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Antioxidant Effect of Edaravone on the Development of Preimplantation Porcine Embryos against Hydrogen Peroxide-Induced Oxidative Stress

  • Do, Geon-Yeop;Kim, Jin-Woo;Chae, Sung-Kyu;Ahn, Jae-Hyun;Park, Hyo-Jin;Park, Jae-Young;Yang, Seul-Gi;Koo, Deog-Bon
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.289-298
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    • 2015
  • Edaravone (Eda) is a potent scavenger of inhibiting free radicals including hydroxyl radicals ($H_2O_2$). Reactive oxygen species (ROS) such as $H_2O_2$ can alter most kinds of cellular molecules such as lipids, proteins and nucleic acids, cellular apoptosis. In addition, oxidative stress from over-production of ROS is involved in the defective embryo development of porcine. Previous study reported that Eda has protective effects against oxidative stress-like cellular damage. However, the effect of Eda on the preimplantation porcine embryos development under oxidative stress is unclear. Therefore, in this study, the effects of Eda on blastocyst development, expression levels of ROS, and apoptotic index were first investigated in preimplantation porcine embryos. After in vitro fertilization, porcine embryos were cultured for 6 days in PZM medium with Eda ($10{\mu}M$), $H_2O_2$ ($200{\mu}M$), and Eda+$H_2O_2$ treated group, respectively. Rate of blastocyst development was significantly increased (P<0.05) in the Eda treated group compared with only $H_2O_2$ treated group. And, we measured intracellular levels of ROS by DCF-DA staining methods and investigated numbers of apoptotic nuclei by TUNEL assay analysis is in porcine blastocyst, respectively. Both intracellular ROS levels and the numbers of apoptotic nucleic were significantly decreased (P<0.05) in porcine blastocysts cultured with Eda ($10{\mu}M$). More over, the total cell number of blastocysts were significantly increased (P<0.05) in the Eda-treated group compared with untreated group and the only $H_2O_2$ treated group. Based on the results, Eda was related to regulate as antioxidant-like function according to the reducing ROS levels during preimplantation periods. Also, Eda is beneficial for developmental competence and preimplantation quality of porcine embryos. Therefore, we concluded that Eda has protective effect to ROS derived apoptotic stress in preimplantation porcine embryos.

고양이의 정액 채취 방법이 동결 정액의 생존성에 미치는 영향 (Effect of Semen Collection Methods on the Post-thaw Viability of Cat Semen)

  • 하아나;윤진호;김유곤;조아라;이경림;공일근
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제35권1호
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    • pp.55-60
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    • 2011
  • The objective of this study was carried out to evaluate the efficiency of sperm collection methods on the post-thaw viability of cat semen. The cat semen was collected by artificial virginal (AV) and electronic ejaculate (EE) methods. The composition of semen extender was consisted of Tris-buffer supplemented with 20% egg yolk and 1% P/S antibiotics in Ext I, and more added 8% glycerol, 1.0% Equex STM paste of total volume in Ext II. The collected semen was adjusted the concentration and then diluted in Ext I for optimal concentration. The diluted semen was cooling to $5^{\circ}C$ temperature in refrigerator for at least 2 hrs and then diluted stepwise with Ext II for at least 1 hrs. After an equilibration for 1 hrs, the cooled semen was packaged in 0.5 ml straw and then freezing on the $LN_2$ vapor over 5 cm above from $LN_2$ and then immersed directly in $LN_2$ for cryopreservation. The frozen semen was thawed in $38^{\circ}C$ water for 15 sec and then evaluated the motility, viability, and morphology. Post-thaw semen were calculated the motility by SMI (sperm motility index). The live-dead sperm was evaluated by Eosin-B and morphological evaluation was by Diff-quik kit staining. The post-thaw concentration ($89{\times}10^6$ /ml vs. $128{\times}10^6$ /ml), viability ($22.6{\pm}10.6%$ vs. $37.1{\pm}26.1%$), morphological normality ($27.0{\pm}50.2%$ vs. $45.6{\pm}123.0%$) of EE and AV groups were not significant different, but the post-thaw motility was significant lower in EE than that in AV group ($53.1{\pm}3.6$ vs. $73.6{\pm}5.7$) (p<0.05). In conclusion, semen collection methods did not significant different between EE and AV groups except of post-thaw motility and so both semen collection methods could be applied in feline semen collection methods.

잔가시고기 Pungitius sinensis koibaroe (Tanaka) (큰가시고기과, 어강)의 산란과 성장 (Spawning and Growth of eightspine stickleback, Pungitius sinensis kaibarae (Tanaka) (Gasterosteidae, Pisces), in the Chavans Stream, a tributary of Kumho River, Korea)

  • 채병수;양홍준
    • 한국동물학회지
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    • 제36권2호
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    • pp.181-192
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    • 1993
  • The spawning and growth of eightspine stickleback,Pungitius sinensis kaiborae (Tanaka, 19151, were investigated in the Chavang Stream from March 1990 to february 1991 as a part of study on its life history. Nest building, spavming and parental behaviors were similar to those known on the sticklebacks of Europe, North America and Japan. Bht f sinensis kaibarae in the Chayang Stream, peculiarly, showed only superficial gluing behavior in nest building phase and made two nurseries iust behind the nest in Parental Phase. The individuals with fully mature eggs were found from late February to late June. The fecundity of an adult female was about 21 to 110 (mean 47.07) eggs and the diameter of kllv matured ovarian eggs ranged 1.3 to 1.5 mm. The smallest female with fully mature eggs was 25.8 mm in body length and had 21 eggs. The relationship between the number of mature eggs in ovary and body length was No. of eggs = 2.857BL -55.134 (r = 0.890). The number of deposited eggs in a nest was 27 to 637 and thew were composed of several clusters of various developmental stages. The distribution pattern of gonadsomatic index (GSl) against the body length shown that in females 1+ year-old fishes mainly participate in spawning but in males 11 and 2+ year-old fishes equally participate. From the fluctuat지n pattern of GSI and the number of mature eggs in ovary, it was assumed that the spawning season was from February to June and the peak of spawning was early March to late April. The newly hatched vouns was found at late April and their body length was about 10 mm. The vouns (O+) grew rapidly until late August. Then their srowth was slowed down and finallY ceased in midautumn. The young reached about 35 mm BL in their first year of life. The halting of growth was lasted to next Sune when the spawning season would be nearly closed. They (1+) began to grow asain from late june, grew rapidly until tate september and reached about 415 mm BL. Then there was no more grouvth until to die as 2+ yearold fish. Therefore it was assumed that the life span of P. sinensis kaibarae in the Chavang Stream would be about ko years. The relationship between the body length and the body weight was logBW = 2.9541ogBL -4.802 (r = 0.998).

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쭈굴감펭 (Scorpaena miosfoma)의 생식소 구조 및 생식주기 (Gonad Structure and Reproductive Cycle of the Smallmouth Scorpionfish, Scorpaena miostoma (Teleostei: Scorpaenidae))

  • 이정식;강주찬;허성회
    • 한국수산과학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.627-633
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    • 1997
  • 1995년 11월부터 1996년 10월까지 부산 수영만 인근해역에서 채집된 쭈굴감펭, Scorpaena miestoma의 생식소 구조, 생식세포의 발달 및 생식주기 등이 광학현미경 조직표본을 기초로 연구되었다. 정소의 내부조직상은 다수의 곡정세관으로 구성된다. 각각의 곡정세관은 여러개의 소낭 구조를 가지는데 각 소낭내의 생식세포들은 같은 단계의 발달상태를 보인다. 난소내부는 난소외막으로 부터 시작된 여러장의 난소박판으로 구성되어 있다. 난원세포는 난소박판의 내부상피에서 유래하며, 난모세포로 성장하면서 난소강쪽으로 돌출되어 난병에 의해 난소박판에 연결된다. 생물학적최소형은 암${\cdot}$수 모두 전장 12.5cm로 조사 되었다. 생식소숙도지수는 암 (3.81)${\cdot}$수(0.23) 모두 10월에 연중 최고치를 나타냈다. 암컷의 생식주기는 성장기 ($5\~8$월), 성숙기 ($9\~10$월), 완숙 및 산란기 ($11\~12$월) 그리고 회복 및 휴지기 ($1\~4$월)로 나눌 수 있다. 수컷의 생식주기는 성장기 ($6\~8$월), 성숙기 ($9\~10$월), 완숙 및 방정기 ($11\~l$월) 그리고 회복 및 휴지기 ($2\~5$월)로 나눌 수 있다.

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수도품종간(水稻品種間) 여러 질소효율(窒素効率)의 상호관계(相互關係) (Various Nitrogen Efficiencies and their Interrelation Among Rice Varieties)

  • 박훈;목성균
    • 한국토양비료학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.83-92
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    • 1976
  • 수도품종(水稻品種) 57개(個)을 선발(選拔), 연대별(年代別)로 3분(分)하여 이들의 여러 질소효율(窒素効率)을 무비(無肥)와 시비조건(施肥條件)에서 조사(調査)하고 그 상호관계(相互關係)를 단순상관(單純相關) 분석(分析)으로 살펴봤다. 상호관계(相互關係)는 한개 군내(群內)에서나 세군(群)의 모든 품종간(品種間)에서 동일(同一)하였다. 정조수량(正租收量)은 Fe(시비효율(施肥効率); 증수량(增收量)/시비량(施肥量)), E(질소(窒素)의 정조생산효율(正租生産効率)), Ef(흡수시비질소효율(吸收施肥窒素効率)), Eu(비료질소이용율(肥料窒素利用率); 흡수시비질소(吸收施肥窒素)/N시비량(施肥量))과 고도(高度)의 유의상관(有意相關)을 보였다. E는 수확지수(收穫指數)(HI), 전이율(轉移率)(T), 정조(正租) 및 고중(藁中)의 질소농도(窒素濃度)(GN% 및 SN%)와 유의정상관(有意正相關)이었다. E는 Ef에 거의 의존(依存)하였으며 통일계통(統一系統)은 부분적(部分的)으로 Es(흡수토양질소효율(吸收土壤窒素効率))에 의존(依存)하였다. Ef는 Eu보다 Fe에 기여하는바가 컸다($Fe=Ef{\times}Eu$). 재래종군(在來種群)에서 장려군(奬勵群)으로 발전(發展)하면서 Ef와 Eu는 모두 증가(增加)하였으나 장려군(奬勵群)에서 통일군(統一群)으로 발전(發展)할때는 Ef와 Es만이 현저히 증가(增加)하였다. 수도품종간(水稻品種間)에서 E와 Fe가 Ef에 의존도(依存度)가 크다는 사실은 전보(前報)에 보고(報告)한 토양간(土壤間)에서 E와 Fe가 Es와 Eu에 의존도(依存度)가 크다는 사실(事實)과 좋은 대조(對照)가 된다. Ef는 시비하(施肥下)에서 수도품종(水稻品種)을 선발(選拔)하는데 가장중요(重要)한 지표(指標)로 나타났다.

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한국 서해산 웅어, Coilia nasus 암컷의 성숙과 산란 (Maturation and Spawning of the Korean Anchovy Coilia nasus on the West Coast of Korea)

  • 전제천;강희웅;이봉우
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제13권2호
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    • pp.123-132
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    • 2009
  • 웅어 Coilia nasus의 생식소중량지수(GSI), 비만도지수, 난소 발달, 군성숙도, 포란수를 2007년 1월부터 2007년 12월 까지 조직학적 관찰 및 형태 측정 분석에 의해 조사하였다. GSI와 비만도지수는 2월에 증가하기 시작하여 난소가 성숙해지는 6월에 최대에 이르며, 그 후 산란이 일어나는 7월에 급격히 감소하였다. 그러므로 GSI와 비만도지수의 월별 변화는 난소의 성숙 및 산란과 밀접한 관련을 갖는다. 암컷의 난소 발달 단계는 연속적인 5단계로 구분되었다. 초기성장기($2{\sim}$3월), 후기 성장기($3{\sim}$4월), 성숙기($5{\sim}$6월), 완숙 및 산란기($6{\sim}$7월), 회복 및 휴지기($12{\sim}$1월). 본 종의 성숙과 산란은 고수온-장일장인 $6{\sim}$7월 사이에 일어난다. 군성숙도 조사에서 50% 이상 산란에 참여하는 암컷 개체는 전장 $24.1{\sim}27.0$cm 이었으며, 30.1 cm 이상에서 전 개체가 산란에 참여하였다. 절대포란수에 있어서 총포란수와 송숙란수는 전장 및 체중이 커질수록 증가하였다. 상대포란수에 있어서 총포란수와 성숙란수는 전장에 비례하여 증가하였으나, 이들 난수는 최대 체중(126.0${\sim}$150.0 g)에 도달하면 상대포란수는 오히려 감소하는 경향을 보였다.

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사람의 허벅지지방유래 줄기세포의 특성 분석 (Characterization of Human Thigh Adipose-derived Stem Cells)

  • 허진영;윤진아;강현미;박세아;김해권
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제14권4호
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    • pp.233-241
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    • 2010
  • 사람의지방줄기세포는지방조직내에존재하는 줄기세포로 얻기 쉽고, 골수줄기세포와 유사한 특징을 가지고 있다. 그러나 지방을 추출하는 과정, 공여자의 나이, 체질량, 추출 부위에 따라 세포의 특성이 달라지며, 이질적인 세포군을 얻게 된다. 따라서 본 연구에서는 허벅지 지방에서 유래한 줄기세포 특성 분석 및 중배엽, 내배엽성 세포로의 분화능을 알아보았다. 허벅지 유래 줄기세포는 골수줄기세포와 유사한 섬유아세포와 유사한 모양을 보였으며, 체외에서 56.5번의 분열을 하였고, 약 $5{\times}10^{22}$개의 세포를 얻을 수 있었다. 이들은 SCF, Oct4, nanog, vimentin, CK18, FGF5, NCAM, Pax6, BMP4, HNF4a, nestin, GATA4, HLA-ABC, HLA-DR과 같은 유전자를 발현하였으며, Oct4, Thy-1, FSP, vWF, vimentin, desmin, CK18, CD54, CD4, CD106, CD31, a-SMA, HLA-ABC 등과 같은 단백질을 발현하였다. 또한 이들은 지방, 골, 연골 세포와 같은 중배엽성 세포로 분화하였고, 더욱이 인슐린 분비세포와 같은 내배엽성 세포로도 분화하였다. 결론적으로, 사람의 허벅지 유래 줄기세포는 골수 줄기세포와 유사하게 체외에서 증식이 가능하였으며, 유전자 및 단백질 발현 패턴을 가지고 있었으며, 다양한 세포로 분화 가능하였다. 이러한 결과로 미루어 보아 허벅지 지방유래 줄기세포는 골수 줄기세포를 대체할 수 있는 세포치료제의 재료가 될 수 있을 것으로 사료된다.

도미분지 도미-1, 소라-1공의 층서와 고환경 (Stratigraphy and Paleoenvironment of Domi-1 and Sora-1 Wells, Domi Basin)

  • 윤혜수;변현숙;오진용;박명호;이민우
    • 자원환경지질
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    • 제45권4호
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    • pp.407-429
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    • 2012
  • 도미분지에 위치한 도미-1공과 소라-1공을 대상으로 와편모조류 미화석, 유기물상 분석 및 탄성파자료 해석을 통한 지층대비의 방법으로 연구지역의 층서와 고환경을 해석하고, 그 결과를 일본 북서 큐슈지역의 기존 연구결과와 비교하였다. 생물상변화를 토대로 상부에서부터 Ecozone A, Ecozone B(Barren zone), Ecozone C, Ecozone D(Barren zone)로 각각 4개의 생태층서대로 나누었다. 표준화석에 의한 지질시대는 2개 시추공 모두 하부로부터 에오세 - 올리고세, 마이오세, 플라이오세 - 플라이스토세 시기로 나타났다. 유기물상에 의한 고환경은 상부에서 시작하여 다음과 같이 5개로 나누었다; Association I(Inner neritic), Association II(Freshwater), Association III(Inner neritic), Association IV(Freshwater), Association V(Swamp). 두 개의 시추공 자료를 토대로 일본 측 생층서 자료와 비교 한 결과, Heteraluacacysta campanula, Tubiosphaera galatea 등의 에오세 - 올리고세 표준화석이 양측 연구 모두 동일하게 나타나고, 두 지역의 군집조성이 유사함을 확인하였다. 이는 도미분지와 일본의 북서 큐슈 지역의 고제3기층 발달사에 서로 연관성이 있음을 시사한다.

대학생의 성적 자율성 측정도구 개발 (Development of Sexual Autonomy Measurement for College Students)

  • 장순복
    • 여성건강간호학회지
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    • 제8권1호
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    • pp.106-115
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    • 2002
  • Little is known about sexual autonomy in the light of human sexual health or sexual behavior. The purpose of this study was to increase understanding of sexual autonomy by developing a scale to measure sexual autonomy in college students. The measure was based on the perspective of human beings as having autonomy. A methodological developmental design was used. The study was done in three steps and included concept development through content analysis of relevant literature individual interviews using open-ended questions with 19 college students, item analysis of data from self report questionnaires for item to total correlation, content validity index by professionals and college students, and factor analysis with principal component analysis. Three groups participated in testing the measurement scale; Group A in 1998, a nationwide convenience sample of college students (n=1,163), Group B, college students in 1999 (n=233), and Group C, college students in 2000 who responded to the measurement scale before and after a sex education program (n=216). A series of exploratory and confirmatory factor analyses were conducted to test validity. For analysis of the questionnaires, statistical methods including reliability (test-retest), item to total analysis, content validity, factor analysis for construct validity and t-test for mean difference according to gender, sexual coitus, previous sex education, and pre-post experiment sex education were used with SPSS 10.0. Results: 1. Two stable factors were extracted and these contributed 48.05% of the variance in the total score. All 13 items loaded above .40 on each factor. 2. Factor I with 10 items was named 'control' and factor II with 3 items and was named 'coping'. 3. Differences in sexual autonomy scores for college students according to their experience showed that there were significantly higher scores for sexual autonomy in the post sex education group(t=-10.841, p=.000), but there were no differences according to whether or not they had previous sex education. Female college students had higher sexual autonomy scores than male college students in A or B group (t=-5.933, p=.000/ t=-1.992, p=.048). 4. Cronbach's $\alpha$ was .8603 for the total 13 items with 1,632 college students, .8739 with 232 students, .8333$\sim$.7647 with pre-post sex education with 216 students. This measurement was found to have a high validity and reliability for measuring sexual autonomy in college students. Therefore, the author recommends that it be used to measure the effects of sex education. It is suggested that further study is needed to analyze the relationship between sexual autonomy and sexual behavior.

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점망둑, Chasmichthys dolichognathus의 생식기구에 관한 실험적 연구 (Experimental Studios on the Mechanism of Reproductive Cycle in the Longchin Goby Chasmichthys dolichognathus (HILGENDORF))

  • 백혜자;이택열
    • 한국수산과학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.243-252
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    • 1985
  • 해산어류의 생식주기성립기구에 관한 실험적 연구의 일환으로 부산 해운대 동백섬 연안에서 채집된 점망둑, Chasmichthys dolichognathus을 대상으로 1983년 2월부터 1984년 1월까지 자연산생식연주기를 조사하여 그 산란기를 밝혔고, 이들 성성숙에 관여하는 외적환경요인 즉 광과 수온이 미치는 영향을 실험적으로 조사하였는 바 그 결과는 다음과 같다. 1. 난소는 전형적인 낭상구조로서 많은 난소소낭으로 구성되어 있고 난원세포들은 난소소낭상피에서 분열증식하며, 성장하여 $40{\sim}150{\mu}m$의 초기난모세포로 된다. 이후 난경이 $500{\mu}m$내외가 되면 세포질에 난황구가 출현하여 난모세포의 성장과 함께 세포질 전체에 확산된다. 완숙난의 난경은 $1,000{\sim}1,100{\mu}m$ 전후이다. 2. 정소는 가느다란 관상형이며 여러개의 정소소엽으로 구성되었고, 성장할수록 각 소엽의 벽을 따라 많은 소낭을 형성하며 이 소낭상피에서 정원세포들이 분열증식하여 정모세포, 정세포로 발달한다. 정세포에서 일부 변태된 정자들은 정소소엽내강의 선세포사이에서 관찰된다. 이후 완숙상태의 정소소낭내에는 거의 변태된 완숙정자들로 가득 채워지며 방정은 수정관을 거쳐 저정낭에 밀집되었다가 방출된다. 3. 생식소숙도지수는 수온이 상승하는 4월에 최대가 되며 고수온기인 $8{\sim}9$월에 최소를 나타낸다. 4. 생식연주기는 12월부터 2월까지 초기성장기, 1월하순부터 3월에 걸쳐 후기성장기, 수온이 상승하는 2월부터 5월까지는 초기성숙기, 3월에서 8월에 걸쳐 후기성숙 및 완숙기, 4월에서 7월까지 산란기 그리고 5월부터 12월까지 퇴화 및 휴지기 등 연속적인 주기로 구분할 수 있었고, 산란성기는 4월하순에서 5월이었다. 5. 생식소를 활성화시켜 성숙촉진을 일으키는 외적환경요인으로서는 춘계 수온상승이 필수적이고 장일화가 보상적으로 작용하며, 생식소퇴화를 유도하여 산란을 종료시키는것은 일장에 관계없이 하계 고수온이 주요인인 것으로 판명되었다.

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