• 제목/요약/키워드: E-Isolation

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쇠비름(Porturaca oleracea)의 병원균, Drechslera portulacae가 생산하는 식물독소의 구조 동정 - 제 1 보. Methyldihydroxyzearalenone의 단리 및 제초활성 (Identification of Phytotoxins Produced by Drechslera portulacae, a Pathogen of Purslane(Portulaca oleracea) - I. Isolation of Methyldihydroxyzearalenone and Its Herbicidal Activity)

  • 김건우;조광연
    • 한국잡초학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.184-191
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    • 1994
  • 잡초병원균 Drechslera portulacae는 기주식물인 쇠비름(Portulaca oleracea)에만 병징을 발현하는 식물독소를 생산한다는 사실을 발견하여 병원성에 관여하는 물질을 D. portulacae의 배양여액 중에서 정제 단리한 후 기기분석한 결과, 그 화학구조를 methyldihydroxyzearalenone으로 동정하였다. 또한, methyldihydroxyzearalenone의 제초활성은 시험초종인 식용피(E. crus-gall) 및 어저귀(A. avicennae)를 대상으로 조사되였다. 그 결과, 식용피 유묘의 초장에 대한 억제효과는 나타나지 않았으며 근생장에 있어서 $3{\times}10^{-5}M$ 처리시 대조구에 비해 35.7%의 억제를 보였다. 한편, 어저귀에서는 유묘의 초장 및 근장에 대한 억제효과가 인정되었으며 그 정도는 유근에서 심하여 $3{\times}10^{-5}M$ 처리구에서 근생장을 72.6% 억제시켰다. Methyldihydroxyzearalenone의 제초활성은 식용피보다 어저귀에서 높게 나타났다.

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Isolation, Purification and Characterization of Antioxidative Bioactive Elastin Peptides from Poultry Skin

  • Nadalian, Mehdi;Kamaruzaman, Nurkhuzaiah;Yusop, Mohd Shakir Mohamad;Babji, Abdul Salam;Yusop, Salma Mohamad
    • 한국축산식품학회지
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    • 제39권6호
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    • pp.966-979
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    • 2019
  • Muscle-based by-products are often undervalued although commonly reported having a high amount of natural bioactive peptides. In this study, elastin was isolated from the protein of broiler hen skin while its hydrolysate was prepared using Elastase. Assessment of antioxidative properties of elastin-based hydrolysate (EBH) was based on three different assays; 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrate (DPPH) radical, 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical and metal chelating ability. The EBH was purified further using ultrafiltration, gel filtration and Reverse- Phase High-Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC). The IC50 of ABTS radical activities for EBH were decreased as EBH further purified using ultrafiltration (EBH III; 0.66 mg/mL)>gel filtration (EB-II; 0.42 mg/mL)>RP-HPLC (EB-II4; 0.12 mg/mL). The sequential identification of the peptide was done by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF/ TOF-MS) of the potent fractions obtained from RP-HPLC (EB-II4). The presence of hydrophobic amino acids (Val and Pro) in the peptide sequences could potentially contribute to the high antioxidant activity of EBH. The sequences GAHTGPRKPFKPR, GMPGFDVR and ADASVLPK were identified as antioxidant peptides. In conclusion, the antioxidative potential from poultry skin specifically from elastin is evident and can be explored to be used in many applications such as health and pharmaceutical purposes.

꽃송이버섯(Sparassis crispa) 자실체로부터 ergosteol peroxide의 분리 및 동정 (Ergosterol peroxides from the fruit body of Sparassis crispa)

  • 이영근;;김형근;이대영;이승은;김금숙;백남인
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제59권4호
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    • pp.313-316
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    • 2016
  • 꽃송이 버섯(S. crispa)을 80 % MeOH 수용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-butyl alcohol 및 물 분획으로 나누었다. EtOAc 분획과 n-BuOH 분획에 대해 $SiO_2$ 및 ODS column chromatography를 반복적으로 실시하여 2종의 ergosterol peroxide를 분리, 정제하였다. infrared spectrometry, nuclear magnetic resonance 및 FAB-MS data를 해석, 화합물 1과 2를 ergosterol peroxide와 3-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl ergosterol peroxide로 각각 구조동정 하였다. 두 화합물 모두 꽃송이 버섯으로부터는 이번 실험에서 처음으로 분리되었다.

고삼으로부터 항균활성 물질의 분리 및 구조 동정 (Isolation and Identification of Antimicrobial Active Substance from Sophora flavescens Ait.)

  • 안은영;신동화;백남인;오진아
    • 한국식품과학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.672-679
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    • 1998
  • 고삼 75% 에탄올 추출물과 클로로포름 분획물을 첨가하여 몇가지 식중독 미생물의 증식억제 양상과 분리된 유효 물질의 구조를 확인하였다. 이 분획물의 항균 효과를 시험한 결과 Listeria monocytogenes (ATCC 19111, 19112, 19113, 19114 및 15313)에 대한 최소 증식억제 농도가 각각 $50{\sim}500\;ppm$과 50 ppm 이하로 확인되었다. 항균 활성을 보인 클로로포름 분획물을 silica gel column chromatography로 연속 2회 정제하여 얻은 황색 분말의 항균 활성 소획분 S-10-6은 L. monocytogenes 5 균주, Bacillus subtilis 및 Staphylococcus aureus에 대해서는 10 ppm 농도에서 뚜렷한 증식억제 효과를 보였으며 특히 L. monocytogenes 5균주에 대해서는 $30{\sim}50\;ppm$ 수준에서 살균 효과가 인정되었으나 E. coli 경우 100 ppm 농도에서도 증식억제 효과가 없었다. 항균 활성을 보인 소획분(S-10-6)을 IR, $^1H-NMR$$^{13}C-NMR$로 구조를 동정한 결과 flavanone 화합물의 하나인 kushenol F로 확인되었다.

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감초로부터 항균활성 물질의 분리 및 구조 동정 (Isolation and Identification of Antimicrobial Active Substance from Glycyrrhiza uralensis FISCH)

  • 안은영;신동화;백남인;오진아
    • 한국식품과학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.680-687
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    • 1998
  • 감초(Glycyrrhiza uralensis FISCH) 75% 에탄올 추출물이 L. monocytogenes 5 균주에 대하여 뚜렷한 항균 활성이 인정되어 용매 분획한 후 활성이 높은 에틸아세테이트 분획물을 얻었고 이를 silica gel column chromatography로 연속으로 2회 정제하여 황색 분말의 항균 활성 소획분을 분리하였다. 활성 소획분은 L. monocytogenes에 대해서는 $10{\sim}50\;ppm$ 수준에서 증식억제 효과를 보였고 50 및 100 ppm 농도에서는 살균 효과가 인정되었으며 S. aureus에 대해서는 $30{\sim}50\;ppm$ 수준에서 증식억제 효과를 보였으며 E. coli에 대해서는 100 ppm 농도에서도 증식억제 효과가 전혀 나타나지 않았다. IR, $^1H-NMR$$^{13}C-NMR$로 기기분석하여 활성 획분의 구조를 분석한 결과 감초에 함유된 flavanone 화합물의 하나인 liquiritigenin으로 동정되었다.

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간장으로부터 Angiotensin Converting Enzyme 활성 저해물질 생성 균주의 분리 동정 (Isolation and Characterization of the Strain Producing Angiotensin Converting Enzyme Inhibitor from Soy Sauce)

  • 차명화;박정륭
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.594-599
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    • 2001
  • 혈압상승을 주도하는 효소인 angiotensin converting enzyme(ACE)의 활성을 저해하는 펩타이드를 생산하는 protease 분비 균을 간장으로부터 분리하여 동정하였다. 여러대두 발효식품으로부터 단백질 분해능이 있는 균주를 분리하고, 분리된 균주들 중에서 ACE 저해활성이 가장 높은 균주인 SS103 균주를 선정하였다. 선정된 SS103 균주는 운동성이 있는 gram 양성 간균으로 내생포자를 형성하는 호기성균이었으며, pH 5~9 사이에서 생육하고 생육온도는 2$0^{\circ}C$~$50^{\circ}C$로 내열성이 약한 중온균의 특성을 보였으며, glucose, sucrose, mannitol 및 sorbitol 등의 당 이용 특성을 보였다. 그리고 세포의 지방산 조성은 $C_{15:0}$ anteiso, $C_{17:0}$ cis 형 및 $C_{17:0}$ iso 형이 주된 지방산으로 각각 33.9%, 18.8% 및 16.5%의 분포를 나타내었다. 이상과 같은 분석 겨과를 토대로 SS103 균주는 Bacillus subtilis로 동정되었다. Bacillus subtilis SS103 균주의 최적 배양 조건은 $37^{\circ}C$, 초기배양액 pH 8.0에서 배양시간 48시간으로 나타났으며, 이때 통기량이 높은 경우 효소활성도 높은 특성을 보였다.을 보였다.

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전통 누룩으로부터 분리된 Killer Toxin 생산 균주 Pichia anomala K15의 특성 (Characteristics of Pichia anomala K15 Producing Killer Toxin Isolated from Traditional Nuruk)

  • 정희경;박치덕;이기동;박승춘;박환희;홍주헌
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제36권8호
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    • pp.1077-1082
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    • 2007
  • 본 연구에서는 발효식품의 저장기간을 연장하거나 이상발효를 방지하기 위해 미생물 유래의 천연 항균성 물질인 killer toxin 생산 균주인 K3, K5, K11, K12, K15를 전통누룩으로부터 분리하였다. 분리된 killer toxin 생산 균주 중 식중독의 원인균인 Salmonella Typhimurium 및 장염비브리오의 원인균인 Vibrio parahaemolyticus의 생육을 저해하며, killer toxin 활성이 가장 우수한 K15를 최종 선발하고 이를 Biolog사 동정시스템과 ITS영역의 염기서열 homology를 조사하여 동정한 결과, Pichia anomala에 99% 상동성을 나타내어 Pichia anomala K15로 명명하였다. P. anomala K15가 생산하는 killer toxin은 단백질 분해효소에 의해 불활성화 되므로 인체에서 단백질 분해효소에 의해 쉽게 분해가 가능한 안전한 항균물질임을 확인할 수 있었다. 또한 p. anomala K15는 에탄올 내성은 약하나 고농도의 당에서 저항성이 크므로 주조 발효초기 환경에서의 이상발효를 방지할 수 있을 것으로 사료되어진다.

Green Fluorescent Protein-reporter Mammalian One-hybrid System for Identifying Novel Transcriptional Modulators for Human $p14^{ARF}$ Tumor Suppressor Gene

  • Lee, Hye Jin;Yang, Dong Hwa;Yim, Tae Hee;Rhee, Byung Kirl;Kim, Jung-Wook;Lee, Jungwoon;Gim, Jin Bae;Kim, JungHo
    • Animal cells and systems
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    • 제6권4호
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    • pp.317-322
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    • 2002
  • To improve conventional yeast one-hybrid screening, we have developed an efficient mammalian one-hybrid system that allows rapid isolation of com-plementary DNAs which are able to induce human p14$^{ARF}$. tumor suppressor gene. A 1.5 kb promoter region of p14$^{ARF}$ was fused to EGFP to generate ARF promoter-EGFP reporter vector. This reporter plasmid was stably trans-fected into NIH3T3 cells for generation of reporter cell line. When the reporter cell line was infected with E2F-1 together with excess amounts of empty vector, the cells that received the positive modulator were readily identifiable by green fluorescence using FACS. The GFP-positive cells were cloned directly from the cultured cells and expanded in bulk culture. The genomic DNAs from GFP-positive cells were prepared and the CDNA insert in integrated retroviral genome was recovered by PCR using primers annealing to the retroviral vector sequences flanking the insert-cloning site. This system should be useful for efficient screening of expression CDNA libraries in mammalian cells to identify novel upstream regulators for spe-cific genes by one-hybrid interaction.ion.

Implant Anneal Process for Activating Ion Implanted Regions in SiC Epitaxial Layers

  • Saddow, S.E.;Kumer, V.;Isaacs-Smith, T.;Williams, J.;Hsieh, A.J.;Graves, M.;Wolan, J.T.
    • Transactions on Electrical and Electronic Materials
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    • 제1권4호
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    • pp.1-6
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    • 2000
  • The mechanical strength of silicon carbide dose nor permit the use of diffusion as a means to achieve selective doping as required by most electronic devices. While epitaxial layers may be doped during growth, ion implantation is needed to define such regions as drain and source wells, junction isolation regions, and so on. Ion activation without an annealing cap results in serious crystal damage as these activation processes must be carried out at temperatures on the order of 1600$^{\circ}C$. Ion implanted silicon carbide that is annealed in either a vacuum or argon environment usually results in a surface morphology that is highly irregular due to the out diffusion of Si atoms. We have developed and report a successful process of using silicon overpressure, provided by silane in a CAD reactor during the anneal, to prevent the destruction of the silicon carbide surface, This process has proved to be robust and has resulted in ion activation at a annealing temperature of 1600$^{\circ}C$ without degradation of the crystal surface as determined by AFM and RBS. In addition XPS was used to look at the surface and near surface chemical states for annealing temperatures of up to 1700$^{\circ}C$. The surface and near surface regions to approximately 6 nm in depth was observed to contain no free silicon or other impurities thus indicating that the process developed results in an atomically clean SiC surface and near surface region within the detection limits of the instrument(${\pm}$1 at %).

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Isolation and ars Detoxification of Arsenite-Oxidizing Bacteria from Abandoned Arsenic-Contaminated Mines

  • Chang, Jin-Soo;Yoon, In-Ho;Kim, Kyoung-Woong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권5호
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    • pp.812-821
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    • 2007
  • The ecosystems of certain abandoned mines contain arsenic-resistant bacteria capable of performing detoxification when an ars gene is present in the bacterial genome. The ars gene has already been isolated from Pseudomonas putida and identified as a member of the membrane transport regulatory deoxyribonucleic acid family. The arsenite-oxidizing bacterial strains isolated in the present study were found to grow in the presence of 66.7 mM sodium arsenate($V;\;Na_2HAsO_4{\cdot}7H_2O$), yet experienced inhibited growth when the sodium arsenite($III;\;NaAsO_2$) concentration was higher than 26 mM. Batch experiment results showed that Pseudomonas putida strain OS-5 completely oxidized 1 mM of As(III) to As(V) within 35 h. An arsB gene encoding a membrane transport regulatory protein was observed in arsenite-oxidizing Pseudomonas putida strain OS-5, whereas arsB, arsH, and arrA were detected in strain OS-19, arsD and arsB were isolated from strain RW-18, and arsR, arsD, and arsB were found in E. coli strain OS-80. The leader gene of arsR, -arsD, was observed in a weak acid position. Thus, for bacteria exposed to weak acidity, the ars system may cause changes to the ecosystems of As-contaminated mines. Accordingly, the present results suggest that arsR, arsD, arsAB, arsA, arsB, arsC, arsH, arrA, arrB, aoxA, aoxB, aoxC, aoxD, aroA, and aroB may be useful for arsenite-oxidizing bacteria in abandoned arsenic-contaminated mines.