만전 3일경부터 급격히 상승하는 것을 알 수 있었다.
Enzyme-linked Immuno sorbent Assay (ELISA) for the serological diagnosis of Brucella abortus was developed and compared with plate agglutination test. Cell wall antigen was extracted from Brucella abortus 1119-3 by sonication and with a sodium deoxychlate solution. Optimum protein concentration of coating antigen were $0.4{\mu}g/100{\mu}{\ell}$ protein on each microtiter plate well. Horse radish peroxidase (HRP) labeled protein-G was used as a tracer of reacted antibodies. ELISA confirmed the agreeable results of 40 cases out of 43 cases by plate aggulutination test. ELISA diagnosed positive cases(10 out of 12) and negative cases (1 out of 12) with dubious sera by plate agglutination test. From this results ELISA could be used for the early diagnostic tools of Brucellosis in cattle.
Immunological method has been applied in biochemical genetic analysis of seed storage proteins. We developed and characterized anti-gliadin polyclonal antibody (AGPab) specific to gliadin fractions whose quality and quantity were known to be associated with wheat end-use quality. Reactions of anti-gliadin polyclonal antibody (AGPab) to gliadin were linearly decreased as AGPab and antigen were diluted. Dot-blot and immunoblot assay showed that produced AGPab specifically reacted to gliadin and mainly $\alpha$-, $\beta$-, and ${\gamma}$-gliadin subunits. Enzyme-linked immuno- sorbent assay (ELISA) was applied for quantifi-cation of gliadins in Korean wheat cultivars and breeding lines by using AGPab. High reactions between AGPab and gliadins were found in wheat cultivars Olmil and Olgeurumil. Significant difference of optical densities for alcohol soluble proteins among crop species was found, as wheat showed the highest value (0.697) followed by rye (0.295), and barley (0.066).
HER-2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor-2) is a protein giving higher aggressiveness in human breast cancers. Trastuzumab is a monoclonal antibody that targets HER-2 and is known to extend survival across all stages of HER2-positive breast cancer. In this study, we attempted to development of a quantitative ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) for evaluating anti HER-2 antibodies using human HER-2 recombinant proteins to support antibody producing processes and pharmacokinetic studies. We established direct or indirect ELISA method for the trastuzumab-like protein combined human recombinant HER-2. The ELISA method will prove to be great value in quantitating anti-HER-2 antibodies levels for developing anticancer antibodies.
The mating types and serotypes of 10 clinical isolates of Cryptococcus neoformans have been investigated. Seven isolates were serotype A and three were serotype D and thus they fell in C. neoformans var. neoformans. Mating types of six isolates were found $\alpha$ and two were $\alpha$ but another two isolates were untypable. Enzyme linked immuno-sorbent assay(ELISA) using rabbit hyper-immune serum to cryptococcal polysaccharides was well adapted to the analysis of capsular polysaccharides in sera of the patients with cryptococcal meningitis.
호주의 많은 소동물 임상수의사들이 최근에 관심을 갖고 있는 부분은 개의 아토피(Canine Atopy)에서의 알러지-특이성(Allergen-specific)IgE에 쓰이는 혈청 ELISA (Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Assay, 효소결합면역흡착검사)테스트의 활용 가능성에 관한 것이다. 희망사항은 개 아토피의 진단과 치료에 있어서 도움이 되도록 접근할 수 있는 시험(Accessible test)일 것이다. 아토피(Atopy)는 진단과 치료를 실패시키는 질병이며, 새로운 ELISA라도 이 문제를 쉽게 해결하여 주지 못한다. 개의 아토피에서 알려진(Allergens)들을 분석하는 데 쓰이는 혈청 ELISA처럼 아주 정확하게 특성화되어져야 한다. 해당 개는 아토피성(Atopic)으로서 진단되어져야만 되고 그 다음에 치료에 지침이 되도록 개별 알러진 동정(Individual allergen identification)용 ELISA로 개의 혈액을 스크린하는데 적합하여야 한다. ELISA와 피내접종시험(Internal testing)방법은 상관도가 낮고 그렇기 때문에 어떤 시험이 더 신뢰할 수 있는 것일까? 이러한 사실은 논쟁의 여지가 있으며 이상의 2가지 시험들이 옳다면 각각의 상응하는 각각 다른 아형(Subtypes)의 아토피라고 볼 수있다. 아마도 알러진들은 경피적으로 흡수되어 아토피성피부염으로 되어진다. 그것은 인체에서 건초열(Hay fever)이나 천식(Asthma)과 같이 흡입에 의해 일으키는 유사한 증후군동종 (Syndrome akin)과 같은 접근의 초기양식(Primary mode of access)으로부터 생기는 다른 유사한 질병과정이 되어질 수도 있다. 이러한 2가지 증후군은 함께 병발하는 경우가 있다. 의학에서는 피부 반점시험방법의 예비조사연구(Preliminary research with skin patch testing in medicine)는 아토피성 피부염을 야기하는 알러진들의 경피흡수경로의 개념을 지지해준다. 흡인 알러진들을 사용한 개들에서의 도전 시험(Challenge tests)들은 거의 대부분이 비-피부학적 임상증상들을 발현하였다. 모든 증거가 분명히 나타나도록 미래의 조사연구를 인도해 주는 게 필요하며 개 아토피의 정의와 진단을 둘러싼 수수께끼를 해결하는데 도움이 될 것이다.
Purpose : Studies on the Regulatory Effect of Cytokine Production in Taumin Patients with Cerebral Infarction by Cheongsimyeonjatang Method : ELISA(enzyme-linked immuno-sorbent assay) Result : Chungsimyeunjatang(CYT) is a prescription for the cerebral infarction (CI) patients of Taeumin according to Sasang constitution philosophy. Taeumin patients with CI were treated with CYT during the acute stage. Clinical signs of CI disappeared markedly in about two to four weeks after oral administration of CYT in all patients. The mean interleukin (IL)-2 plasma levels were slightly lower in the patients with CI than in the normal groups, whereas the mean IL-4, IL-6 and IgE levels were significantly higher in the patients. There were no significant differences in $interferon-{\gamma}$$(IFN-{\gamma})$ levels between the groups. Serum $IFN-{\gamma}$ and IL-2 levels derived from T helper (Th)1 cells were elevated significantly in the patients with CI by CYT administration. Significant reduced plasma levels of IL-4 and IL-6 derived from Th2 cells and IgE were observed in the patients treated with CYT. During the period of CYT administration, there were no other adverse effects. The data indicate that CYT has a good CI treatment effect, and that its action may be due to regulation of cytokine Production.
식품으로부터 식중독세균을 검출하는 대부분의 전통적인 방법들은 분리하고자 하는 미생물에 적합한 선택배지에 의존할 수밖에 없다. 이러한 선택배지들은 높은 경제성에도 불구하고 오래 걸려 때를 놓치게 되는 소요 시간이 항상 걸림돌로 작용하고 있으며, 하나의 선택배지로 한의 균만을 선택적으로 분리해 내는 등의 단점이 있다. 이러한 단점을 최소화하기 위하여 IMS 등 면역학적 또는 분자생물학적 기법들을 접목시키고 있고, 증균에서 분리와 확인을 동시에 할 수 있는 package 형태의 제품들이 시판되고 있다. 또한 이러한 제품 중 일부는 국제표준기구로부터 인증을 받았고 대부분 chromogenic 기질을 함유한 선택배지들이 포함되어 있을 만큼 신뢰도가 높다고 할 수 있다. 그러나 선택배지 자체만은 이들 단점을 해결할 수 없어 항체를 활용한 신속, 간편하고 환경친화적인 ELISA법, 검출장비가 불필요하여 가장 신속, 간편하게 현장에서 사용하도록 기술을 향상시킨 paper-strip kit나 ELISA 분석 시 직면하는 시료의 matrix effect를 최소화할 수 있다는 장점을 지닌 형광면역분석법(fluoroimmunoassay)등 새로운 기술이 용도에 맞게 다양하게 개발되고 있다. 또한 동시진단 능력이 우수한 현장 진단형 시스템이 개발될 경우, 향후 신 시장 창출, 바이오칩 기술발전, 식중독균을 포함한 위해 미생물의 동시진단 및 역학조사 등에 지대한 기여를 할 것으로 판단된다. 식품에서 식품위해미생물 검출에 있어서 가장 이상적인 방법은 검출 과정이 간단하고 경제적이며 정확하여야 한다는 것이다. 또한 정량적 결과 산출이 가능하여야 하고, 자동화된 방법으로 전환이 가능하여야 산업에 적용될 수 있다는 것인데, 이러한 이상적인 검출방법은 현재까지 존재하지 않는다. 다만, 여러 방법들이 각각의 장점을 갖고 있을 뿐이다. 즉, 현실적 대안은 현재까지 개발된 각각의 방법을 목적과 대상에 따라 시의적절하게 병용 사용하여야 한다는 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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