The investigative research on the mammalian milk purely consisted of the physiological quality of lactoferrin was conducted to reveal the antimicrobial ativity of specifically functional foods with antibiotic characteristics as a basic data in food manufacturing. Bovine lactoferrin were isolated from raw milk samples, and was digested with pepsin, trypsin and chymotrypsin. It was necessary then to separate and purify lactoferrin from bovine raw milk, and in order to analyze the antimicrobial activity of the enzyme-treated bovine lactoferrin in their required quantitative fraction. Afterwards Escherichia coli and Staphylococcus aureus was incubated in it. It was that investigated to enzyme-treated fractions molecular weight and the peptide fragment with antimicrobial effect. 1. The purity of enzyme-treated bovine lactoferrin(BLF) was tested by SDS-PAGE. As a results of 12% SDS-PAGE assay, pepsin-treated LF did not exhibited band until if reaches 14 KDa, while trypsin and chymotrypsin treated LF, known to contain the non-digestive lactoferrin exhibited band at a molecular weight of 33 KDa. 2. Bovine lactoferrin was sucessfully purified through the use of Sephadex G-50 Column. In order to assay LF through the Sephadex G-50 column chromatography, the digestive bovine lactoferrin (BLFs) was eluted with a linear gradient of 0.05% Tris-HCl. When the gel-filtration analysis, pepsin, trypsin and chymotrypsin treatments of BLF fragments was showed 2, 3, and 2 peak, respectively. The results of the HPLC analysis confirmed that had a non-digestive lactoferrin receptor, and trypsin and chymotrypsin treated BLFs has an antimicrobial effect. 3. To measure the strength of the antimicrobial effect of enzyme treated lactoferrin it was compared to the antimicrobial activity taking place at the incubated Escherichia coli and Staphylococcus aureus. This might explain the resistance of the microorganisms for peptide fragment. The pepsin-treated of bovine lactoferrin was markedly reduced by incubation of the cells. Trypsin-treated of BLF was similar to chymotrypsin-treated of BLF. However, trypsin and chymotrypsin treatments of BLFs were showed the antimicrobial effect until eight hours incubation for native bovine lactoferrin. Therefore the enzyme-treated lactoferrin have an antimicrobial effect even non-digestive lactoferrin. 4. The digestive bovine lactoferrin fragments assay was carried out by the use of Sephadex G-50 column chromatography and SDS-PAGE. The pepsin and chymotrypsin-treated fragments has a low molecular weight and trypsin-treated lactoferrin was only showed a band. It was described that characteristics of digestive protein. It appeared that there may be a relation between virulence and resistance to enzyme-treated BLF.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.4
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pp.705-711
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1998
The digestibility of xylooligosaccharide(XO) by juices of the digestive tract and retardation effect of XO on the adsorption of bile acids were compared with fructooligosaccharide(FO) and isomaltooligosaccharide(IO). In vitro digestion experiments showed that any hydrolyzed products of FO, IO and XO were not detected by HPLC after reaction with saliva, pancreatic, artifical intesteinal, and large intestinal luices, and artifical sera for 4 hours at 37$^{\circ}C$. However, IO were mostly digested by the small intestinal juice, and some quantity of FO were digested. XO were not digested at all by any enzyme of digestive tract. In order to investigate retardation effect of XO on the bile acid absorption. In vitro, permeability of bile acid against dialysis membrane was determined in the mixture which contained guar gum instead of XO was set 100%. The premeability of bile acid showed about 50% in the FO and IO mixture and 43% in the XO mixture. The activity of lactase in FO group and activity of sucrase and maltase in XO group in rat small intestinal mucosa were significantly decreased. Consequently, the present results indicate that XO is indigestible in digestive tract and has retarding effect of adsorption of bile acid compared with the other oligosaccharides. The disaccharidase activity of the XO dietary group was lower than that of the other oligosaccharides dietary group. Furthermore, it was suggested that hydrolysis of sugar may be retarded in digestive tract and glucose level in blood may be controlled effectively by the XO.
Forty-four Gansu Alpine Fine-wool lambs were used to study changes in the activities of three gastric and five pancreatic enzymes under grazing conditions between 0 and 56 days of age. The lambs were slaughtered on days 0, 3, 7, 14, 21, 28, 42 and 56, the abomasal contents, mucosa and pancreas were immediately removed and placed into liquid nitrogen and enzyme activities were determined. Gastric enzyme (chymosin, pepsin and pregastrc esterase) activities were relatively high at birth, especially chymosin, but decreased quickly between day 0 and 21. The activity of pepsin changed insignificantly with increasing age. There was no significant change in the pancreatic enzyme activities (trypsin, chymotrypsin, ${\alpha}$-amylase, lipase and lactase). The activity of trypsin was relatively higher than that of the other pancreatic enzymes, and lactase activity was low. These ontogenic patterns might be under the control of many gut regulatory peptides, the plasma concentrations of which changed simultaneously. Some gastric and pancreatic enzymes were correlated with plasma concentrations of these gut regulatory peptides.
Objective : Kyenegum(Galli Stomachichum Corium) has been popularly used long as the digestive. The purpose of this study was to investigate the enzymatic characteristic of Kyenegum crude enzyme. Methods : To evaluate of the enzymatic characteristic of Kyenegum, we examined the activity of Kyenegum crude enzyme from optimum solvent, optimum temperature and pH of crude Kyenegum extract. Futhermore, we examined the effects of NaCI and acidity of crude Kyenegum extract. Results : The Kyenegum was composed with crude protein about 20%, crude lipid 2%. The optimum Kyenegum dry condition, optimum extract solvent, optimum temperature and optimum pH were $4{\sim}6$ hours at $60^{\circ}C$, commercial apple vinegar, $50^{\circ}C$ and 2.0. Conclusion : The result suggests that the Kyenegum crude enzyme extract very strong enzyme in temperature, NaCl and acidity, respectively.
Suhyeok Kim;Jaebeom Shin;Yeonji Lee;Wonhoon Kim;Sang-Wook Moon;Haengsoo Yu;Kyeong-Jun Lee
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.56
no.5
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pp.634-643
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2023
The effects of dietary supplementation with fermented blood meal (FBM) in two forms were evaluated on the growth performance, hematological parameters, innate immune response, antioxidant capacity, digestive enzyme activity and intestinal histology of Japanese eel Anguilla japonica. A commercial powder feed was used as a basal diet (Con). Six other diets were prepared by supplementing 2, 4 and 6% FBM either in powder or liquid form to the Con diet (designated as P2, P4, P6, L2, L4 and L6, respectively). In total 420 eels (initial mean body weight: 55.1±1.71 g) were distributed into 21 tanks (450L) at a density of 20 eels per tank. Three replicate groups of fish were fed one of the seven diets twice daily for 12 weeks. No significant differences were observed in the growth performance and survival among all groups. Fish fed FBM-containing diets showed significantly improved hematological parameters, innate immunity and antioxidant capacity than those in the Con group. Fish fed FBM-containing diets showed significantly enhanced digestive enzyme activity, villus length and goblet cells than those in fish fed Con diet. These results indicate that both powder and liquid FBM could be a good functional feed additive to improve innate immunity and digestion in Japanese eel.
A $\alpha$-l, 4-D-glucan maltohydrolase $(\beta$-amylase), secreted by the mesophilic aerobic bacterium Bacillus polymyxa No.26, was purified and characterized. The enzyme production was increased after a logarithmic phase of bacterial growth and paralleled with the onset of bacterial sporulation. By applying anion exchange chromatography and gel filtration the enzyme was purified 16.7-fold and had a specific activity of 285.7 units/mg. Two enzyme activities were eluted on a column of DEAE-Sephadex chromatography, and they were designated as E-I for a major enzyme peak and E-II for a minor peak. Of them, E-I enzyme peak was further purified by using gel chromatography. The molecular mass of this enzyme was determined to be 64, 000 daltons and consisted of a single subunit, showing an isoelectric point of 8.9. The enzyme was able to attack specifically the $\alpha$-l, 4-glycosidic linkages in soluble starch and caused its complete hydrolysis to maltose and $\beta$-limited dextrin. This amylolytic enzyme displayed a temperature optimum at $45^\circ{C}$ and a pH optimum at 7.0. The amino acid composition of the purified enzyme was quite similar to the other bacterial $\beta$-amylases reported. Surprisingly, the purified enzyme from this aerobe only exhibited hydrolytic activity on soluble starch, not on starch granules. The degradation of from starch by $\beta$-amylase was greatly stimulated by pullulanase addition. These results differentiated from other $\beta$-amylases reported. Based on a previous result that showed the enzyme system involves in effective degradation of raw starch granules, this result strongly suggested that the purified enzyme (E-I) can be a synergistic part of starch granule-digestion and E-II plays a crucial role in digestion of starch granules.
To check the differences of the digestive enzymes by the bait habits and the proteolytic activities of the fissile extracts from the fish, omnivorous filefish (Navodon modestus), carnivorous cat shark (Scilliorhinus tarazame) and bloodsucking hag fish (Eptatretus burgeri) were sampled for this experiment. The activity of crude alkaline protease extracted from the muscle and the internal organs of the samples was determined with casein as substrate. The activity of the proteolytic enzymes showed remarkable differences by the organs of the fish. The optimum condition of the pretenses from the muscle revealed in range of pH 7.8-8.3, at $60-65^{\circ}C$, while those of the enzymes from the internal organs were at about pH 8.2, $45-55^{\circ}C$, but those of hag fish were at about pH 6.7, $45-55^{\circ}C$. The proteolytic activity of the enzyme of alimentary canal in filefish and in hag fish was 57 and 11 times stronger than that of muscle, respectively. The crude enzyme from the alimentary canal of file fish showed the strongest proteolytic activity in samples submitted and that of cat shark was the lowest. The activity of pancreatic alkaline protease in cat shark was 50 fold higher than that of muscle alkaline protease in the fish.
Six protein-degrading bacteria were isolated from digestive organ of Harmonia axyridis. These isolates were categorized as Staphylococcus sciuri subsp. sciuri (3 strains), Bacillus subtilis (1 strain), and Bacillus thuringiensis (2 strains) by 16S rRNA gene sequence analysis. The Staphylococcus sp. CB2-3 was selected as a protease-producing bacterium which showed the highest protease activity of 58.5 U/ml at the pH 5.0 medium. The optimal pH and temperature of protease activity were pH 5.0 and $40^{\circ}C$, respectively. This acid protease had a relatively high stability of 80% between $30-50^{\circ}C$ at broad temperature range. The opimal medium compositions of carbon, nitrogen and mineral source for cell growth and protease activity were investigated. When sorbitol (0.5%) was used as carbon source, enzyme activity was increased about 2 times than that of the basal medium. When skim milk (0.5%) was used as nitrogen source, activity was increased about 2.5 times than that of the control. Cell growth and enzyme activity were increased by mineral source such as KCl, $K_2HPO_4$, $FeSO_4$, but was completely inhibited by divalent ions such as $Co^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Cu^{2+}$.
The Present experiment was designed to investigate the effects of Soo Jeom San on the function of heart and digestive organs. And thus it was analyzed the total acidity, recovery effect, and the other various enzyme activities such as ATPase, Creatine kinase, Aspartate transaminase, and Lactate dehydrogenase. The results were obtained as follows : 1. The Total acidity decreased after Soo JeomSan administration for 6 days, however the total acidity inoreased after the drug administration for 9 days, these phenomena demonstrate that Soo Jeom San acts as a dual factor. The mechanism of decreasing the total acidity was considered to the inhibition of ATPase activity used for HCI active transport from parietal cells. 2. Soo Jeom San recovered the islets of Langerhans which was disrupted by streptozotocin. The recovery mechanism was suggested that Soo Jeom San stimulates the ${\beta}-cell$ proliferation. 3. Soo Jeom San inhibited the enzyme activities such as Creatine kinase and Aspartate transaminase, however the drug activated Lactate dehydrogenase. According to the obtained results, Soo Jeom San may be used for curing gastric ulcer and myocardiac infarction.
Obesity is one of causes of the all adult diseases. We investigated the body weight decrease effect of the selected plants by digestive enzyme activity inhibition test. In a preliminary test, Inonotus obliquus and Rubus coreanus Miq. were found to be effective. Based on this result & previous result, we manufactured the mixture of plant extracts named as Misol$^{TM}$. Misol is applied anti-obesity beverage and rice. When we administered Miso/ sub TM/ to rats, it was found to be effective in body weight decrease. Result that is experimented during 20 weeks, is effective body weight and total cholesterol, triglyceride decrease. In case of human, anti-obesity beverage administered group showed 5.65% body weight decrease, 4% waist length decrease and 6% abdomen length decrease respectively. And anti-obesity rice administered group showed 2.3 kg body weight decrease, 2.9 cm waist length decrease and 3.74 cm abdomen length decrease respectively. This body control effect was supported by plant extracts in the Misol, anti-obesity beverage and rice - administered group. From these results, we suggest that this functional food could be helpful for body weight controlling obesity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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