Anthranilate synthase (AS)는 트립토판(Trp)과 indole-3-acetic acid, indole alkaloids의 생합성 경로에서 중요한 효소로 작용한다. 트립토판 생합성 상에서 feedback inhibition에 민감하게 반응하는 AS alpha-subunit 관련 OASA2 유전자 영역의 single (F124V) 및 double (S126F/L530D) 점돌연변이로 변형된 유전자의 재조합운반체를 작성하고 이들 유전자들을 Agrobacterium 방법으로 동진벼에 도입하여 형질전환체를 육성하였다. Single 및 double 돌연변이 OsASA2 유전자가 도입된 형질전환 벼 계통들은 nos gene probe를 이용한 TaqMan PCR 방법으로 single copy를 선발하였고, intergenic 계통을 선발하기 위해서 Bfa I 제한효소를 이용하여 RB와 LB 인접서열로부터 IPCR을 통한 FST 분석을 수행하여 4 개의 intergenic 계통을 선발하였다. 도입된 유전자의 발현으로 형질전환 벼는 Trp, IAN 및 IAA가 잎에 가장 많이 축적되었고, 종자의 트립토판 함량도 증가되었다. 후대에서 tryptophan 함량이 높은 S-TG와 D-TG의 두 호모 이벤트 계통을 육성하여 트립토판 함량을 분석한 결과 대조구에 비하여 13~30배 이상 높게 나타났으며, 유리아미노산의 함량도 증가하였다. 이벤트 계통을 이용하여 microarray 분석을 수행한 결과 세포 내 이온 수송, 영양분 공급 등에 영향을 주는 유전자군들이 up-regulation 되었고, 세포 내 기능유전자의 역할을 담당하는 조효소 등이 down-regulation 된 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과는 선발된 두개의 상동성 이벤트 계통들이 고함량의 유리 트립토판 생산 벼의 육종에 효과적으로 이용될 수 있음을 보여준 결과로 생각된다.
The effects of light on the regulation of ethylene biosynthesis during development of mung bean seedlings were investigated by monitoring the differential expression of seven 1-aminocyclopropane-l-carboxylate (ACC) synthase and two ACC oxidase genes. Among them, only the expression of VR-ACS1, VR-ACS6, VR-ACS7, VR-ACO1 and VR-AC02 was observable in etiolated mung bean hypocotyls. When the seedlings were de-etiolated for 1 d under a light/dark cycle of 16 h/8 h, the expression of VR-ACS6, VR-ACS7 and VR-ACO2 was controlled negatively by light. The expression of VR-ACS1 showed a tendency to increase until 6 h after a dark-to-light transition and then decreased at 12 h. On the other hand, the expression of VR-ACO1 was mostly constitutive up to 12 h after the dark-to-light transition. The opening of hypocotyl hooks during de-etiolation in the light was stimulated by the inhibition of the action of endogenous ethylene in the presence of 1-MCP. These results suggest that the negative regulation of light on the expression of ACC synthase and ACC oxidase genes eventually results in the inhibition of ethylene production with an acceleration of the opening of apical hooks.
Recoilless weapons, which lead strong back blast and impulse noise more than 160 dB, have been used in compliance with the regulation of the safety zone for the safe operations. However, the safety zone regulations for the newly developed weapons should be prepared since the existing guidelines do not provide any information concerning the reason for the safety zone. In this study, the outdoor launch tests were performed to collect the data such as noise, pressure and temperature of the back blast. An assessment method using data obtained from launch tests has been proposed to determine the safety zone. The safety zone has been determined with consideration for the following criteria: Impulse noise, temperature and pressure of the back blast and blast angle. As a results, new safety zones for them have been established for the recoilless weapon developed by ADD (Agency for Defense Development). We expect that this research can be used as a guideline for establishing a new safety zone regulation of similar weapon to be developed.
Epigenetic regulators like histone deacetylases (1 and 2), and viral onco-proteins (E6/E7) are known to be overexpressed in cervical cancer cells. The present study was designed to investigate the effect of curcumin on HDACs (1 and 2) and HPV E6/E7 in the cervical cancer cell line SiHa and a drug resistant clone $SiHa^R$ (derived from SiHa). It was further intended to investigate whether curcumin could sensitize the cells towards cisplatin induced cell killing by modulation of multi drug resistant proteins like MRP1 and Pgp1. Curcumin inhibited HDACs, HPV expression and differentially increased acetylation and up-regulation of p53 in SiHa and $SiHa^R$, leading to cell cycle arrest at G1-S phase. Up-regulation of pRb, p21, p27 and corresponding inhibition of cyclin D1 and CDK4 were observed. Cisplatin resistance in $SiHa^R$ due to over-expression of MRP1 and Pgp1 was overcome by curcumin. Curcumin also sensitized both the cervical cancer cells towards cisplatin induced cell killing. Inhibition of HDACs and HPVs led to cell cycle arrest at G1/S phase by alteration of cell cycle regulatory proteins. Suppression of MRP1 and Pgp1 by curcumin resulted in sensitization of cervical cancer cells, lowering the chemotherapeutic dose of the drug cisplatin.
In this study, we examined the expression of heat shock proteins (HSPs) in fish cell line CHSE-2lnl and human HeLa cells exposed to heat shock. In fish CHSE-214 cells HSP70 was the major polvpeptide induced by an elevated temperature or an amino acid analog, while in HeLa cells HSP90 as well as HSP70 were prominently enhanced in response to these stresses. Pretreatment of actinomvcin D prior to heat shock completely inhibited the induction of fish HSP70, indicating the transcriptional regulation of fish HSP70 gene expression. In HeLa and CHSE-214 cells either recovering from heat shock or experiencing prolonged heat shock, attenuation in the HSP90 a'nd HSP70 induction occurred but both induction and repression of HSP70 synthesis appear 19 precede those of HSP90. Moreover, attenuation did not occur in the syntheses of 40 kDa and 42 kOto proteins which were only induced in CHSE-214 cells. The enhanced syntheses of these he proteins continued as long as CHSE-214 cells were Siven heat shock. These results suggest that down-regulation of HSP syntheses during prolonged heat shock may be controlled by several different. as vet undefined, mechanisms.
In the paper of 'Natural Selection Favors AIs over Humans,' Dan Hendrycks applies principles of Darwinian evolution to forecast potential trajectories of AI development. He proposes that competitive pressures within corporate and military realms could lead to AI replacing human roles and exhibiting self-interested behaviors. However, such claims carry the risk of oversimplifying the complex issues of competition and natural selection without clear criteria for judging whether AI is selfish or altruistic, necessitating a more in-depth analysis and critique. Other studies, such as ''The Threat of AI and Our Response: The AI Charter of Ethics in South Korea,' offer diverse opinions on the natural selection of artificial intelligence, examining major threats that may arise from AI, including AI's value judgment and malicious use, and emphasizing the need for immediate discussions on social solutions. Such contemplation is not merely a technical issue but also significant from an ethical standpoint, requiring thoughtful consideration of how the development of AI harmonizes with human welfare and values. It is also essential to emphasize the importance of cooperation between artificial intelligence and humans. Hendrycks's work, while speculative, is supported by historical observations of inevitable evolution given the right conditions, and it prompts deep contemplation of these issues, setting the stage for future research focused on AI safety, regulation, and ethical considerations.
최근 우주 분야는 국내외적으로 국가 경제 및 안보의 중요한 요소로 자리 잡고 있다. 이러한 우주 분야의 발전을 위해서는 정책이 매우 중요한 역할을 수행해야 한다. 하지만, '우주 정책'에 대한 명확한 설명과 정의가 부족하여, 우주 정책에 참여하고자 하는 많은 연구자들이 어려움을 겪고 있다. 이에 본 논문에서는 '우주 정책'에 대해 정의를 내리고, '우주 정책'을 '우주 연구개발 정책', '우주 경제 정책', '우주 법·제도 정책', '우주 안보 정책', '우주 외교 정책'으로 구분하여 설명한다. 또한 각각의 우주 정책 분야의 중요한 요소가 무엇인지에 대해 분석한다. 복잡해지는 우주 분야와 같이 우주 정책도 다양한 관점에서의 접근이 필요한 시점이다. 본 논문을 통해 우주 정책 및 향후 주요 이슈에 대한 이해를 가질 수 있을 것이다.
The inhibitory effect of Chung-Jang-Hwan (C-mix) consisted of Geranium nepalense subsp. thunbergii, Saururus chinensis, and Rubus coreanus were investigated in dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitic mice by microarray analysis. Treatment with Cmix improved colitic symptoms, including colon shortening and myeloperoxidase activity. Treatment with DSS alone upregulated the expression levels of inflammation-related genes, including IL-$1\beta$, IL-6, CCL2, CCL4, CCL5, CCL7, CCL8, CCL24, CXCL1, CXCL2, CXCL5, CXCL9 and CXCL10, and other colitis-related genes such as COX-2, PAP, MMP family, S100a8, S100a9 and DEFA1 in mice. However, treatment with C-mix inhibited the expression levels of inflammation-associated genes induced by DSS. The increased expression levels of COX-2 and IL-$1\beta$, representative inflammatory genes, were confirmed by a quantitative realtime polymerase chain reaction analysis. These results indicate that C-mix may ameliorate colitis by the inhibitory regulation of inflammation-associated genes.
1 The present work was performed to investigate the effects of ginsenoside Rh2 on proliferation, cell cycle-regulation and differentiation of human leukemia HL-60 cells as well as the underlying mechanisms for these effects. 2 Ginsenoside Rh2 potently inhibited the proliferation of HL-60 cells in both a dose- and time-dependent manner with an $IC_{50}$, $20{\mu}M$. 3 DNA flow-cytometry indicated that ginsenoside Rh2 markedly induced a $G_1$ phase arrest of HL-60 cells. 4 Among the $G_1$ phase cell cycle-related proteins, the levels of cyclin-dependent kinase(CDK)4, 6 and cyclin D1, cyclin D2, cyclin D3 were reduced by ginsenoside Rh2, whereas the steadystate levels of CDK2 and cyclin E were unaffected. 5 The protein levels of a CDK inhibitor p16, $p21^{CIP1/WAF1}$ and $p27^{KIP1}$ were markedly increased by ginsenoside Rh2. 6 Ginsenoside Rh2 markedly enhanced the binding of $p21^{CIP1/WAF1}$ and $p27^{KIP1}$ with CDK2 and CDK6, resulting in the reduced activity of both kinases and the hypophosphorylation of Rb protein. 7 We furthermore suggest that ginsenoside Rh2 is a potent inducer of the differentiation of HL-60 cells, based on observations such as a reduction of the nitroblue tetrazolium level, an increase in the esterase activities and phagocytic activity, morphology changes, and the expression of CD11b, CD14, CD64 and CD66b surface antigens. 8 In conclusion, the onset of ginsenoside Rh2-induced the $G_0/G_1$ arrest of HL-60 cells prior to the differentiation is linked to a sharp up-regulation of the $p21^{CIP1/WAF1}$ level and a decrease in the CDK2, CDK4 and CDK6 activities. This is the first report demonstrating that ginsenoside Rh2 potently inhibits the proliferation of human promyelocytic HL-60 cells via the $G_1$ phase cell cycle arrest and differentiation induction.
Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein hormone secreted from primarily cells of the peritubular capillary endothelium of the kidney, and is responsible for the regulation of red blood cell production. We constructed and expressed dimeric cDNAs in Chinease hamster ovary (CHO) cells encoding a fusion protein consisting of 2 complete human EPO domains linked by a 2-amino acid linker (Ile-Asp). We described the activity of dimeric hyperglycosylated EPO (dHGEPO) mutants containing additional oligosaccharide chains and characterized the function of glycosylation. No dimeric proteins with mutation at the $105^{th}$ amino acid were found in the cell medium. Growth and differentiation of the human EPO-dependent leukemiae cell line (F36E) were used to measure cytokine dependency and in vitro bioactivity of dHGEPO proteins. MIT assay at 24 h increased due to the survival of F36E cells. The dHGEPO protein migrated as a broad band with an average molecular mass of 75 kDa. The mutant, dHGEPO, was slightly higher than the wild-type (WT) dimeri-EPO band. Enzymatic N-deglycosylation resulted in the formation of a narrow band with a molecular mass twice of that of of monomeric EPO digested with an N-glycosylation enzyme. Hematocrit values were remarkably increased in all treatment groups. Pharmacokinetic analysis was also affected when 2.5 IU of dHGEPO were intravenously injected into the tails of the mice. The biological activity and half-life of dHGEPO mutants were enhanced as compared to the corresponding items associated the WT dimeric EPO. These results suggest that recombinant dHGEPO may be attractive biological and therapeutic targets.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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