• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.85-85
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• 2003

Human lactoferrin (hLF) is an 80 kDa iron-binding glycoprotein that is expressed in high concentration in milk and in lesser amount in the secondary or specific granules of neutrophils and in plasma, LF is classically considered to be related to the binding, transport, and storage of iron. The transgenic mice carrying the human hLF gene in conjunction with the bovine $\beta$-casein promoter produced the human hLF in their milk during lactation. To screen transgenic mice, PCR was carried out using chromosomal DNA extracted from tail or toe tissues. In this study, stability of germ line transmission and expression of hLF were monitored up to generation Fl7 of a transgenic line. When female mouse of generation F9 was crossbred with normal male, generation F9 to Fl7 mice showed similar transmission rates ($66.0 \pm 12.57%, 42.0 \pm 14.98%, 72.2 \pm 25.45%, 50.0 \pm 16.70%, 65.7 \pm 6.45%, 48.6 \pm 14.65%, 54 1 \pm 18 11%, 57.8 \pm 16.16% and 48.6 \pm 20.66$, respectively), implying that the hLF gene can be transmitted stably up to long term generation in the transgenic mice For ELISA analysis, hLF expression levels were determined with an hLF ELISA kit in accordance with the supplier's protocol. Expression levels of human hLF from milk of generation F9 to Fl3 mice were $ 3.2 \pm 0.69 mg/ml, 3.1 \pm 0.81 mg/ml, 4.6 \pm 1.38 mg/ml, 3.1 \pm 0.42 mg/ml, and 4.5 \pm 1,48 mg/ml$, respectively. These expression levels were lower than that of founder (6.6 mg/$m\ell$) mouse. We concluded that transgenic mice faithfully passed the transgene on their progeny and successively secreted target proteins into their milk through several generations.

• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.73-73
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• 2003

The present study examined the possibility of long term storage, by cryopreservation in liquid nitrogen, of the sperm of Filefish (Thamnaconus septentrionalis), and the changes in motility, survival rate and ultrastructure of the sperm after freezing and thawing. The sperm was collected by stripping and stored on ice until experiments. For selection of the immobilizing solution, diluted artificial seawater (ASW) of 20, 30 and 40% were tested. The sperm motility was significantly inhibited in 30% ASW, and restored entirely after 100% ASW was added again. Two cryoprotectants, dimethyl sulfoxide ($Me_2$SO) and glycerol, were added to 30% ASW to formulate the extenders at the concentrations between 5 to 20% by volume for freezing. The sperm was diluted at the ratio of 1 :6 with the extenders, inserted into 0.5ml plastic straws and frozen at a freezing rate of $50^{\circ}C$/min to $-100^{\circ}C$ after equilibration for 10 min at room temperature, followed by plunging into liquid nitrogen. The straws were thawed in a $30^{\circ}C$ water bath for 15 sec. The highest post-thawed sperm motility and survival rate were obtained with 5% glycerol Afterward, the effect of different freezing rates was examined using 5% glycerol as a cryoprotectant, and the rate of $20^{circ}C/min to $-80^{\circ}C$ showed the best result Some ultrastructural changes of sperm, such as the detachment of plasmatic and nuclear membranes, destruction of mitochondria, were observed after cryopreservation. Morphological normality of the sperm in 5% glycerol frozen at the ratio of 1$0^{\circ}C$/min to $-80^{\circ}C$ was better than that of others.

• 한국수정란이식학회지
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• 제31권3호
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• pp.221-226
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• 2016

The aim of the present study was to assess the embryo development and survivability of post-thawed bovine embryos produced in vitro by addition of cysteine. The rates of metaphase II formation were not differed significantly among three groups(TCM199 73.8%, TCM199 with 0.3% cysteine 76.9%, TCM199 with 0.5% cysteine 83.8%, respectively). No difference of cleavage rate(70.6~74.6%) was seen among three culture medium(TCM199 70.6%, CR1aa 71.3%, SOF 74.6%) with 0.5M cysteine. however, Significantly(P<0.05) higher development rate into blastocyst stage by 0.5M cysteine addition was obtained in SOF medium(35.6%) than in TCM199(27.6%) or CR1aa(26.6%), however no significant differences in the cleavage rates were among three culture medium. After frozen the blastocysts cultured with 0.5M cysteine, The re-expansion rates were 61.3%~86.4% among groups, and hatching rates were 26.3%~46.9% among groups, the rates of re-expansion and hatching were significantly(P<0.05) higher in SOF medium(86.4% and 46.9%) than those in TCM199(61.3% and 26.3%) and CR1aa medium(87.1 and 44.4%). After thawing, the blastocyst re-expansion rate was significantly(P<0.05) higher in in vivo (87.1%) and in vitro (70.3%) embryos. In conclusion, our results demonstrate that supplementation of IVM and IVC medium with 0.5M cysteine improved the quality of in vitro production embryo and post- thawed embryo. Future studies comparing these media systems in well-designed trials should be performed.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제16권2호
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• pp.77-85
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• 2012

담수에서 사육한 감성돔 Acanthopagrus schlegeli(담수감성돔) 냉동/해동 정자의 생존율이 가장 높았던 결빙억제제(cryprotective agent, CPA)는 dimethyl sulfoxide(DMSO)였으며, 다음으로 glycerol, ethylene glycol(EG) 그리고 methanol 순이었다. 해동 후 정자운동성은 glycerol, DMSO, EG, methanol 순으로 높았으며, 이상의 결과들은 해수에서 사육한 감성돔(해수감성돔)에서도 나타났다. 담수 및 해수감성돔 정자의 냉동보존시 적정 CPA는 DMSO와 glycerol이었으며, 생존율과 정자운동성이 가장 높았던 적정 농도는 모두 10%였다. 특히 10% DMSO로 냉동보존한 담수 및 해수감성돔 해동정자의 생존율과 정자운동성은 10% glycerol로 냉동보존한 해동정자보다 높게 나타났다. 냉동보존기간에 따른 담수 및 해수감성돔 해동정자의 생존율과 정자운동성을 측정한 결과, 대부분 보존기간이 길어질수록 감소하였으며, CPA의 농도가 높을수록 생존율과 정자운동성은 급격히 감소하였다. 그러나 5% DMSO로 냉동보존한 해동정자의 생존율 및 정자운동성은 차이는 보이지 않았다.

• 한국가축번식학회지
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• 제24권3호
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• pp.281-288
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• 2000

활성화처리를 위해 22시간 성숙된 난자를 5 $\mu$M ionomycin(I)에서 5분, 10 $\mu$M calcium ionophore(Ca)에서 5분, 2 mM 6-dimethylaminopurine(DMAP)에서 3시간 및 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ cycloheximide(CH)에서 6시간 동안 단용 또는 병용 처리하였다. 활성화 처리된 난자는 mCR$_1$aa 배양액 내에서 배양되었으며, 배양조건은 5% $CO_2$, 95% air 또는 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$ 이었다. 1 I, Ca DMAP 및 CH에 의해 처리된 난자의 48시간 난할율은 각각, 12.7%, 14.1%, 28.9% 및 22.9%였다. 그러나, 배반포는 형성되지 않았다. 2. I＋DMAP, I＋CH, Ca＋DMAP및 Ca＋CH에 의해 처리된 난자의 48시간 난할율은 각각, 96.9%, 82.1%, 93.1% 및 84.7%였고, 배반포 발생율은 각각, 10.4%, 5.3%, 17.6% 및 7.1%로, I 및 Ca를 이용하여 세포 내 칼슘수준을 증가시킨 후, DMAP로 3시간 동안 배양하였을 때, 배반포 발생율이 유의적으로 높았다(P<0.05). 3. I, Ca, DMAP 및 CH에 의해 단용 처리된 난자의 전핵 발생율은 각각, 5.4%, 3.6%, 28.3% 및 28.8%였다. 그러나, 병용 처리된 난자는 100%의 전핵 형성율을 나타냈다.

• 농촌의학ㆍ지역보건
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• 제31권3호
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• pp.255-262
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• 2006

영유아의 중요한 양육 항목의 올바른 실천율이 전체 항목의 약 60-70%에 불과하였고, 예방접종 프로그램에 겸하여 실시한 양육교육으로는 적극적인 교육이 이루어질 수 없어 교육 효과가 충분하지 않은 것으로 나타났으며, 영유아의 월령이 증가할수록 교육효과가 낮아 졌다. 전반적인 올바른 양육실천 정도를 높이고, 영유아의 월령 증가하더라도 어머니의 양육에 대한 관심을 지속 유지시킬 수 있으며, 교육 효과를 높일 수 있는 접근법을 모색하여 수행할 것을 제안하며, 수행되는 교육의 효과를 지속적으로 평가하는 과정을 통해 본 프로그램을 개선 발전시킨다면 부산지역 영유아의 올바른 양육 실천율이 높아질 수 있을 것으로 기대한다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제20권2호
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• pp.123-128
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• 2005

본 연구는 돼지 난포란의 vitrification 동결 시 내동제의 종류 및 농도가 생존율에 미치는 영향과 수정 후 체외발생율을 조사하고자 수행하였다. 1.0, 15, 30 및 40시간 성숙 배양시킨 난포란을 vitirfication 동결보존 후의 MII로의 발생율은 각각 $56.7\%,\;53.3\%,\; 63.3\%,\;65.0\%$였으며, diploid로의 발생율은 $23.3\%,\;18.3\%,\;10.0\%,\;3.3\%$로서 대조군의 ME 단계의 $78.2\%$에 비해 낮게 나타났으며 diploid 단계의 $5.5\%$에 비해서는 높은 체외성숙율을 나타냈다. 체외발생율은 초기의 미숙 난포란일수록 높은 체외성숙율을 나타냈다. 2. 미성숙 난포란을 회수 후 0, 15, 30 및 40시간 성숙 배양시킨 난포란을 vitirfication 동결 후 융해하였을 때 생존율은 각각 $34.0\%,\;26.0\%,\;18.0\%,\; 12.0\%,\;10.0\%$로서 비동결 난포란의 $60.0\%$에 비해 낮게 나타났지만 비교적 양호한 생존율을 나타냈다. 3. 0, 15, 30 및 40시간 성숙 배양시킨 미성숙 난포란을 vitrification 동결 융해 후 수정시켰을 때 체외수정율은 $60.0\%,\;54.0\%,\; 48.0\%,\;38.0\%$였으며, 배반포로의 체외발생율은 각각 $26.0\%,\;18.0\%,\; 8.0\%,\;4.0\%$로서 비동결 대조군의 $78.0\%$와 $38.0\%$에 비해 낮은 체외수정율과 체외발생율을 나타냈다. 4. 돼지 난포란을 EDS와 ETS 액으로 vitrifiestion 동결운해 후 $0\~15$ 시간 배양한 다음 체외수정시켰을 때 체외 수정율과 발생율은 각각 $50.0\%,\;22.0\%$ 및 $46.0\%,\;18.0\%$로서 대조군의 $74.0\%$와 $38.0\%$에 비해 낮게 나타났다.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권2호
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• pp.207-214
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• 1996

본 연구는 미세조작된 수정란의 초급속 재동결 후 발생능을 조사하기 위해서 수행하였다. 먼저 4세포기 생쥐 수정란으로부터 할구세포 한 개를 떼어내고 이들 수정란을 동결액에 넣어 상온에서 2.5분간 평형시킨 다음, 0.25ml straws에 넣어 곧바로 액체질소에 침지시켰다. 4세포기 수정란의 동결액으로는 4.0M(ethylene glycol 및 0.25M sucrose가 함유된 dPBS를 사용하였따. 상실배기 수정란의 동결을 위해서는 항동해제로 4.0M ethylene glycol 대신에 5.0M glycerol을 사용하였다. 융해후 biopsied 4세포기 수정란을 M16 배양액에서 상실배기까지 발달시킨 다음 상실배기용 동결액을 이용하여 초급속 재동결을 실시하였다. 재동결융해 후 발달한 biopsied 배반포기 수정란을 대리모에 이식하여 이들 수정란의 생존성을 검토하였다. 제1차 동결후 biopsied 수정란의 체외발달률은 78%로서 정상적인 수정란의 발달율(91%) 보다 낮은 성적으로 보여주었으나 (P<0.01), 이들 수정란의 이식 후 임신률은 각각 25 및 30%로서 두 실험군간에 차이가 인정되지 않았다. 그리고 biopside 상실배기 수정란의 초급속 재동결후 체외 발달률 및 임신률은 각각 89와 27%로서 biopsied 되지 않은 수정란의 성적 (각각 95 및 28%)과 유사하였다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때, 본 연구에서 사용된 초급된 재동결 과정이 미세조작된 생쥐수정란의 생존성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제19권1호
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• pp.1-10
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• 2004

본 연구는 1997년 IMF 이후 급격히 감소된 한우의 두수를 증가시키고, 최근 젖소 송아지 가격이 현저히 낮게 형성되고 있어 양축가의 사기가 떨어지고 있는데 가임 젖소 암소에 한우 수정란을 이식시켜 한우 송아지를 생산케 함으로서 농가 소득을 증대시키고 실시하였다. 1. 체외수정 후 6, 7, 8 및 9일째의 수정란을 이식하여 59.4%, 68.2%, 66.0% 및 100%의 수태율을 나타냈으며, 상실배기(20.0%) 수정란이 배반포기(61.1%∼69.5%) 수정란보다 낮은 수태율을 나타내었다. 2. 수란우의 영양상태는 과비가 되지 않고 약간 야윈 듯한 체형을 선발하는 것이 좋은 것으로 나타났다. 3. 황체가 형성된 자궁각에 수정란을 이식한 결과 수태율이 70.1%로서 황체가 형성된 반대편 자궁각에 이식한 수태율 62.5%보다 높은 성적을 나타냈다. 4. 수란우에 수정란을 이식하기 전 hCG 1500 IU 와 GnRH 5 $m\ell$ 투여한 결과 69.9%를 나타내어 무처리구 63.0%보다 다소 높은 성적을 나타내었다. 5. 수란우와 공란우의 발정이 일치할 경우(0일) 이식 후 수태율이 72.6%로서 여타구보다 높은 성적을 나타내었다. 6. 수란우 산차에 따른 수정란 이식 후 수태율은 미경산우가 59.1%로서 경산우 70.6%보다 낮게 나타났다. 7. 수정란 상태에 따른 이식 후 신선란 및 동결란 수태율은 각각 70.6%와 36.4%를 나타내어 신선란이 높은 수태율을 나타내었다. 본 연구의 결과를 요약하면 체외 수정란은 체외배양 7일에 생산된 배반포 및 확장배반포기 수정란을 공란우와 수란우의 발정을 정확히 동기화 시키고, 수란우의 황체가 뚜렷하게 형성된 경산우를 이용하며, 이식 전 수란우에 Hormone을 처리하는 것이 수태율을 향상시키는 것으로 나타났다.

• 한국심리학회지ㆍ일반
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• 제36권1호
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• pp.81-107
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• 2017

베일리영유아발달검사 제3판(Bayley-III)의 미국 규준이 영유아의 발달수행을 과대추정하고 발달지연율을 과소추정 한다는 논란이 있어서, 본 연구는 발달지연의 고위험군인 미숙아를 대상으로 미국 규준 적용시 Bayley-III의 임상적 유용성을 살펴보고자 하였다. 본 연구는 생후 1개월부터 24개월(교정원령)의 미숙아(재태기간 37주 미만)와 만삭아 93명을 대상으로 Bayley-III와 한국형베일리영유아발달검사 2판(K-BSID-II)을 실시하였다. 연구결과는 다음과 같다. 첫째, 미숙아/만삭아 각 93명을 대상으로 혼합설계 분산분석을 실시한 결과 재태기간(경증미숙아, 중증미숙아, 극중증미숙아, 만삭아)에 따른 Bayley-III의 발달지수 및 척도점수 간에 유의미한 차이가 있었다. 특히 경증미숙아 집단 내에서는 발달영역(인지, 언어, 운동)에 따라 유의미한 차이가 있는 것으로 나타냈다. 둘째, Bayley-III와 K-BSID-II을 모두 실시한 미숙아(n=79)를 대상으로 환산점수 평균 간의 차이를 살펴본 결과, Bayley-III의 발달지수는 K-BSID-II의 발달지수에 비해 유의미하게 높은 것으로 나타났으며 발달지연률은 크게 감소하는 것으로 나타났다. 마지막으로 ROC 분석을 통해 발달지연 변별에 대한 Bayley-III의 민감도와 특이도를 분석하고 Bayley-III의 임상적 절단점을 탐색한 결과, Bayley-III의 하위 척도 모두 우수한 수준의 변별정확도를 나타냈으나, 미국 규준 적용시 절단점은 더 높게 나타났다. 본 연구는 미국 규준을 사용하여 Bayley-III를 임상 현장에 적용할 때 점수 해석의 주의를 알리는 실증적인 자료로서, 한국 규준 마련시 표집 문제와 관련된 논의를 제공하였다.