This study was conducted to investigate the efficacy of vitrification procedure for the cryopreservation of porcine oocytes and the utilization of vitrified oocytes as recipient cytoplasts for somatic cell nuclear transfer (NT), and observed that porcine oocytes are evaluated by pronuclear formation, and parthenogenetic development. Single fetal donor cells were deposited into the perivitelline space of vitrified enucleation oocytes, followed by electrical fusion and activation. NT embryos were cultured in NCSU-23 medium supplemented with 5% FBS, at $38.5^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ and air. 1. When the developmental rates of the oocytes after being culture for $0{\sim}10$ hours vitrified with EDS and ETS were 42.0%, 38.0%, respectively. This results were lower than the control group(62.2%). 2. When the developmental rates of the oocytes after being culture for $0{\sim}10$ hours vitrified-thawed with sucrose and glucose, 5% PVP, NCSU-23 supplemented with 10% FBS were 33.3%, 25.9%, respectively. This results were lower than the control group(55.6%). 3. The fusion and development to the blastocyst stage between the NT embryos constructed with the vitrified and non-vitrified oocytes were significant differences. Developmental rate of oocytes and NT embryos constructed with the vitrified or non-vitrified oocytes were $13.0{\pm}2.4%\;and\;23.2{\pm}2.4%$, respectively.
One of the problems associated with in vitro culture of primordial gern cells (PGCs) is the large loss of cells during the initial period of culture. This study characterized the initial loss and determined the effectiveness of two classes of apoptosis inhibitors, protease inhibitors and antioxidants, on the ability of the porcine PGCs to survive in culture. Results from electron microscopic analysis and in situ DNA fragmentation assay indicated that porcine PGCs rapidly undergo apoptosis when placed in culture. Additionally, \ulcorner2-macroglobulin, a protease inhibitor and cytokine carrier, and N-acetylcysteine, an antioxidant, increased the survival of PGCs in vitro. While other protease inhibitors tested did not affect survival of PGCs, all antioxidants tested improved survival of PGCs (p<0.05). Further results indicated that the beneficial effect of the antioxidants was critical only during the initial period of culture. Finally, it was determined that in short-term culture, in the absence of feeder layer, antioxidants could partially replace the effect(s) of growth factors and reduce apoptosis. Collectively, these results indicate that the addition of \ulcorner2-macroglobulin and antioxidatns can increase the number of PGCs in vitro by suppressing apoptosis.
The objective of this study was to investigate the effects of cell status of BOEC on development of bovine IVM/IVF embryos and gene expression in BOEC before or after culturing of embryos. The developmental rates beyond morula stage in the BOEC co-culture group was significantly higher than in the control group (p<0.05). In particular, blastocyst production in the BOEC co-culture group (28.3%) was dramatically increased compared with the control group (7.2%). In the in vitro development of bovine IVM/IVF embryos according to cell status, the developmental rates beyond morula stage in the primary culture cell (PCC) co-culture group were the highest of all experimental groups. Expression of genes related to growth (TGF-${\beta}$ EGF and IGFBP), apoptosis (Bax, Caspase-3 and p53) and antioxidation (CuZnSOD, MnSOD, Catalase and GPx) in different status cells of BOEC for embryo culture was detected by RT-PCR. While EGF gene was detected in isolated fresh cells (IFC) and PCC, TGF-${\beta}$ and IGFBP were found in IFC or PCC after use in the embryo culture, respectively. Caspase-3 and Bax genes were detected in all experimental groups regardless of whether the BOEC was used or not used in the embryo culture. However, p53 gene was found in IFC of both conditions for embryo culture and in frozen/thawed culture cells (FPCC) after use in the embryo culture. Although antioxidant genes examined were detected in all experimental groups before using for the embryo culture, these genes were not detected after use. This study indicated that the BOEC co-culture system used for in vitro culture of bovine IVF embryos can increase the developmental rates, and cell generations and status of BOEC might affect the in vitro development of bovine embryos. The BOEC monolayer used in the embryo culture did not express the growth factors (TGF-${\beta}$ and EGF) and enzymatic antioxidant genes, thereby improving embryo development in vitro.
본 연구는 체외에서 소 난포란유래의 배반포 생산에 있어서 배지 내에 첨가하는 외인성 고정질소 원으로써 아미노산과 FBS의 첨가효과를 검토하였다. 소 난포란의 체외성숙은 TCM-l99용액, 체외 수정은 Fer-TALP용액으로 행하였으며, 체외수정후 24시간째(day 1)의 수정난자를 체외배양에 제공하였다. 체외배양용 기초배지는 YS용액, 기초 배양법은 25개 난자/10 ${\mu}\ell$ 배지의 단순.미소적배양법을 이용하였다. 본 연구의 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 체외 수정란의 배양에 있어서 비필수 아미노산(MEM 유래) 첨가가 무첨가군보다 높은 배반포 발달율을 나타냈다. 2. 체외 수정란의 배양에 있어서 필수 아미노산(RPMI 1640 유래) 첨가가 무첨가군보다 유의하게 높은 배반포 발달율을 나타냈다. (P<0.05) 3. Day 1에 비 필수 아미노산, day 5에 필수 아미노산을 첨가하였을 경우 부화 배반포로의 발생율 및 배반포로의 부화율을 향상시켰다. 4. Day 1에 비필수.필수 아미노산을 첨가한 후 day 3, day 4, day 5에 각각 필수 아미노산만을 배지로부터 제거 시 배반포의 부화율은 현저하게 낮았다. 5. FBS의 첨가시기는 배양 후기(day 5)에 첨가할 수록 배반포율 또는 부화 배반포율이 유의하게 상승하였다(p<0.05). 이상의 결과에서 소 난포란 유래 배반포의 체외생산에 있어서 배지에 첨가하는 외인성 고정 질소 원들의 첨가에 있어서 첨가시기 및 농도를 조절함으로써 양질의 배반포 생산을 향상시킬 수 있는 것으로 사료된다.
Kim, Dong-Hee;Chun, Ju Lan;Lee, Ji Hye;Kim, Keun Jung;Kim, Eun Young;Lee, Bo Myeong;Zhuang, Lili;Kim, Min Kyu
농업과학연구
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제43권1호
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pp.52-60
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2016
In animal reproduction, the quality of oocytes and embryos has been evaluated by the expression of specific molecules. Follistatin (FST), which was isolated from follicular fluid, binds and bio-neutralizes the TGF-${\beta}$ superfamily members. Previous studies using the bovine model showed FST could be an important molecular determinant of embryo developmental competence. However, the effect of FST treatment on porcine embryo developmental competence has not been established. In this study, the effect of exogenous FST on porcine embryo developmental competence was investigated during in vitro culture. FST (10 ng/ml) treatment induced a significant decrease in the rate of cell arrest at the 4-cell stage. The expression levels of DNA-methyltransferase 1 (DNMT1), histone deacetylase 1 (HDAC1), and histone deacetylase 2 (HDAC2) were decreased in 4-cell stage embryos. FST treatment also resulted in significant improvements in developmental competence of embryos in terms of blastocyst formation rate and OCT-4 mRNA levels, the latter being related to pluripotency. In conclusion, during in vitro culture, FST treatment significantly ameliorated 4-cell block during embryonic development and improved embryo developmental competence. Therefore, FST treatment may potentially have a functional role in porcine embryogenesis that is broadly applicable to enhance in vitro embryo development.
International Journal of Advanced Culture Technology
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제9권3호
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pp.188-201
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2021
The purpose of this study is to analyze the effects of online home learning in connection with extracurricular activities for lifelong education for the disabled in university on the cooking aids skills of cafeterias for the job search persons with developmental disabilities. Three people with job search developmental disabilities who have been in a state of unemployment for three years after graduating from a special high school course participated in the experiment. In order to verify the meaningful functional relationship between independent variables and dependent variables, multiple probe design across subjects, one of the main techniques of a single object study, was used. The experimental conditions according to the research design consisted of the steps of baseline, intervention, maintenance, and generalization. The dependent variable of this study is the restaurant cooking aid skills in the cafeteria, and three subskills such as side dish arrangement, sink arrangement, and dish washing were combined by task analysis. And the independent variable of this study was composed of procedures and methods to teach the environment, tools and materials related to the performance of dependent variables to the developmental disabled people at home by using real-time image technique through zoom service, and the contents of the performance by stages of task analysis. In addition, independent variables were applied to the subjects in the course of the extracurricular activities with the theme and contents of lifelong education for the disabled at university. Students who completed the above extracurricular activities practiced the intervention scene of the researcher through the screen sharing of zoom service. As a result, the subjects with developmental disabilities effectively acquired and maintained the positive response performance of dependent variables through independent variables. The subjects also showed high positive responses to generalization tests conducted in kitchens in cafeterias located elsewhere in the same university.
본 연구는 국내 학술 등재지 및 학위논문에 게재된 발달장애인의 자기옹호 연구의 일반적 특성 및 효과 크기, 질적 지표를 분석하는 데 그 목적이 있다. 이를 위하여 2000년부터 2023년까지 발표된 자기옹호 관련 논문 총 2153 편 중 발달장애인을 키워드로 한 연구 41편을 선정하여 구체적인 연구 결과는 다음과 같다. 본 연구의 결과를 바탕으로 발달장애인의 자기옹호 관련 언어중재 프로그램을 개발할 때에는 청소년 및 성인, 또는 전환기 시기에 20-30명이 있는 학습상황에서 10-19회기수를 기준으로 중재프로그램이 개발되기를 권고하며, 특수교육, 통합교육 등 교육적 차원에서만 국한된 연구가 많은데 이를 적용하여 의사소통에 어려움을 겪고 자기주장, 자기권리를 효과적이고 세련되게 주장할 수 있는 언어재활 차원에서의 자기옹호 언어 중재 프로그램이 개발되기를 기대한다.
연구의 목적은 문화예술교육 프로그램이 장애 청소년에게 미치는 영향을 알아보는 데 있다. 문화예술교육 프로그램 중 공예교육활동으로 구성하였으며 다학문간 융합교육을 지향하였다. 본 연구의 실행을 위해 고등학교 특수학급에 재학 중인 발달장애 청소년 7명을 대상으로 교육회기 이후 한 달간 심층인터뷰를 실시하였으며 연구결과는 다음과 같이 도출되었다. 첫째 일반학급에서는 경험하기 힘들었던 학문의 즐거움과 유쾌함, 흥미를 보였다. 둘째, 수업참여의 긴장감이 완화되며 교육활동을 통해 편안함을 느끼며, 공예교육에 대해 긍정적인 태도를 보였다. 셋째, 사회 정서적 영역에서는 협동 활동을 통한 함께 있음, 공존의 느낌을 받았으며, 친구와 교사로부터 지지와 도움의 경험을 하게 되었다. 넷째, 교육활동을 통해 자신의 생각을 나누고, 친구들의 이야기를 경청하고 함께 만들어낸 작품에 대해 이야기 하며 친밀한 관계의 경험을 나눌 수 있었다.
Kim, J.T.;Jang, H.Y.;Park, C.K.;Cheong, H.T.;Park, I.C.;Yang, B.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제24권2호
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pp.190-197
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2011
The objective of the present study was to elucidate the fundamental mechanism of bovine oviduct epithelial cell (BOEC) co-culture on developmental capacity of bovine IVM/IVF embryos and to determine whether or not melatonin acts as an antioxidant in BOEC culture and subsequent embryo development. These studies examined the effects of melatonin against NO-induced oxidative stress on cell viability, lipid peroxidation (LPO) and the expression of antioxidant genes (CuZnSOD, MnSOD and Catalase) or apoptosis genes (Bcl-2, Caspase-3 and Bax) during BOECs culture. We also evaluated the developmental rates of bovine IVM/IVF embryos with BOEC co-culture, which were pre-treated with melatonin ($1,000\;{\mu}M$) in the presence or absence of sodium nitroprusside (SNP, $1,000\;{\mu}M$) for 24 h. Cell viability in BOECs treated with SNP (50-$2,000\;{\mu}M$) decreased while melatonin addition (1-$1,000\;{\mu}M$) increased viability in a dose-dependent manner. Cell viability in melatonin plus SNP ($1,000\;{\mu}M$) gradually recovered according to increasing melatonin addition (1-$1,000\;{\mu}M$). The LPO products were measured by thiobarbituric acid (TBA) reaction for malondialdehyde (MDA). Addition of melatonin in BOEC culture indicated a dose-dependent decrease of MDA, and in the SNP group among BOECs treated with SNP or melatonin plus SNP groups MDA was significantly increased compared with SNP plus melatonin groups (p<0.05). In expression of apoptosis or antioxidant genes detected by RT-PCR, Bcl-2 and antioxidant genes were detected in melatonin or melatonin plus SNP groups, while Caspase-3 and Bax genes were only found in the SNP group. When bovine IVM/IVF embryos were cultured for 6-7 days under the BOEC co-culture system pre-treated with melatonin in the presence or absence of SNP, the highest developmental ability to blastocysts was obtained in the $1,000\;{\mu}M$ melatonin group. These results suggest that melatonin has an anti-oxidative effect against NO-induced oxidative stress on cell viability of BOECs and on the developmental competence of bovine IVM/IVF embryo co-culture with BOEC.
본 연구는 급변하는 환경 속에서 조직의 생존과 조직성과를 향상시키기 위하여 학습조직을 통한 조직유효성의 증대를 추구하기 위해 학습조직의 선행요인으로 조직문화를 선정하여 검증하였다. 분석결과 첫째, 학습조직수준이 높을수록 직무만족은 높게 나타났는데, 조직학습을 통한 학습조직수준의 향상으로 축적된 경험과 지식을 바탕으로 직무를 수행하기 때문에 직무만족을 증가시키는 것이다. 둘째, 학습조직수준향상에 조직문화 중 변화지향문화, 과업지향문화가 유의한 영향을 미치며, 관계지향문화, 위계지향문화는 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 그러므로 조직학습을 통한 학습조직수준을 향상하기 위해서는 변화지향 문화와 과업지향문화의 특성을 고려하여야 새로운 조직으로의 조직변화가 있을 때 조직유효성이 크게 나타남을 의미한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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