• Title/Summary/Keyword: ECL

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Point Mutations in the Split PLC-γ1 PH Domain Modulate Phosphoinositide Binding

  • Kim, Sung-Kuk;Wee, Sung-Mo;Chang, Jong-Soo;Kwon, Taeg-Kyu;Min, Do-Sik;Lee, Young-Han;Suh, Pann-Ghill
    • BMB Reports
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    • v.37 no.6
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    • pp.720-725
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    • 2004
  • A number of signaling molecules contain small pleckstrin homology (PH) domains capable of binding phosphoinositides or proteins. Phospholipase C (PLC)-${\gamma}1$ has two putative PH domains, an $NH_2$-terminal (PH1) and a split PH domain ($nPH_2$ and $cPH_2$). We previously reported that the split PH domain of PLC-${\gamma}1$ binds to phosphatidylinositol 4-phosphate (PI(4)P) and phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PI(4,5)$P_2$) (Chang et al., 2002). To identify the amino acid residues responsible for binding with PI(4)P and PI(4,5)$P_2$, we used site-directed mutagenesis to replace each amino acid in the variable loop-1 (VL-1) region of the PLC-${\gamma}1$ $nPH_2$ domain with alanine (a neutral amino acid). The phosphoinositide-binding affinity of these mutant molecules was analyzed by Dot-blot assay followed by ECL detection. We found that two PLC-${\gamma}1$ nPH2 domain mutants, P500A and H503A, showed reduced affinities for phosphoinositide binding. Furthermore, these mutant PLC-${\gamma}1$ molecules showed reduced PI(4,5)$P_2$ hydrolysis. Using green fluorescent protein (GFP) fusion protein system, we showed that both $PH_1$ and $nPH_2$ domains are responsible for membrane-targeted translocation of PLC-${\gamma}1$ upon serum stimulation. Together, our data reveal that the amino acid residues $Pro^{500}$ and $His^{503}$ are critical for binding of PLC-${\gamma}1$ to one of its substrates, PI(4,5)$P_2$ in the membrane.

Selective Mode of Action of Naproanilide in Rice and Paddy Weeds- II. Uptake and Translocation of Naproanilide in Rice and Paddy Weeds (Naproanilide의 벼와 잡초간(雜草間) 선택성(選擇性) 기작(機作)에 관한 연구(硏究)- II. 벼와 잡초(雜草)에서 Naproanilide의 흡수(吸收) 및 이행(移行))

  • Choi, J.M.;Pyon, J.Y.;Kim, Y.W.
    • Korean Journal of Weed Science
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    • v.10 no.2
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    • pp.109-113
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    • 1990
  • In order to determine selective mode of action of naproanilide between rice and paddy weeds, absorption and translocation of $^{14}C$-naproanilide in rice, Echinochloa crus galli, Cyperus serotinus, and Sagittaria pygmaea were studied, Rice plant and Echinochloa crus-galli absorbed less amount of $^{14}C$-naproanilide than Sagittaria pygmaeo and Cyperus serotinus. Less amount of $^{14}C$-naproanilide was translocated into shoots and translocation rate was slower in rice and Ecl:inochloa crzis-galli than that of Sagittaria pygmaea and Cyperars serotinus. Also, 30-40% of $^{14}C$-naproanilide was distributed at tubers of Sagittaria pygmaea and Cyperus serotinus, which explained that higher amount of $^{14}C$-naproanilide was absorbed from tubers. $^{14}C$-naproanilide was gradually decreased in all plant species and finally more radioactivity was determined in Sagittaria pygmaea and Cyperus serotinus than in Echinochloa cars-galli and rice plant after $^{14}C$-naproanilide treated plants were transferred to Kasugai solution.

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The $Fc{\gamma}$ receptor III genotype as a risk factor for aggressive periodontitis in Korean patients (한국인 급진성 치주염 환자의 위험요소로서 $Fc{\gamma}$ III 수용기의 유전형)

  • Kim, Myung-Hyun;Shin, Seung-Yun;Kim, Tae-Il;Seol, Yang-Jo;Lee, Yong-Moo;Rhyu, In-Chul;Chung, Chong-Pyoung;Han, Soo-Boo;Ku, Young
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • v.36 no.1
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    • pp.113-123
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    • 2006
  • 연구배경 IgG에 대한 $Fc{\gamma}$ 수용기는 치주병인균에 대한 숙주 반응에 있어서 중요한 역할을 하는데, 이 중 $Fc{\gamma}RIIIa$는 NK 세포, 대식세포, 단핵구, ${\gamma}{\delta}T$세포에서 발현되며, EC2 도메인에서 158 아미노산 부위의 valine (V)-phenylalanine (F)의 유전자다형성을 보인다. $Fc{\gamma}RIIIb$는 특이적으로 중성구에 발현되는데, extracellular (ECl) Ig-like 도메인 내 4개의 아미노산 치환(substitutions)에 의한 NA1-NA2 유전자다형성을 보인다. 이 연구의 목적은 한국인에서 급진성 치주염 환자와 $Fc{\gamma}III$ 수용기의 유전자다형성과의 관련성을 알아보는 것이다. 연구방법 및 재료 치주적으로 건강한 90명 (대조군, 남자 64명, 여자 26명)과 서울대학교 치과병원 지주과에 내원하여 급진성 치주염으로 진단된 환자 43명 (aggressive periodontitis patients: AgP, 남자 30명, 여자 13명)을 대상으로 하였다. 모든 실험 대상자는 임상 실험에 대해 동의 하였고, 초진 시 전자 탐침(Florida Probe(R) Co. Gainesville, FL)을 이용하여 탐침 시 치주낭 깊이 (PPD), 임상부착수준 (CAL), 치태지수(PI), 탐침 후 출혈지수 (BOP)를 측정하였다. 또한 이들의 정맥혈에서 추출한 DNA를 PCR법, 전기영동법 등을 이용하여 $Fc{\gamma}RIIIa$, $Fc{\gamma}RIIIb$의 대립 유전자의 존재여부를 확인하였다. 이를 바탕으로 $Fc{\gamma}RIII$ 복합 유전형을 확인하여 각 군 간을 비교하였다. 연구 결과 1. $Fc{\gamma}RIIIa$에 대한 유전자다형성 연구 결과 대조군과 급진성 치주염 환자 군(AgP)사이에서는 대립 유전자 분포가 서로 유의성 있는 차이를 나타내었고 (P<0.05), $Fc{\gamma}RIIIb$에서는 유의성 있는 차이를 발견할 수 없었다. (P>0.05) 2. $Fc{\gamma}RIIIa$ 158F 대립형질이 급진성 치주염 환자에서 유의성 있게 많이 발견되어졌다. (P<0.05) 결론 이 연구를 통하여 $Fc{\gamma}RIIIa$ 유전자의 분석이 한국인의 급진성 치주염에 대한 감수성의 위험요소의 표지자로 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 향 후 더 많은 환자를 대상으로 히는 추가 연구가 필요하다고 생각된다.