• 한국응용곤충학회지
• /
• 제29권2호
• /
• pp.132-135
• /
• 1990

Anopheles quadrimaculatus( Say) 자매종 간의 미토콘드리아 DNA의 제한효소 절단부위변이를 Aedes albopictus의 마토콘드리아 cDNA를 probe로 이용하여 조사하였다. DNA hybridization에 의해 두 속간에는 mtDNA 영기서열의 상당한 상동성이 있음을 알 수 있었다. 개체 모기로부터 분리한 DNA를 제한효소를 사용하여 절단한 결과 자매종간에 다른 양상을 볼 수 있었으며 Hind III에 의한 mtDNA 절편만으로도 자매종들을 동정할 수 있었다.

• Journal of Microbiology
• /
• 제39권1호
• /
• pp.11-16
• /
• 2001

Tentative identification of Leuconostoc lactis IH23 isolated from kimchi (a fermented vegetable product) has been described previously with 16S rDNA sequencing (Choi, 1., M. Sc. Thesis Inha Univ.1999). This strain produced the slime identified as dextran based on IR, $\^$13/C- and $^1$H-NMR spectroscopic results. Further study proved that the isolate IH23 belongs to a homogeneous genetic group with L. lactis DSM 20202$\^$T/ and L. argentinum DSM 8581$\^$T/. The results showed DNA-DNA homology of 99-100%, 16S rDNA gene sequence similarity (97.7% ), and a phylogenetic relationship although L. argentinum DSM 8581$\^$T/ had lower homology (80-91%). These data indicate that L. argentinum DSM 8581$\^$T/ and the isolate IH23 belong to an identical species with L. lactis DSM 20202$\^$T/at the genetic level, although in carbohydrate fermentation, the isolate IH23 was mast closely related to L. argentinum DSM 8581$\^$T/ and quite different from L. lactis DSM 20202$\^$T/. Here we first report the isolation of consistent phenotypic variation in Leuconostoc lactis. We also emphasize that the nomenclature of subspecies needs to be differentiated into the three strains mentioned above in Leuconostoc lactis.

• BMB Reports
• /
• 제50권1호
• /
• pp.20-24
• /
• 2017

Clustered regularly-interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is a new and effective genetic editing tool. CRISPR was initially found in bacteria to protect it from virus invasions. In the first step, specific DNA strands of virus are identified by guide RNA that is composed of crRNA and tracrRNA. Then RNAse III is required for producing crRNA from pre-crRNA. In The second step, a crRNA:tracrRNA:Cas9 complex guides RNase III to cleave target DNA. After cleavage of DNA by CRISPR-Cas9, DNA can be fixed by Non-Homologous End Joining (NHEJ) and Homology Directed Repair (HDR). Whereas NHEJ is simple and random, HDR is much more complex and accurate. Gene editing by CRISPR is able to be applied to various biological field such as agriculture and treating genetic diseases in human.

• 생명과학회지
• /
• 제11권5호
• /
• pp.423-431
• /
• 2001

Agrobacterium에 의한 식물형질전환은 가장 일반적으로 많은 사용되는 식물형질전환 기술이냐 이 과정에서 관여하는 식물 유전자들에 대한 관여하는 식물 유전자들에게 대한 연구는 거의 전무한 상태다. 본 연구는 Agrobacterium의 감염에 저항성을 보이는 새로운 돌연변이들의 분리와 분석 연구에 연속하여 Agrobacterium에 의한 식물형질전환에 관여하는 Arabidopsis RAT3 유전자의 cDNA와 gemonic clone을 plasmid rescue 기술을 이용하여 분리하였다. 염기서열 분석결과, 매우 유사한 2개의 유전자가 (RAT3-1과 RAT3-2)약 600bp 간격을 두고 연속하여 존재함을 밝혔다. 그중 RAT3-1 이 mutagen으로 사용된 T-DNA에 의해 손상을 받아 rat3 돌연변이 형질이 유도되었다. RAT3 유전자의 단백질의 분자량은 15 kDa 정도이며 아미노 밀단에 분비를 위한 signal peptide를 가지며 단백질이 전체적인 매우 친수성인 것으로 미루어 세포막 밖으로 분비될 것으로 생각된다. 이들 유전자의 정확한 생물학적 기능에 대한 연구들이 수행 중이며, 이러한 기초연구는 식물형질전환 기술의 개발에 기여할 것이다.

• 한국치위생학회지
• /
• 제6권4호
• /
• pp.311-324
• /
• 2006

The purpose of this investigation was to evaluate of the specificity of Fusobacterium nucleatum subspecies-specific DNA probes using dot blot hybridization. To confirm whether the clinical isolates were F. nucleatum or not, 16S rDNA of them were cloned and sequenced. The sequencing data were used in homology search with database of GenBank. When the homology was above 98% compared with the nucleotide sequence of a certain bacteria, it was judged as the same species with the bacteria. 23 strains of F. nucleatum were isolates from subgingival plaque of periodontitis patient. The clinical isolates of F. nucleatum were classified into 10 groups using phylogenetic analysis of 16S rDNA sequence. F. nucleatum subspecies nucleatum-specific DNA probe Fu4(1.3 kb) reacted with genomic DNAs from 8 type strains of F. nucleatum and it reacted strongly with those from 8 clinical isolates. The Fp4(0.8 kb) reacted with F. nucleatum subsp. polymorphum ATCC 10953 and one clinical isolates. Fv35(1.9 kb) and Fs17(8.2 kb) probes reacted with genomic DNAs from F. nucleatum subsp. vincentii ATCC 49256 and F. nucleatum subsp. fusiform ATCC 51190, respectively. Our results showed that it is not enough to evaluate the specificity of F. nucleatum subspecies-specific DNA probes with only dot blot hybridization. Therefore, Southern blot analysis will be necessary to confirm the specificity of F. nucleatum subspecies-specific DNA probes.

• 식물조직배양학회지
• /
• 제24권2호
• /
• pp.93-97
• /
• 1997

Linoleic acid를 linolenic acid로 전환시키는 지방산불포화효소의 유전자(fad3)를 유채의 fad3 DNA probe를 이용한 plaque hybridization방법으로 $\lambda$ZAPII Arabidopsis thaliana cDNA expression library로부터 분리하였으며 1.8 kb-EcoRI DNA조각을 지니는 lambda clone을 pGEM7으로 subcloning하여 염기서열을 분석하였다. 그 결과로부터의 아미노산서열분석에 의하면 fad3 유전자는 open reading frame이 386개의 아미노산으로 이루어졌으며 44,075 Da의 분자량이 예측되고 있다. 엽록체의 $\omega$-3 지방산불포화효소(fad7)와 endoplasmic reticulum의 지방산불포화효소(fad2)와의 비교시 각각 70%와 58%의 유사성이 나타났다. 특히 82-151의 아미노산서열과 276-333의 아미노산지역은 보존성이 높았으며 이는 불포화지방산효소의 기능에 필수적인 지역으로 보여진다. 한편 대장균을 이용한 IPTG에 의한 Fad3단백질의 유도생성은 대장균의 생육에 독성효과를 나타내는 것으로 나타났다.

• BMB Reports
• /
• 제31권5호
• /
• pp.498-502
• /
• 1998

HBV polymerase shares several regions of amino acid homology with other DNA-directed and RNA-directed polymerases. The amino acid residues $Asp^{429}$, $Gly^{518}$, $Asp^{551}$, $Lys^{585}$, and $Gly^{641}$ in the conserved motifs A, B', C, D, and E in the polymerase domain of HBV polymerase were mutated to alanine or histidine by in vitro site-directed mutagenesis. Those mutants were overexpressed, purified, and analyzed against DNA-dependent DNA polymerase activity and affinity for DNA binding. All those mutants did not show DNA-dependent DNA polymerase activities indicating that those five amino acid residues are all critical in DNA polymerase activity. South-Western analysis shows that amino acid residues $ASp^{429}$ and $ASp^{551}$ are essential to DNA binding, and $Gly^{318}$ and $Gly^{585}$ also affect DNA binding to a certain extent.

• 한국균학회지
• /
• 제25권1호통권80호
• /
• pp.46-67
• /
• 1997

1985년부터 1993년까지 장원도 일대에서 채집한 20균주와 외부에서 분양 받은 6균주를 대상으로 교배실험, PCR-RFLP 분석, 그리고 RAPD분석을 통해 상호 유연 관계를 알고자 하였다. 교배실험에서는 A. gallica 6균주, A. ostoyae 5균주, A. tabescens 2균주만이 친화성을 나타내었다. A8(KNU-250)균주는 A. gallica와 A. ostoyae에 모두 친화성을 나타내어 배양적 특징과 유사한 결과가 나타났다. rDNA의 IGS영역의 PCR-RFLP분석에서 A. mellea와 A. ostoyae 각 균주들 간의 유사도는 1.000으로 100%의 상동성을 보여주었다. A. tabescens는 $0.919{\sim}0.974$로 높은 유사성을 나타냈다. A. gallica는 $0.619{\sim}1.000$의 유사도로 나타났다. A19와 A22균주는 고립된 한 집단으로 나타났으며 유사도는 1.000으로 100% 상동성을 보였고, 다른 집단과의 유사도가 $0.051{\sim}0.108$로 10% 미만의 상동성을 나타내고 있다. RAPD분석을 통한 A. mellea의 유사도는 $0.983{\sim}1.000$으로 상동성이 높게 나타났으며, A. ostoyae도 $0.994{\sim}1.000$으로 높은 상동성을 보여 주었다. A. tabescens의 균주간의 유사도는 $0.594{\sim}0.953$으로 나타났으며, A. gallica는 $0.280{\sim}0.733$의 유사도를 나타내 균주간의 변이가 나타난 것으로 생각된다. 특히, A19, A22균주가 다른 집단과 거리가 먼 한 집단으로 나타났는데 그들 간의 유사도는 0.921로 92%의 상동성을 보였고, 다른 4개 집단과의 유사도가 $0.012{\sim}0.069$로 7% 미만의 상동성을 나타내고 있다. 본 실험에서 분류된 Armillaria속균은 5종으로 4종은 각각 이미 알려진 종으로 A. mellea, A. ostoyae, A. tabescens, A. gallica로 동정되었고 남은 1종은 미기록종이라고 생각된다.

• BMB Reports
• /
• 제29권3호
• /
• pp.272-275
• /
• 1996

The expression of genes induced by Dichloroacetate (DCA) treatment was analyzed by mRNA differential display. Purified total RNAs from rat liver treated with saline or DCA (100 mg/100 g b.w.) were reverse transcribed by using a set of oligonucleotide primers. The PCR products were resolved on a denaturing sequencing gel. PCR band representing mRNA expressed specifically in DCA-treated liver was excised and reamplified by PCR. A 120-bp c-DNA clone named IC1 was isolated and the DNA sequence of IC1 was analyzed. IC1 revealed 50% homology with 3' end of a mouse fibroblast growth factor mRNA This result indicates that DCA induces the expression of a gene which has a 50% homology with a Mouse fibroblast growth factor, and expression of this gene might be involved in non genotoxic process caused by DCA.

• Interdisciplinary Bio Central
• /
• 제5권2호
• /
• pp.5.1-5.3
• /
• 2013

Introduced were two biological investigations in which information biology played a significant role. In the first case independent findings in cancer research over a long period were united and organized by information biology and led to the outcome that was subject to a Nobel Prize. The outcome has revealed that the cause of human cancer is located in the genome in a dormant condition. The second case shows how to elucidate the function of an unknown DNA sequence or ORF in prokaryotes by a large - scale computer homology search and analyses. For the elucidation the International DNA Databases and a large - scale computer were two key factors.