• 농업과학연구
• /
• 제42권3호
• /
• pp.201-205
• /
• 2015

The experiment was conducted to evaluate the effects of pathogenic Escherichia coli on diarrhea, growth performance, and blood profile of weaned pigs. A total of 48 pigs were used and housed in individual pens of disease containment chambers for 16 d (4 d before and 12 d after the first challenge [d0]). The treatments were with or without the pathogenic E. coli challenge (F-18 E. coli strain; heat-labile, heat-stable, and Shiga-like toxins). Pigs were orally inoculated with a dose of $10^{10}cfu$ E. coli per 3 mL PBS daily for 3 days. The common nursery diet and water were available at all times. The ADG, ADFI, G:F, diarrhea score, ratio of fecal ${\beta}$-hemolytic coliforms from total coliforms (RHT), and blood profile were measured. The pathogenic E. coli reduced (P < 0.05) ADG from d0 to 6 (117 vs. 297 g/d) and from d0 to 12 (377 vs. 238 g/d) compared with the control. Meanwhile, the pathogenic E. coli increased (P < 0.05) diarrhea score (average 3.4 vs. 1.4) and RHT (average 82 vs. 11%) on d3, 6, and 9 and the number of white blood cells (17.59 vs. $13.48{\times}10^3/{\mu}L$) on d6 compared with the control. No differences were found on ADFI and others in the blood profile (total protein and hematocrit). In conclusion, pathogenic E. coli used in this experiment successfully caused mild diarrhea, increased number of white blood cells, and adversely affected growth rate of weaned pigs.

• KSBB Journal
• /
• 제21권4호
• /
• pp.298-301
• /
• 2006

트레할로스 합성효소(trehalose synthase)의 효율적인 생산을 위하여, 5 종류의 plasmid를 형질전환 시킨 재조합 E. coli를 이용하여 균체생산량과 효소발현량을 비교하였다. Trehalose synthase의 활성은 fusion partner를 이용한 system 에서는 활성이 나타나지 않았으며, IPTG 유도 발현 시스템보다 항시적 발현 시스템을 사용하는 E. coli K12/pHCETS에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 선별된 재조합 E. coli K12/pHCETS를 사용하여 회분식 및 유가배양을 수행하였으며, 유가식 배양의 경우 균체논도는 20 g/L, 최종 trehalose synthase 활성은 13.7 U/ml을 나타내었다. 이러한 결과는 트레할로스 생산을 위한 trehalose synthase가 재조합 E. coli의 발효에 의해 경제적으로 생산되어질 수 있다는 가능성을 보여 주었다.

• BMB Reports
• /
• 제31권3호
• /
• pp.254-257
• /
• 1998

The gshI gene from the Escherichia coli K-12 strain codes for ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase which mediates the rate-limiting step of glutathione biosynthesis. The isolated gshI gene from E. coli K-12 has an unusual translation initiation codon, UUG. The 494th amino acid is Ala rather than Gly which was found in a mutant strain E. coli B. In order to improve the translational rate of the gshI gene of E. coli K-12, the initiation codon, UUG, was changed to the usual AUG codon by the site-specific mutagenesis. This change has resulted in a 53% increase of ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase activity. The enzyme activity was also improved by replacing $Ala^{494}$ with Val (A494V) or Leu (A494L). The replacement of $Ser^{495}$ with Thr (S495T) also resulted in a 62% increase of the enzyme activity. Therefore, the specific activity of ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase was increased with the increasing chain length of the aliphathic amino acid at the site of the 494th amino acid (Ala<$Val{\leq}Leu$).

• 미생물학회지
• /
• 제32권2호
• /
• pp.126-131
• /
• 1994

4-Chlorobiphebyl(4CB)를 분해한 Pseudomonas sp. DJ-12가 가지고 있는 pcbABCD 유전자를 Escherichia coli에 클로닝한 결과, 재조합 균주인 E. coli CU1과 CU101은 모두 Pseudomonas sp. DJ-12에서와 같이 4CB를 분해하여 2,3-dihydrozybiphenyl(2,3-DHBP)을 생성하는 탈염소화 기능을 보여주었다. 특히 pcbAB를 포함하는 재조합 플라스미드인 pCU101을 가지고 있는 E. coli CU101은 Pserudomonas sp. DJ-12에서와 같이 4CB로부터 4-chlorobenzoic acid를 생성하지 않고 2, 3-DHBP만을 생성하는 탈염소화 기능을 보여주었다. 그러므로 Pseudomonas sp. DJ-12의 염색체 DNA로부터 클로닝한 약 2.2kb의 pcbAB 유전자는 4CB로부터 2,3-DHBP만을 생성하는 탈염소화기능을 가지고 있음이 밝혀졌다.

• BMB Reports
• /
• 제29권2호
• /
• pp.116-121
• /
• 1996

In earlier studies, the genes encoding Escherichia coli thioredoxin and Corynebacterium nephridii thioredoxin C-3 were fused via a common restriction site in the nucleotide sequence coding for the active site of the proteins to generate two chimeric thioredoxins, designated E-C3 (N to C-terminal) and C3-E. The hybrid thioredoxins were overexpressed in E. coli from the cloned chimeric thioredoxin genes by a T7 promoter/polymerase system. To investigate the structure-function relationship of thioredoxin, we purified the E-C3 hybrid thioredoxin through ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, and Sephadex G-50 gel filtration. Its purity was examined on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and the molecular weight of the purified E-C3 hybrid thioredoxin was estimated to be 12,000. On native polyacrylamide gels, the purified E-C3 hybrid thioredoxin shows a much lower mobility than E. coli thioredoxin. E-C3 hybrid thioredoxin exhibits a 40-fold lower catalytic efficiency with E. coli thioredoxin reductase than E. coli thioredoxin. It was shown to catalyze the reduction of insulin disulfide by dithiothreitol. The purified E-C3 hybrid thioredoxin was also characterized in other aspects.

• 미생물학회지
• /
• 제22권4호
• /
• pp.229-234
• /
• 1984

A modified E. coli trp operon, $trpL({\Delta}att)\;trpE^{FBR}$, was conjugally transfered into Klebsiella pneumoniae $KC_{100}\;(Phe^-,\;Tyr^-,\;Trp^-,\;Rif^r,\;Kam^r)$ by in vivo cloning using the hybrid plasmid $R_{6}K::$ Mucts 61 with a transfer frequency of $5.2{\times}10^{-7}$. Two K. pneumoniae transconjugants, $KUA_{701}\;and\;KUA_{702}$, were isolated. The characters of attenuation control-free and resistance to feedback-inhibition which are characteristics of donor C. coli trp operon were normally expressed in the $KUA_{701}.\;However,\;KUA_{702}$ retained only the feedback-inhibition resistant character. $Trp^+$ phenotype and ampicillin resistant character were completely stable in the transconjugants, but streptomycin resistant character was lost in the transconjugants.

• 한국식품과학회지
• /
• 제30권5호
• /
• pp.1209-1213
• /
• 1998

4종류의 Escherichia coli O157:H7을 tryptic soy broth에 배양한 후 0.1 M phosphate buffer에 동결시킨 균체와 우육에 접종한 균체의 감마선 조사에 의한 방사선 감수성을 조사하였다. 균체의 증식은 tryptic soy broth에서 $37^{\circ}C$ 배양으로 24시간대에 최대균수를 나타내었다. 대수기때의 동결균체의 $D_{10}$ 값은 $0.09{\sim}0.15\;kGy$, $12D_{10}$값은 $1.08{\sim}1.80\;kGy$, 2와 3 kGy에서 불활성화 계수는 $13.33{\sim}33.33$이었다. 한편, 우육에 접종한 균체의 $D_{10}$값은 $0.30{\sim}0.47\;kGy$, $12D_{10}$값은 $3.60{\sim}5.64\;kGy$, 2와 3 kGy 선량에서의 불활성화계수는 $4.26{\sim}10.00$으로 동결균체가 우육접종균체보다 더 높은 방사선 감수성을 나타내었다.

• 한국식품위생안전성학회지
• /
• 제28권3호
• /
• pp.272-278
• /
• 2013

본 연구는 polyvinyl chroride (PVC)와 stainless steel 표면에서 E. coli O157:H7의 부착, 바이오필름형성, 온 습도에 따른 생존율을 조사하고, E. coli O157:H7이 오염된 작업대 표면에서 상추로의 교차오염도 조사를 통하여 E. coli O157:H7에 오염된 작업대가 상추의 미생물학적 안전성에 미치는 영향을 평가하고자 수행하였다. 작업대 표면 재질인 PVC와 stainless steel에 E. coli O157:H7 배양액을 1시간 노출시켰을 때, PVC의 경우, stainless steel 보다 10배 정도 부착력이 높았으나, 6시간째는 두 재질간의 차이가 없었다. 또한, E. coli O157:H7의 바이오필름 형성은 TSB > 10% 상추추출액 > 1% 상추추출액 > phosphate buffer 순이었으며, 재질별로는 PVC에서 바이오필름형성능이 높은 것으로 나타났다. 온도 $20^{\circ}C$, $30^{\circ}C$, 습도 43%, 69%, 100%에서 각각 노출 시켰을 때, E. coli O157:H7은 온도 $30^{\circ}C$, 습도 43%, 69% 조건에서 12시간 내에 약 5.0 log CFU/coupon이 감소한데 반해, 상대습도 100%에서는 농도의 큰 변화 없이 5일 이상 생존이 지속되었다. 또한, 유기물이 작업대 표면에 존재 시, E. coli O157:H7의 감소 속도가 느렸다. E. coli O157:H7에 오염된 작업대에 상추를 접촉시키고 상추의 오염도를 조사한 결과, 상추 표면에 수분이 존재할 때 오염된 작업대 표면에서 E. coli O157:H7의 이동수준이 상추에 수분이 없을 때 보다 10배 이상 증가하는 것으로 나타났다. 따라서 E. coli O157:H7에 오염된 작업대는 상추의 안전성에 직접적인 영향을 미칠 수 있어 작업 후에 세척, 소독을 통하여 위생적으로 관리하는 것이 필요하다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제34권1호
• /
• pp.35-39
• /
• 2006

높은 C4 대사활성을 보이는 반추위미생물이 가지는 포도당 발효대사 조절양식의 한가지를 대장균에서 모사하였다. 대장균은 glycolytic condition에서는 phosphoenolpyruvate(PEP) ${\leftrightarrow}$ oxaloacetate(OAA)간 반응을 phosphenolpyruvate carboxylase(PPC)에 의해, gluconeogenetic condition에서는 phosphoenolpyruvate carboxykinase(PCK)에 의해 촉매하도록 조절한다. 반면 반추위미생물은 glycolytic condition에서 PCK를 통하여 반응이 촉매된다. 이러한 조절양식의 차이점이 C4 대사활성에 미치는 영향을 조사하기 위하며 ppc가 돌연변이되고 대신 인위적으로 PCK를 발현할 수 있는 대장균을 제조하였다. 이렇게 PEP-OAA간 대사조절이 변이된 대장균 K12 ppc-/pck+는 야생형 K12보다 2.5배의 높은 C4대사활성을 보였다. 대장균에서의 C4 대사생리를 증가시키는 연구는 대사공학을 이용한 여러가지 유용물질(i.e. 숙신산, ALA)생산에 응용하기 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국동물위생학회지
• /
• 제14권2호
• /
• pp.127-133
• /
• 1991

The present study was conducted to investigate the biochemical properties, pathogenicity, antimicrobial test, and serotype of E-coli isolated from slaughtered cattle during the period from March 1991 to May 1991. 1. A total of 12 E-coli isolates were isolated from 132 bile juice of slaughtered cattle. 2. All isolates were resistant to Erythromycin, Cephalothin, Neomycin and Lincomycin while the majority of them were susceptible to Trimethoprimsulfamethoxazol (67%), Chloramphenicol(58％), Gentamicin(58%), Ampicillin(17%), Kanamycin(9%) and Tetracycline (9%). 3. In the test of colicinogenecity and congo-red binding capability, 4(33%) isolates produced colicin, all isolates were congo-red negative. 4. The serotypes of isolated E-coli were identified as 008： K- (2 strain), 015： K- (1 strain), 08： K87： K88ab(1 strain), 0139： Kl2(1 strain), 0147: K89(1 strain), others(6 strains ) were autoagglutination.