To study the gene expression change and possible signal pathway during androgen-dependent prostate cancer (ADPC) becoming androgen-independent prostate cancer (AIPC), an LNCaP cell model of AIPC was established using flutamide in combination with androgen-free environment inducement, and differential expression genes were screened by microarray. Then the biological process, molecular function and KEGG pathway of differential expression genes are analyzed by Molecule Annotation System (MAS). By comparison of 12,207 expression genes, 347 expression genes were acquired, of which 156 were up-ragulated and 191 down-regulated. After analyzing the biological process and molecule function of differential expression genes, these genes are found to play crucial roles in cell proliferation, differntiation, cell cycle control, protein metabolism and modification and other biological process, serve as signal molecules, enzymes, peptide hormones, cytokines, cytoskeletal proteins and adhesion molecules. The analysis of KEGG show that the relevant genes of AIPC transformation participate in glutathione metabolism, cell cycle, P53 signal pathway, cytochrome P450 metabolism, Hedgehog signal pathway, MAPK signal pathway, adipocytokines signal pathway, PPAR signal pathway, TGF-${\beta}$ signal pathway and JAK-STAT signal pathway. In conclusion, during the process of ADPC becoming AIPC, it is not only one specific gene or pathway, but multiple genes and pathways that change. The findings above lay the foundation for study of AIPC mechanism and development of AIPC targeting drugs.
To enhance our understanding of toxicity mediated through the pathway by which TCDD stimulates gene expression, we have investigated genes whose expressions are changed after treatment with TCDD and/or MNNG in human Chang liver cell. First, we treated with MNNG and TCDD for two weeks to transform human Chang liver cell. We obtained cell looks like to be transformed and compared the differential gene expression by using cDNA chip (Macrogen) which carrys genes related with signal transduction pathways, oncogenes and tumor suppressor genes, etc. We found that TCDD up- or down-regulated 203 and 111 genes including oncogenes and tumor suppressor genes in human Chang liver cell two fold or more, respectively. Second, we compared the differential gene expression after treatment with TCDD only by using cDNA chip (Superarray) which carrys genes related with cell cycle regulations, and found that TCDD up regulated genes related with cell proliferation as well as cell growth inhibition in human Chang liver cell two fold or more, respectively. These results suggest that toxicity induced by TCDD may reflect sustained alterations in the expression of many genes and that the changes reflect both direct and indirect effects of TCDD.
Kim, In-Su;Yang, So-Young;Han, Joo-Hui;Jung, Sang-Hyuk;Park, Hyun-Soo;Myung, Chang-Seon
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제19권2호
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pp.141-149
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2015
"G protein-coupled receptor 40" (GPR40), a receptor for long-chain fatty acids, mediates the stimulation of glucose-induced insulin secretion. We examined the profiles of differential gene expression in GPR40-activated cells treated with linoleic acid, and finally predicted the integral pathways of the cellular mechanism of GPR40-mediated insulinotropic effects. After constructing a GPR40-overexpressing stable cell line (RIN-40) from the rat pancreatic ${\beta}$-cell line RIN-5f, we determined the gene expression profiles of RIN-5f and RIN-40. In total, 1004 genes, the expression of which was altered at least twofold, were selected in RIN-5f versus RIN-40. Moreover, the differential genetic profiles were investigated in RIN-40 cells treated with $30{\mu}M$ linoleic acid, which resulted in selection of 93 genes in RIN-40 versus RIN-40 treated with linoleic acid. Based on the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes Pathway (KEGG, http://www.genome.jp/kegg/), sets of genes induced differentially by treatment with linoleic acid in RIN-40 cells were found to be related to mitogen-activated protein (MAP) kinase- and neuroactive ligand-receptor interaction pathways. A gene ontology (GO) study revealed that more than 30% of the genes were associated with signal transduction and cell proliferation. Thus, this study elucidated a gene expression pattern relevant to the signal pathways that are regulated by GPR40 activation during the acute period. Together, these findings increase our mechanistic understanding of endogenous molecules associated with GPR40 function, and provide information useful for identification of a target for the management of type 2 diabetes mellitus.
Kim, Min-Goo;Seo, Hee-Won;Choi, Yo-Han;Lee, Chang-Kyu;Ka, Hak-Hyun
한국수정란이식학회지
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제24권2호
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pp.77-87
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2009
To understand molecular and cellular mechanisms of many gene products in the female reproductive organs including the ovary and uterine endometrium as well as during embryo development, researchers have developed and utilized many effective methodologies to analyze gene expression in cells, tissues and animals over the last several decades. For example, blotting techniques have helped to understand molecular functions at DNA, RNA and protein levels, and the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) method has been widely used in gene expression analysis. However, some conventional methods are not sufficient to understand regulation and function of genes expressed in very complex patterns in many organs. Thus, it is required to adopt more high-throughput and reliable techniques. Here, we describe several techniques used widely recently to analyze gene expression, including annealing control based-PCR, differential display-PCR, expressed sequence tag, suppression subtractive hybridization and microarray techniques. Use of these techniques will help to analyze expression pattern of many genes from small scale to large scale and to compare expression patterns of genes in one sample to another. In this review, we described principles of these methodologies and summarized examples of comparative analysis of gene expression in female reproductive organs with help of those methodologies.
Lekha, Govindaraj;Vijayagowri, Esvaran;Sirigineedi, Sasibhushan;Sivaprasad, Vankadara;Ponnuvel, Kangayam M.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제29권2호
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pp.145-152
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2014
The variation in the level of immune response related gene expression in silkworm, Bombyx mori following infection with Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) was analyzed at different time intervals. The occlusion bodies of BmNPV orally inoculated to the two most divergent silkworm races viz., Sarupat (resistant to BmNPV infection) and CSR2 (susceptible to BmNPV infection) were subjected to oral BmNPV inoculation. The expression profile of gp 41 gene of BmNPV in the Sarupat and CSR2 races revealed that the virus could invade the midguts of both susceptible and resistant races. However, its multiplication was significantly less in the midgut of resistant race, while, in the susceptible race, the viral multiplication reached maximum level within 12 h. These findings indicate that potential host genes are involved in the inhibition of viral multiplication within larval midgut. The immune response genes arylphorin, cathepsin B, gloverin, lebocin, serpin, Hsp 19.9, Hsp 20.1, Hsp 20.4, Hsp 20.8, Hsp 21.4, Hsp 23.7, Hsp 40, Hsp 70, Hsp90 revealed differential level of expression on NPV infection. The gloverin, serpin, Hsp 23.7 and Hsp 40 genes are significantly up-regulated in the resistant race after NPV infection. The early up-regulation of these genes suggests that these genes could play an important role in baculovirus resistance in the silkworm, B. mori.
Communications for Statistical Applications and Methods
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제22권2호
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pp.181-199
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2015
In a short history, RNA-seq data have established a revolutionary tool to directly decode various scenarios occurring on whole genome-wide expression profiles in regards with differential expression at gene, transcript, isoform, and exon specific quantification, genetic and genomic mutations, and etc. RNA-seq technique has been rapidly replacing arrays with seq-based platform experimental settings by revealing a couple of advantages such as identification of alternative splicing and allelic specific expression. The remarkable characteristics of high-throughput large-scale expression profile in RNA-seq are lied on expression levels of read counts, structure of correlated samples and genes, larger number of genes compared to sample size, different sampling rates, inevitable systematic RNA-seq biases, and etc. In this study, we will comprehensively review how robust Bayesian and non-parametric methods have a better performance than classical statistical approaches by explicitly incorporating such intrinsic RNA-seq specific features with flexible and more appropriate assumptions and distributions in practice.
The genome sequencing project has generated and will continue to generate enormous amounts of sequence data including 5 eukaryotic and about 60 prokaryotic genomes. Given this ever-increasing amounts of sequence information, new strategies are necessary to efficiently pursue the next phase of the genome project-the elucidation of gene expression patterns and gene product function on a whole genome scale. In order to assign functional information to the genome sequence, DNA chip(or gene microarray) technology was developed to efficiently identify the differential expression pattern of independent biological samples. DNA chip provides a new tool for genome expression analysis that may revolutionize many aspects of biotechnology including new drug discovery and disease diagnostics.
The expression of genes responding to cold stress in a freshwater alga, Spirogyra varians, was studied by using differential expression gene (DEG) method. A gene strongly up-regulated in 4°C was isolated and designated as SVCR2 (Spirogyra varians cold regulated) gene. The cDNA encoding SVCR2 was cloned using λZAP cDNA library of Spirogyra varians. The deduced amino acid had a sequence similarity with trans-membrane protein in Arabidopsis thaliana (Q9M2D2, 52.7%). Northern blot analysis demonstrated that transcript level of SVCR2 increased about 10 fold under low temperature (4°C), compared with that cultured at warm (20°C) conditions. The expression of SVCR2 was also affected by light conditions. When the plants were exposed to high light (HL) (1200 μmol photon m–2 s–1), the expression of SVCR2 began within 2 hrs. This gene expression lasted for 4 hrs and decreased afterwards. Under the blue light (470 nm) condition, the expression of this gene was induced in same way as HL treatment, even under less than 100 μmol photon m–2 s–1. But red light (650 nm) and UV-A irradiation did not affect the expression of SVCR2.
Intertidal macroalgae are exposed to many abiotic stress factors, and they must regularly react to changes in their environment. We used RNA-seq to describe how Porphyra umbilicalis (Rhodophyta) changes gene expression patterns to interact with different habitats. Tissue samples were taken from a typical habitat along the open-coast of the Northwest Atlantic, as well as from a rare, atypical habitat in an estuarine tidal rapid environment. Differential gene expression analyses suggest that pathogic bacteria and viruses may be a significant factor influencing the transcriptome in the human-impacted estuarine environment, but the atypical habitat does not necessarily induce more stress in Porphyra umbilicalis growing there. We found genes related to nitrogen transport are over-expressed in tissue from the open-coastal site compared to those from the estuarine site, where environmental N levels approach hypertrophic levels. Low N levels impede growth, but high levels are toxic to cells, and we use qPCR to show this species regulates expression of a putative high-affinity $NH_4{^+}$ transporter under low and high N conditions. Differences in expression of this transporter in these habitats appear to be inherited from parent to offspring and have general implications for adaptation to habitat in other species that are capable of asexual reproduction, as well as more specific implications for this species' use in aquaculture.
A large data set of Hanwoo (Korean cattle) ESTs was analyzed to obtain differential gene expression results for the following three libraries: intramuscular fat, longissimus dorsi muscle and liver. To better understand the gene expression profiles, we identified differentially expressed genes (DEGs) via digital gene expression analysis. Hierarchical clustering of genes was performed according to their relative abundance within the six separate groups (Hanwoo fat versus non-Hanwoo fat, Hanwoo muscle versus non-Hanwoo muscle and Hanwoo liver versus non-Hanwoo liver), producing detailed patterns of gene expression. We determined the quantitative traits associated with the highly expressed genes. We also provide the first list of putative regulatory elements associated with differential tissue expression in Hanwoo cattle. In addition, we conducted evolutionary analysis that suggests a subset of genes accelerated in the bovine lineage are strongly correlated with their expression in Hanwoo muscle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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