Inosine monophosphate dehydrogenase(IMPDH) catalyzes the $NAD^+$-dependent oxidation of IMP to XMP, the rate limiting step in the de novo biosynthesis of guanine nucleotide. Its critical role at the metabolic branch point in purine nucleotide biosynthesis makes it a useful target in the development of drugs for antiviral and anticancer chemotherapy and in immunosupressant area. Several compound with antiviral activity have been found to be inhibitors of IMPDH. For example, ribavirin, a competitive inhibitor of IMPDH, has broad spectrum antiviral activities against DNA and RNA viruses. (omitted)
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2003.05a
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pp.83-86
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2003
Major advances in positive-sense RNA virus research have been facilitated by the development of reverse genetics systems. These systems consist of an infectious cDNA clone that encompasses the genome of the virus in question. This clone is then used as a template for the subsequent synthesis of infectious RNA for the generation of synthetic viruses. However, the construction of infectious cDNA for the Japanese encephalitis virus (JEV) has been repeatedly thwarted by the instability of its cDNA. As JEV is an important human pathogen that causes permanent neuropsychiatric sequelae and even fatal disease, a reliable reverse genetics system for this virus is highly desirable. The availability of this tool would greatly and the development of effective vaccines as well as facilitate studies into the basic biology of the virus, including the molecular mechanisms of viral replication, neurovirulence, and pathogenesis. We have successfully constructed a genetically stable infectious JEV cDNA containing full-length viral RNA genome. Synthetic RNA transcripts generated in vitro from the cDNA were highly infectious upon transfection into susceptible cells, and the cDNA remained stable after it had been propagated in E. coli for 180 generations. Using this infectious JEV cDNA, we have successfully expressed a variety of reporter genes from the full-length genomic and various subgenomic RNAs in vitro transcribed from functional JEV cDNAS. In summary, we have developed a reverse genetics system for JEV that will greatly facilitate the research on this virus in a variety of different fields. It will also be useful as a heterologous gene expression vector and aid the development of a vaccine against JEV.
The advantages of replicon vectors of RNA viruses include a high ability to stimulate innate immunity and exponential amplification of target mRNA leading to high expression of foreign antigens. The present study aimed to construct a DNA-layered nervous necrosis virus (NNV) replicon vector system in which the capsid protein gene was replaced with a foreign antigen gene and to compare the efficiency of foreign antigen expression between the conventional DNA vaccine vector and the present replicon vector. We presented the first report of a nodavirus DNA replicon-based foreign antigen expression system. Instead of a two-vector system, we devised a one-vector system containing both an NNV RNA-dependent RNA polymerase cassette and a foreign antigen-expressing cassette. This single-vector approach circumvents the issue of low foreign protein expression associated with the low co-transfection efficiency of a two-vector system. Cells transfected with a vector harboring hammerhead ribozyme-fused RNA1 and RNA2 (with the capsid gene ORF replaced with VHSV glycoprotein ORF) exhibited significantly higher transcription of the VHSV glycoprotein gene compared to cells transfected with either a vector without hammerhead ribozyme or a conventional DNA vaccine vector expressing the VHSV glycoprotein. Furthermore, the transcription level of the VHSV glycoprotein in cells transfected with a vector harboring hammerhead ribozyme-fused RNA1 and RNA2 showed a significant increase over time. These results suggest that NNV genome-based DNA replicon vectors have the potential to induce stronger and longer expression of target antigens compared to conventional DNA vaccine vectors.
Porcine circoviruses(PCV) are the smallest nonenveloped DNA viruses containing a unique single-stranded circular genome. No recognized link was found between PCV infection of pig and disease. But the PCV consistently identified from postweaning multisystemic wasting syndrome(PMWS) and researches indicate that there are strong relationships between PCV and PMWS. Clinical signs were emaciation, dyspnea, high fever with normal appetite. Necropsy findings showed respiratory disease complex lesion and lymph node anomalities. An indirect-immunofluorescent antibody procedure was used to assay swine sera for the presence of PCV atibodies. Antibodies against PCV were found in an average of 20% of the samples tested. The PCV DNA was amplified from lymph nodes collected from pigs. PCV specific primers were successfully amplified PCV DNAs. Further studies are needed to determine the possible role this virus might have in disease.
Due to the broad host suitability of viral vectors and their high gene delivery capacity, many researchers are focusing on viral vector-mediated gene therapy. Among the retroviruses, foamy viruses have been considered potential gene therapy vectors because of their non-pathogenicity. To date, the prototype foamy virus is the only retrovirus that has a high-resolution structure of intasomes, nucleoprotein complexes formed by integrase, and viral DNA. The integration of viral DNA into the host chromosome is an essential step for viral vector development. This process is mediated by virally encoded integrase, which catalyzes unique chemical reactions. Additionally, recent studies on foamy virus integrase elucidated the catalytic functions of its three distinct domains and their effect on viral pathogenicity. This review focuses on recent advancements in biochemical, structural, and functional studies of foamy virus integrase for gene therapy vector research.
HPV viruses are integral to the development of cervical cancer. The pathogenesis has been extensively studied. To date, numerous HPV tests and products have been developed and successfully utilized in diagnosis, treatment and prevention of cervical cancer. The HPV DNA test, when combined with other routine cervical cancer screening and diagnostic tests namely exfoliative cytology, visual inspection with acetic acid (VIA) and colposcopy has increased the detection rate of cervical cancer. HPV DNA products could also be measured in other body fluids like urine, lymph node tissue, and serum. HPV association could also be quantified by measuring other parameters like HPV mRNA, viral load, viral integration and methylation status. Vaccination against HPV has been found to decrease the incidence of cervical cancer. Further, therapeutic vaccines for cervical cancer against HPV continue to evolve. All these findings pertaining to HPV could possibly decrease the incidence of cervical cancer in the near future. This review aims to give an overview of the HPV tests and products in use and those under trial currently.
The present study attempted to apply polymerase chain reaction (PCR) to develop a rapid differential diagnosis among Marek's disease, reticuloendotheliosis and avian leukosis. The primers chosen to detect Marek's disease virus (MDV) flank the 132bp tandem direct repeat of the MDV genome. The primers selected for reticuloendotheliosis virus (REV) and avian leukosis virus (ALV) are based on proviral long terminal repeats of spleen necrosis virus and Rous-associated virus-2 genomes, respectively. The specific PCR products of MDV, REV and ALV were observed with each primer and the reaction was not cross-reacted among the viruses. MDV-specific DNA was also amplified from the MDV-induced lymphoma (MDCC-MSB1) but not from the REV-induced tumor and ALV-induced lymphoma (LSCC-1104B1). In addition, proviral DNA of REV from REV-induced tumor and proviral DNA of ALV from ALV-induced lymphoma were also amplified by REV-specific and ALV-specific PCRs, respectively. Therefore these three PCR methods may be used to rapidly differentiate among MDV, REV and ALV-associated tumors in diagnosis.
Sweet cherry is an important fruit crop with increasing economical value in Turkey and the world. A number of viruses cause diseases and economical losses in sweet cherry. Prune dwarf virus (PDV), is one of the most common viruses of stone fruits including sweet cherry in the world. In this study, PDV was detected from 316 of 521 sweet cherry samples collected from 142 orchards in 10 districts of Isparta province of Turkey by double antibody sandwich-enzyme linked immunosorbent assay (DAS-ELISA). The presence of PDV in ELISA positive samples was confirmed in 37 isolates by reverse transcription- polymerase chain reaction (RT-PCR) method. A genomic region of 862 bp containing the coat protein (CP) gene of PDV was re-amplified from 21 selected isolates by RT-PCR. Amplified DNA fragments of these isolates were purified and sequenced for molecular characterization and determining genetic diversity of PDV. Sequence comparisons showed 84-99% to 81-100% sequence identity at nucleotide and amino acid level, respectively, of the CP genes of PDV isolates from Isparta and other parts of the world. Phylogenetic analyses of the CP genes of PDV isolates from different geographical origins and diverse hosts revealed that PDV isolates formed different phylogenetic groups. While isolates were not grouped solely based on their geographical origins or hosts, some association between phylogenetic groups and geographical origins or hosts were observed.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.3
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pp.316-322
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2014
Recently, a Cucumber mosaic virus (CMV) strain, named as CMV-209, was isolated from Glycine soja. In this study, symptom expression of CMV-209 was analyzed in detail in Nicotiana benthamiana by comparing with that of CMV-Fny, which is a representative strain of CMV. Using infectious cDNA clones of CMV strains 209 and Fny, symptom expression of various pseudorecombinants between these two strains were examined in the early and late infection stages. In the early infection stage, the pseudorecombinants containing Fny-RNA2 induced stunting and leaf distortion on the newly emerged leaves whereas the pseudorecombinants containing 209-RNA2 caused no obvious symptoms. In the late infection stage, the pseudorecombinants containing 209-RNA1 and Fny-RNA2 induced severe leaf distortion and stunting, while CMV-209 induced mild symptom and CMV-Fny caused typical mosaic, general stunting, and leaf distortion symptoms, indicating that RNA 2 encodes a symptom determinant(s) of CMV, which is capable of enhancing symptoms. Furthermore, our results support the possibility that natural recombination between compatible viruses can result in emergence of novel viruses causing severe damages in crop fields.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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