우리는 549명의 여성을 대상으로 HPV DNA Chip을 이용하여 자궁경부암의 주요 원인인 HPV 감염률을 조사하고 Pap 도말 염색법을 이용한 세포학적 검사를 실시하였다. 전체 대상여성 549명 중 237명 HPV DNA Chip 검사에서 양성 이었다(43.17%). 237명 중 203명이 고위험군 HPV 아형에 감염되었고(88.61%, 고위험군), 17명이 저위험군 HPV 아형에 감염되었고(7.17%, 저위험군), 나머지 17명은 고위험군 아형, 저위험군 아형, 미확인 아형에 감염 되었다(7.17%, 혼합형). 연령별 감염률은 20대가 1.26%, 30대 15.61%,40대 31.65%, 50대 23.21%, 60대 이상이 13.92%으로 확인되었다. 저위험군과 혼합군에서 고위험군보다 HPV 감염의 빈도가 더 낮게 나타났다. 세포학적 진단결과(224명의 여성)와 HPV chip 양성(237명의 여성)여성 간의 비교에서 고위험군의 경우 194명중 132명(68.04%)이 ASCUS (atypical squamous cells of undetermined significance, 7.22%), LSIL (low grade squamous intraepithelial lesion, 15.98%), HSIL (high grade SIL, 23.20%), 자궁경부암(21.65%) 등과 같은 자궁경부질환이 있었다. 저위험군(224 여성 중 14명)의 경우 ASCUS 1예와 LSIL 6예였는데 비해 혼합군(224 여성 중 4명)의 경우에는 단지 2예의 ASCUS 만이 있었다. 고위험 HPV 아형16 및 18에 감염된 여성은 각각 26예 및 7예의 자궁경부암이 있었으나 저위험군 HPV 아형 및 기타 아형의 경우 자궁경부암 발생이 매우 낮거나 없었다. 결론적으로 본 연구에서 43.17%의 HPV 유병률을 보였고 고위험 HPV 아형16이 감염된 여성들에 있어 전암 병변 또는 자궁경부암의 원인이 되는 주요인자이며 HPV DNA chip 검사는 HPV 감염 유무를 진단하는 정밀하고 유용한 방법임을 시사하고 있다.
We propose glass and PDMS (polydimethylsiloxane) chips for DNA amplification with continuous-flow PCR (polymerase chain reaction). The PDMS microchannel was fabricated using a negative molding method for sample injection. Three heaters and sensors of ITO (indium-tin-oxide) thin films were fabricated on glass chip. ITO heaters and sensors were calibrated accurately for the temperature control of the liquid flow. ITO heater generated stable heat versus applied power. ITO sensor resistance was changed linearly versus temperature increase as a RTD (resistance temperature detector) sensor. As a result, we enable precision temperature control of continuous-flow PCR chip. Using the continuous-flow PCR chip DNA plasmid pKS-GFP 720 bp was successfully amplified.
This study exploits the robot system which is necessary in gene study and bio-technology industry. As well, a DNA chip, which of use has been increased recently, can be manufactured with this system. The robot consists of a device spotting DNA on the silylated slide, a well plate, a bed for fixing well plates, devices of washing and drying the pin in DNA spotting .device, a distillation-water vessel, and a discharge vessel of wash water. We made the period of sticking DNA to the pin on the well plate to be 15 seconds. The spot size of DNA was set to be 0.28 mm on the average by bringing the slide into contact with pin during 1 second. If DNA is spotted in minimum space possible about 0.32mm, this system can stick about 8,100 DNA spots on the well plate with this rate. Analyzing the procedure: Movement starts, Pin washes, dries, and smears DNA on the well plate. Spotting DNA onto 12 chips took 2 minutes and 50 seconds.
한국전기전자재료학회 2006년도 영호남 합동 학술대회 및 춘계학술대회 논문집 센서 박막 기술교육
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pp.65-70
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2006
In this study, a DNA chip with a microelectrode array was fabricated using microfabrication technology. Several probe DNAs consisting of mercaptohexyl moiety at their 5 end were immobilized on the gold electrodes by DNA arrayer. Then target DNAs were hybridized and reacted with Hoechst 33258, which is a DNA minor groove binder and electrochemically active dye. Linear sweep voltammetry or cyclic voltammetry showed a difference between target DNA and control DNA in the anodic peak current values. It was derived from Hoechst 33258 concentrated at the electrode surface through association with formed hybrid. It suggested that this DNA chip could recognize the sequence specific genes.
Kim, Jung-Min;Lim, Su-Jin;Kim, SoMin;Kim, MoonJung;Kim, ByoungHee;Tai, Truong A;Kim, Seonmi;Yoon, ByoungSu
Journal of Veterinary Science
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제21권1호
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pp.4.1-4.9
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2020
Fast and accurate detection of viral RNA pathogens is important in apiculture. A polymerase chain reaction (PCR)-based detection method has been developed, which is simple, specific, and sensitive. In this study, we rapidly (in 1 min) synthesized cDNA from the RNA of deformed wing virus (DWV)-infected bees (Apis mellifera), and then, within 10 min, amplified the target cDNA by ultra-rapid qPCR. The PCR products were hybridized to a DNA-chip for confirmation of target gene specificity. The results of this study suggest that our method might be a useful tool for detecting DWV, as well as for the diagnosis of RNA virus-mediated diseases on-site.
Kim, Chul Wook;Chang, Kyu Tae;Hong, Yeon Hee;Kwon, Eun Jung;Jung, Won Yong;Cho, Kwang Keun;Chung, Ki Hwa;Kim, Byeong Woo;Lee, Jung Gyu;Yeo, Jung-Sou;Kang, Yang Su;Joo, Young Kuk
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제18권7호
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pp.933-941
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2005
To develop a functional cDNA chip, specific genes expressed in the tissues of swine Kagoshima Berkshire were screened. A total of 4,434 ESTs were obtained by constructing a cDNA library from total RNA isolated from the muscle and fat tissues, affirming their functions by investigating similarity of nucleotide sequences with the database at the NCBI. Among them, 1,230 ESTs were confirmed as novel genes, which, to date, have not been identified. Attaching the genes to a cDNA microarray slide revealed expression patterns of genes in muscle and fat according to the growth stages of swine. As specific genes expressed in the muscle tissues of swine with body weight of 30 kg, 60 genes including actin, myosin, tropomysin, transfer RNA-trp synthetase, Kel-like protein 23, KIAA0182 and COI, Foocen-m, etc were obtained. In addition, 18 novel genes were obtained. As specific genes expressed in fat tissues of swine with body weight of 30 kg, 47 genes including annexin II, Collagen, Fibronectin, Pleckstrin homology domain, serine protease, etc were obtained. 21 novel genes were also obtained. The genes specifically expressed in the muscle and fat tissues of swine affect contraction and relaxation of the muscle and the fat. However, studies on the expression mechanisms of the genes are insufficient. To reveal species of structural genes in swine muscle and fat tissue, interrelation studies in expression and function of genes by using the cDNA chip should be conducted.
To establish a method to evaluate the quality of the printed microarray and DNA fragments' immobilization. The target gene fragments that were made with the restriction display PCR (RD-PCR) technique were printed on a superamine modified glass slide, then immobilized with UV cross-linking and heat. This chip was hybridized with universal primers that were labeled with cy3-dUTP, as well as cDNA that was labeled with cy3-dCTP, as the conventional protocol. Most of the target gene fragments on the chip showed positive signals, but the negative control showed no signal, and vice versa. We established a method that enables an effective evaluation of the quality of the microarrays.
The genome sequencing project has generated and will continue to generate enormous amounts of sequence data including 5 eukaryotic and about 60 prokaryotic genomes. Given this ever-increasing amounts of sequence information, new strategies are necessary to efficiently pursue the next phase of the genome project-the elucidation of gene expression patterns and gene product function on a whole genome scale. In order to assign functional information to the genome sequence, DNA chip(or gene microarray) technology was developed to efficiently identify the differential expression pattern of independent biological samples. DNA chip provides a new tool for genome expression analysis that may revolutionize many aspects of biotechnology including new drug discovery and disease diagnostics.
본 논문은 DNA microarray chip 을 사용한 실험 결과로 생산되는 대량의 데이터를 효율적으로 관리하기 위한 LIMS 개발에 대해 기술한다. 기존의 상용 LIMS 는 보편적 패턴과 방식을 정규화하여 제공하기 때문에 실험실의 고유한 방식을 포함하긴 어렵다. 본 논문에서는 유연성 있는 LIMS 를 개발하기 위해 특정 실험 중심으로 설계하면서 MAGE-OM 의 표준을 따르도록 디자인하였고, HYLIMS manager 라는 Local Application 과 검색을 주로 이용하는 사용자를 위하여 Web 검색 시스템을 구현하였다. 데이터베이스의 부하를 줄이기 위해 데이터 저장용 DB 와 검색용 DB 를 구분하였고, 데이터를 타입과 처리 형태에 따라 분류하여 관리하였으며 데이터 보안을 위해 실험 관리자가 사용자의 접근 제한을 설정 할 수 있도록 하였다.
There prevalence of $\beta$-lactamases bacteria in animals has been increased since 1990s [1]. The resistance in E coli which is mediated by $\beta$-lactamases hydrolyze the $\beta$-lactam ring eventually inactivate the antibiotics [2]. Generally, $\beta$-lactamases can be classified into four main groups and eight subgroups according to their functional and structural characteristics [3]. The detection of $\beta$-lactam antibiotic-resistant bacteria by DNA chip has been described [4]. The chip has a specific probe DNAs that contained the $\beta$-lactam antibiotic-resistant genes which was labeled by multiplex PCR reaction with a mixture of primer sets that were designed to amplify specific gene. Here we report the susceptibility of enteropathogenic E. coli isolated from pigs in Korea using the DNA chip in detecting $\beta$-lactam antibiotic-resistant genes. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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